王曼玲 作品数:29 被引量:90 H指数:5 供职机构: 中国科学院亚热带农业生态研究所 更多>> 发文基金: 中国科学院“百人计划” 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究 被引量:5 2012年 为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,并以此为模板,扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1 kb,经限制性内切酶图谱分析,组建亚克隆并进行测序,其开放阅读框长957 bp,编码319个氨基酸,与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%,证明所克隆的cDNA序列的准确性。构建该基因的反义表达载体,并通过农杆菌介导的方法成功转化米良一号猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Miliang-1),得到再生苗。取14株经PCR检测,其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带,阳性植株占71.4%。实时荧光定量PCR分析结果显示,再生苗ACO基因的表达量低于野生型58%~81%。 田宏现 苑平 王曼玲 刘艺 李菁 夏新界 谭晓风关键词:猕猴桃 ACC氧化酶 农杆菌介导 反义表达载体 一个水稻多逆境响应基因OsMsr3克隆与表达分析 2009年 为深入探讨水稻对逆境的反应机理并寻找新的植物耐逆基因,采用Affymetrix水稻表达芯片(含51279个转录本)分析了培矮64S全基因组在不同逆境(高温、干旱、低温)胁迫下、不同生育时期叶片和穗中的表达谱,从中筛选出一个受多种逆境诱导表达的基因OsMsr3(Oryza sativa L.multiple stresses responsive gene3,Gen Bank登陆号为FJ383169)。定量实时PCR分析结果进一步证实了此基因在逆境条件下的诱导表达模式。用RT—PCR方法扩增获得了包含其完整开放阅读框的cDNA克隆,序列分析表明,其ORF大小为480bp,编码一个具有160个氨基酸残基的低分子量热激蛋白,推测分子量约为18.0kD;pI约为6.8。对其编码的蛋白质进行分析,发现其羧基端存在一个HSP20的蛋白保守结构域,与其他植物中的低分子量热激蛋白的相似牲介于33.7%-97.5%。对其可能的启动子序列分析,发现6类与逆境反应有关的顺式作用元件。推测该基因在逆境反应中起着重要的作用,进一步的研究正在进行中。 崔延春 徐孟亮 李落叶 王曼玲 徐国云 夏新界关键词:水稻 逆境 基因芯片 一种培育耐逆转基因水稻的方法 本发明公开了一种培育耐逆转基因水稻的方法。本发明提供了OsMsR11蛋白在调控植物耐逆性和/或植物生长发育中的应用;所述OsMsR11蛋白是如下(a)或(b)或(c):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;... 夏新界 胡叶平 王曼玲文献传递 同源四倍体拟南芥的耐锌性及其机理 被引量:2 2015年 锌(Zn)是植物生长发育所必需的微量元素,但其过量积累也会对植物产生毒害作用。通过对同源四倍体拟南芥进行高浓度锌处理,发现四倍体拟南芥对锌具有高耐受性和低积累性的特点。在高浓度锌胁迫条件下,同源四倍体的根长和生物量较野生型对照均有明显增加,并且谷胱甘肽(GSH)的含量也明显升高。定量实时PCR(q RT-PCR)分析表明,一些锌胁迫响应基因的表达水平发生了显著改变。以上结果表明,锌胁迫响应基因表达水平的改变以及GSH含量的升高可能在四倍体拟南芥的耐锌过程中发挥重要作用。 任冲 徐国云 李明娟 崔延春 王曼玲 夏新界关键词:基因表达 谷胱甘肽 水稻叶片特异性不表达启动子pOsMTG3的克隆与表达分析 被引量:1 2016年 利用水稻基因芯片筛选到1个在水稻孕穗期和抽穗期穗中的相对表达量明显高于苗期、孕穗期和抽穗期叶片中相对表达量的基因Os MTG3,该基因在孕穗期穗中受低温、干旱诱导上调表达,而在抽穗期穗中受低温诱导下调表达。把该基因ATG密码子上游1.8kb左右的DNA片段预测为启动子区,并将其命名为p Os MTG3。用PCR技术克隆该启动子,并以GUS基因作为报告基因,在水稻中分析了该启动子在不同时期不同组织中的表达特性。GUS组织化学染色分析表明:p Os MTG3启动子能启动GUS基因在水稻根、芽、茎、穗中表达,而不能启动GUS基因在叶片中表达,是一个全新的叶片特异性不表达的启动子。 