罗建红
- 作品数：11 被引量：24H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 在发育过程中小鼠脑N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位蛋白的表达被引量：1
- 1998年
- 为了测定新生小鼠发育过程中脑组织中ＮＭＤＡ受体亚单位蛋白的表达水平，用ＮＭＤＡ受体亚单位特异的抗体，通过引入成年小鼠皮层组织系列稀释的样品作标准，建立了定量的免疫印迹分析法。并对出生后不同日龄（２～３５ｄ）新生小鼠前脑和小脑组织中ＮＭＤＡ受体ζ１、ε１和ε２亚单位蛋白进行了测定。结果表明，ζ１、ε１和ε２三个亚单位在大鼠前脑组织中呈相似的增加趋势，只是ε１的表达明显的滞后。而小脑此３种亚单位的表达绝对量均明显低于前脑组织，并且趋势各不相同：ζ１经明显的下降后维持在一定的水平，ε１呈增加趋势，ε２出生后５ｄ即有相当的表达，以后下降，３周后几乎不能测出。上述结果与相应的ｍＲＮＡ半定量分析结果基本一致。
- 罗建红朱丽君郑功沈海清
- 关键词：NMDA受体亚单位发育免疫印迹小鼠
- HeLa-MSH2-细胞的生物学特性被引量：1
- 1997年
- 凝胶阻滞实验证实转染了本实验室构建的hMSH2反义RNA表达质粒的HeLa细胞（HeLa－MSH2-细胞），其细胞抽提物中C·T碱基对和A·C碱基对错配结合蛋白表达明显降低。该细胞系细胞与母本HeLa细胞在生长速率方面无差异，但经十几次传代后，其生长速率加快约两倍，出现了次磺酸磷酸核糖转移酶（hypoxanthinephosphoribosyltransferase,hgprt）自发突变率升高，但不存在N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（N－methyl－N’－nitro－N－nitrosogyanidine,MNNG）耐受。认为hMSH2蛋白在错配修复系统中起了错配识别和结合作用，但该基因的突变不能完全解释道传性非息向性结直肠癌（hereditarynonpolpoiscolorectalcarcinoma，HNPCC）病人来源的细胞系的生物学改变。
- 钱瑛余应年陈星若罗建红谢海洋
- 关键词：结肠肿瘤细胞生物学HMSH2RNA
- c－k－ras反义寡核苷酸抑制HCe8693细胞生长及p21^（ras）表达的序列特异性被引量：2
- 1996年
- 本文采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），并结合ＰＣＲ产物直接测序法，证明人大肠癌细胞系ＨＲ８３４８和ＨＣｅ８６９３的ｋ－ｒａｓｃＤＮＡ片段（第３～８３密码子）中存在第１２密码子ＧＧＴ→ＧＡＴ突变，未发现其它突变或ＲＮＡ剪接异常．用分别与野生型和上述突变型ｋ－ｒａｓ第９～１５密码子互补的１８聚硫代磷酸型寡核苷酸（两者仅存在一个碱基差别）及随机设计的对照寡核苷酸（终浓度为６μｍｏｌ·Ｌ－１），发现与突变型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸能抑制ＨＣｅ８６９３细胞生长并有ｐ２１ｒａｓ蛋白表达量的抑制；而与野生型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸及随机合成的对照寡核苷酸对之无明显抑制作用，说明ｃ－ｋ－ｒａｓ反义寡核苷酸对ＨＣｅ８６９３细胞生长和ｐ２１ｒａｓ蛋白合成的抑制作用存在明显的核苷酸序列特异性．
- 钱瑛余应年董海涛陈星若罗建红
- 关键词：原癌基因反义寡核苷酸
- 12—0—十四酰基咐(口拜)醇—13—乙酸酯(TPA)诱导的NIH 3T3细胞核内癌基因c-fos,c-myc,c-myb的表达能被十六酰基肉毒碱(PMC)抑制
- 1993年
- 用快速印迹(quick blot)和延续转录法(run-offtranscription assay),证明在1-o-十四酰基咐(口拜)醇-13-乙酸酯(12-o-tetradccanoyl phorbol-13-acctate,TPA)刺激下,静止期NIH 3T3细胞中c-fos,c-myc,c-myb表达均有增加,但在蛋白激酶C(protcin kinase c,PK—C)抑制剂十六酰基肉毒碱(pamitoyl-L-carnitinc chloride,PMC)存在下,TPA诱发的c-fos,c-myc,c-myb表达均受到抑制。说明促癌剂TPA的基因诱导作用是通过PK-C介导的。c-fos等初级反应基因表达的检测和PK-C在这些基因表达中的作用分析有希望作为TPA型促癌物的检测方法。
- 斯民良余应年罗建红
- NMDA受体在发育过程中的表达及其生理意义被引量：12
- 1998年
- 在脊椎动物的中枢神经系统中，谷氨酸是一种重要的兴奋性神经递质，它在脑中的众多功能是由不同的受体所介导的。谷氨酸受体可分为离子型（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）和代谢型（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ）两大类。离子型谷氨酸受体即为配体门控性离子通道（ｌｉｇａｎｄ－ｇ...
