目的:探讨肝癥口服液含药血清对人肝癌BEL-7402细胞系侵袭和转移的影响及其机制.方法:应用细胞培养技术培养人肝癌细胞株BEL-7402,采用血清药理学的方法,以原发性肝癌患者服用肝癥口服液前后血清处理肝癌细胞,通过Boyden小室模型测定其侵袭力和黏附力,细胞迁移实验测定细胞运动能力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP2),基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2),整合素β_1(integrinβ_1)和上皮钙黏附素(E-cd)表达的改变.结果:肝癥口服液含药血清能明显抑制肝癌细胞侵袭力(25.79±2.31 vs 49.54±4.32,P<0.05)、黏附力(42.38±3.19 vs 68.67±5.36,P<0.05)及运动能力(34.72±3.43 vs 54.16±5.35,P<0.05).形态学观察发现,服药后血清组细胞形态较圆,伪足数目较少,MMP2阳性表达细胞减少(289.61±25.32 vs 439.28±22.45,P<0.05),TIMP2阳性表达细胞增多(348.75±34.58 vs 250.53±16.48,P<0.05),MMP2/TIMP2比值下降(0.83 vs 1.76,P<0.05);integrinβ_1表达减少(286.05±28.47 vs 389.57±21.23,P<0.05),E-cd的表达则增加(385.57±26.36 vs 230.72±13.41.P<0.05).结论:肝癥口服液含药血清能抑制肝癌BEL-7402细胞侵袭与转移,其机制可能与直接抑制细胞迁移运动,抑制细胞基质溶解相关基因蛋白MMP2表达,促进TIMP2表达;抑制黏附分子integrinβ_1的表达,促进E-cd表达有关.
目的:研究黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系黏附、细胞凋亡及细胞周期的影响,探讨三者之间的关系.方法:应用细胞培养技术培养BEL-7402细胞,不同浓度黄芩甙处理肝癌细胞,通过Boyden小室模型测定其黏附力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞integrinβ_1、E-cd表达的改变及细胞凋亡率.结果:5,10,20mg/L黄芩甙处理组细胞黏附力与对照组相比均有显著降低(52.38±3.83,35.63±2.32,26.58±1.13 vs 84.32±6.74.p<0.05).对照组表现出纤维母细胞样形态,伸出形态各异的伪足.而黄芩甙组细胞形态较圆,伪足数目相对较少,电镜下显示细胞微绒毛明显减少,甚至消失.5,10,20mg/L黄芩甙组细胞integrinβ_1表达较对照组降低(354.07±18.17,319.44±15.21,291.49±12.88 vs 407.54±20.58:P<0.05),E-cd的表达则增加(335.5±20.18,376.4±22.36,393.8±25.68 vs 251.72±12.34,P<0.05).黄芩甙作用后,随黄芩甙浓度增加肝癌细胞G_0/G_1,期比例逐步增高,S期细胞减少,同时细胞凋亡率增加.结论:黄芩甙对肝癌BEL-7402细胞发挥抗黏附作用,其机制可能与抑制黏附分子E-cd的表达,促进integrinβ_1表达有关.在抗黏附的同时细胞周期发生改变,细胞凋亡增多.