余艳 Pedro S.C.F.Rocha 任冲 徐国云 王曼玲 崔延春 夏新界关键词:水稻 启动子 基因表达 水稻多逆境诱导基因OsMsr4的克隆与表达分析 被引量:3 2009年 为深入了解水稻逆境反应的分子机理和发现新的耐逆相关功能基因,采用A ffym etrix水稻表达芯片分析超级稻两优培九母本培矮64S(O ryza sativaL.)不同生长发育时期、不同组织器官全基因组在低温、干旱、高温逆境胁迫下的表达水平,筛选出多个多因子诱导高表达特异基因(待另文发表)。O sM sr4是其中一个在多种逆境条件,各生长发育时期与组织器官,其表达量均显著上调的基因,用实时定量PCR方法对其表达水平进行了进一步的分析,所得结果与基因芯片结果基本吻合。用PCR方法扩增获得长为550 bp全长基因序列,其编码的144个氨基酸残基形成Cys2H is2型双锌指结构蛋白,并且锌指结构的α-螺旋区含有植物锌指蛋白特定的保守序列QALGGH。因此,OsM sr4有可能是TFⅢA型锌指蛋白,作为转录因子参与各种环境胁迫应答反应,调控多个逆境相关基因表达。 王曼玲 Rocha Pedro 李落叶 徐孟亮 夏新界关键词:水稻 逆境 基因芯片 实时定量PCR 基因克隆 与水稻粒长相关的蛋白ZmGL及其编码基因与应用 发明公开了蛋白ZmGL编码基因在制备与水稻粒长相关的表达载体中的应用。蛋白ZmGL在制备水稻粒长调控制剂中的应用。本发明还公开了一种与水稻粒长相关的蛋白ZmGL的表达载体。过量表达玉米ZmGL基因可引起水稻种子极显著增长... 夏新界 张斌 王曼玲文献传递 一种转基因植物高特异定性检测方法 2011年 近年来,植物基因工程技术的迅速发展使得转基因植物及其产品与人们生活越来越密切.与此同时,转基因植物检测技术不断丰富和发展,主要是在整合、转录、翻译等不同水平上检测转基因产物的存在.但各种方法都存在不同的缺点,如缺乏特异性、假阳性较高,操作繁琐、成本高等.利用TAIL-PCR(thermal asym-metric interlaced PCR)和融合克隆结合建立一种简单、快速、特异性高的转基因植物检测方法,以两个转基因植株(C3-3株系和TB-5株系)为例,通过TAIL-PCR获得其侧翼序列后设计特异引物,并用于特定转基因植株的筛选. 许娜 黎娟华 宋书锋 王曼玲 彭明 夏新界关键词:转基因水稻 整合位点 侧翼序列 一个新的水稻逆境响应基因OsMsr1的表达与克隆 被引量:18 2008年 为深入了解植物的逆境反应机理和发现新的水稻耐逆基因,采用Affymetrix水稻表达芯片(含51279个转录本)分析了超级稻两优培九母本培矮64S不同生长发育时期、不同组织器官全基因组在低温、干旱、高温逆境胁迫下的表达水平,筛选出众多表达水平显著升高与降低的基因。OsMsr1(Oryza sativa L.multiple stresses responsive gene 1,Gen Bank登录号为EU284112)是其中一个受高温、低温与干旱诱导、在各生长发育时期与组织器官均显著上调的基因,用实时定量PCR方法对其表达水平进行了进一步的分析,所得结果与基因芯片结果基本吻合,因此,此基因为一多逆境响应基因。用RT-PCR方法扩增获得了包含其完整ORF(open reading frame)的cDNA克隆。根据其ORF序列进行预测,此基因编码一个包含89个氨基酸残基的小分子蛋白,分子量约为10kD,pI约为5。搜索有关数据库,在水稻、玉米、小麦与拟南芥中找到有高相似性的基因,但功能未知,也未发现相同与类似的已知功能的基因保守结构域。对其可能的启动子序列分析,发现5个与逆境反应有关的顺式作用元件。因此,我们认为该基因为一新的水稻耐逆候选基因,进一步的研究正在进行。 徐孟亮 陈荣军 ROCHA Pedro 李落叶 王曼玲 徐国云 夏新界关键词:水稻 逆境 基因芯片 实时定量PCR 基因克隆 玉米基因ZmSGL增加水稻粒长和粒重功能的初步研究 2018年 从玉米中克隆了一个基因ZmSGL(Zea mays L.stress tolerance and grain length),该基因与水稻粒长基因OsSGL的编码序列一致性为62.3%。本工作在增加水稻粒长和粒重的功能方面对ZmSGL进行了初步研究。研究表明,ZmSGL编码推定的DUF1645超家族蛋白。在水稻中表达玉米ZmSGL基因可引起水稻种子极显著增长增重。与野生型水稻相比,转基因水稻粒长增长10.6%,千粒重增重8.4%。转基因水稻小穗颖壳中的细胞数量和细胞大小增加,幼穗中CDKA1、CYCA2;1和CYCB2;1等细胞周期基因的表达水平升高。玉米基因ZmSGL作为谷粒大小调节因子,可应用于改善主要农作物的谷粒性状。 张斌 张新 张新 李明娟 殷绪明 王曼玲 殷绪明关键词:水稻 玉米 粒长 粒重