- 郑功罗建红
- 关键词：NMDA受体谷氨酸发育神经递质
- 人大肠癌细胞系HR 8348和HCe 8693 K－ras基因的点突变分析被引量：2
- 1994年
- 本文采用修饰引物的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）所建立的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），并结合ＰＣＲ直接测序方法，首次分析了我国建株大肠癌细胞系ＨＲ８３４８和ＨＣｅ８６９３的Ｋ－ｒａｓ基因点突变。发现该两细胞系均存在ｋ－ｒａｓ第１２密码子的点突变，其方式均为ＧＧＴ→ＧＡＴ；但未发现Ｋ－ｒａｓ第１３和６１密码子的突变。
- 罗建红余应年
- 关键词：大肠肿瘤癌基因突变
- 人细胞色素P450 2B6的GST融合蛋白及其抗体的制备被引量：2
- 2000年
- 目的 :获得纯化抗原用于制备CYP2B6多克隆抗体。方法 :PCR扩增目的基因片段 ,亚克隆入融合蛋白表达载体pGEX - 3b ,构建了重组质粒pGEX/ 2B6。然后将该重组质粒转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE分离 ,获纯化融合蛋白GST - 2B6。用GST - 2B6免疫BALB/C小鼠 ,自腹水中获取CYP2B6多克隆抗体 (2B6pAb)。结果 :融合蛋白GST - 2B6 (CYP2B6 2 0 2～ 35 2aa) ,并获其特异的多克隆抗体。结论 :通过构建融合蛋白重组表达质粒pGEX/ 2B6 ,用获得的初步纯化融合蛋白GST -
- 林筱洁罗建红余应年
- 关键词：细胞色素P450抗体
- 12－○－十四酰基咐拜醇－13－乙酸酯（TPA）诱导的NIH3T3细胞核原癌
- 1994年
- 本文采用快速印迹杂交（ｇｕｉｃｋｂｌｏｔ）和延续转录试验（ｔｕｎ－ｏｆｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｓｓａｙ）两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞系观察到腺苷二磷酸核糖基转移酶（ＡＤＰＲＴ）的特异性抑制剂３－氨基苯甲酰胺（３ＡＢ）并不能阻断促癌物１２－Ｏ－十四酰基咐醇－１３－乙酸酯（ＴＰＡ）诱发的细胞周期依赖性的核原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｍｙｂ的表达。这一结果直接表明，核原癌基因的表达和ＡＤＰ核糖化作用这两种核内生化事件在细胞周期中的时序是不相同的。
- 罗建红余应年斯民良
- 关键词：致癌物腺苷二磷酸
- hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
- 1998年
- 利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），特异地扩增ＨｅＬａ细胞中ｈＭＳＨ２ｃＤＮＡ的最保守区域，并将其克隆到ＴＡ载体，从重组质粒两端进行序列分析，证实为目的片段．将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体ｐＲＥＰ９的ＢａｍＨⅠ和ＫｐｎⅠ位点之间，筛选后得ｐＲＥＰ９－ｈＭＳＨ２反义表达重组质粒．用磷酸钙－ＤＮＡ共沉淀法将重组质粒ＤＮＡ及载体ＤＮＡ分别导入ＨｅＬａ细胞，经Ｇ４１８筛选，扩大培养．凝胶阻滞实验证实转染有ｐＲＥＰ９－ｈＭＳＨ２重组质粒的ＨｅＬａ－ＭＳＨ２－细胞抽提物中Ｇ·Ｔ和Ａ·Ｃ错配结合蛋白质表达明显降低。
- 钱瑛余应年陈星若罗建红谢海洋
- 关键词：CDNA质粒
- HeLa-MLH1^-细胞的生物学特性检测
- 1998年
- 对本实验室构建的错配修复功能缺陷细胞ＨｅＬａ－ＭＬＨ１－的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶（ｈｐｒｔ）基因自发突变率进行检测，发现相对于无ｈＭＬＨ１缺陷的对照细胞ＨｅＬａ－Ｒ９和ＨｅＬａ而言，其突变率分别提高了８７８倍和３５３倍（Ｐ＜００１），此表型改变与本实验室已构建的另一错配修复功能缺陷细胞ＨｅＬａ－ＭＳＨ２－相同。本实验室还证明ＨｅＬａ－ＭＬＨ１－细胞存在甲基硝基亚硝基胍（ｍｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ，ＭＮＮＧ）耐受，这与我们在ＨｅＬａ－ＭＳＨ２－细胞实验中的发现不同，提示不同的错配修复基因功能缺陷对细胞表型影响不尽相同。
- 张芸钱瑛余应年汪爱今罗建红
- 关键词：细胞实验生物学特性突变
