王世霞
- 作品数：14 被引量：49H指数：4
- 供职机构：马萨诸塞大学更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金江苏省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA免疫技术在高质量单克隆抗体诱导开发中的应用进展被引量：4
- 2017年
- 近年来研究发现,DNA疫苗能有效诱导机体产生高质量的抗体反应。深入探讨了DNA免疫技术诱导宿主免疫反应尤其是抗原特异性抗体反应的分子机制,并介绍如何将这一技术应用到单克隆抗体的诱导开发,包括DNA疫苗构建、递送方式、分子佐剂和DNA初免-蛋白质加强免疫等有关具体技术要点。
- 刘淑颖陈雨欣陈雨欣王世霞
- 关键词：DNA免疫单克隆抗体DNA疫苗
- 新型乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白和核心区酸疫苗的免疫原性研究
- 目的:观察新型乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原中蛋白(MHBs)和核心抗原(HBcAg)核酸疫苗的免疫原性研究.方法:应用新型人体应用载体质粒pSW3891构建MHBs核酸疫苗(pSW3891/MHBs/adr)和HBcA...
- 邢益平王世霞黄祖瑚蔡洁李军卢山
- 文献传递
- SARS核酸,蛋白质,疫苗以及它们的用途
- 本发明提供了经过密码子优化的核酸，蛋白质，疫苗和抗体。
- 卢山周吴德惠王世霞
- 文献传递
- 华东部分地区12岁以下儿童5型腺病毒感染状况调查被引量：1
- 2010年
- 目的调查12岁以下儿童腺病毒（adenovirus，Ad）感染所诱发的免疫力状况，尤其是针对5．型腺病毒（Ad5）的免疫力状况，旨在筛选应用Ad5重组疫苗和基因治疗剂的适宜人群。方法通过采集华东部分省市和地区12岁以下儿童的血清标本，采用ELISA方法检测Ad非特异性总抗体（Ad Total antibody，Ad-TAb），用蚀斑减少中和试验（Plague Reduction Neutralization Test，PRNT）来检测Ad5中和抗体（Ad5 neutralizing antibody，Ad5-NAb），用Stata9．0软件进行数据分析。结果经过ELISA和PRNT检测，发现Ad-TAb和Ad5-NAb的滴度水平以及各组标本的阳性率，均随着年龄的增长而呈上升的趋势。以低于2岁的年龄组各项数据最低，与其它各组有显著性差异（P〈0．05）.结论在12岁以下儿童人群中，以低于2岁的年龄组应用Ad5型重组疫苗或基因治疗剂是可行的。
- 马春玲董立钟天鹰王世霞卢山
- 关键词：腺病毒中和抗体酶联免疫吸附试验
- H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。
- 许莹郭巍王世霞黄文强张璐卢山周建华相文华黄祖瑚
- 关键词：血凝素类
- 乙型肝炎病毒核心区DNA疫苗接种后H—2^d小鼠的特异性免疫应答被引量：9
- 1999年
- 目的观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心区ＤＮＡ疫苗接种后ＢＡＬＢ／ｃ（－２ｄ）小鼠的特异性免疫应答。方法构建ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗（ＰＪＷ４３０３／ＨＢｃ）；用基因枪法和肌肉注射祛将该ＤＮＡ疫苗接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢＣ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ａ）；５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果该ＤＮＡ疫苗在体外转染细胞中可良好表达ＨＢｃＡｇ。血清抗－ＨＢｃ终点滴度在ＤＮＡ疫苗基因枪组和肌肉注射接种组小鼠分别为１：３２８０５０和１：１０９３５０．两组小鼠的抗－ＨＢｃＩｇＧ亚类均以ＩｇＧ２ａ略占优势。两组小鼠的ＨＢＣＡｔｈｅ异性ＣＴＬ杀伤活性分别达到５１．１％和５５．２％。结论ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗在小鼠实验中具有良好的细胞免疫和体液免疫原性。
- 黄祖瑚卢山刘宁王世霞
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA疫苗
- 禽流感HA基因密码子优化的DNA疫苗构建及其免疫原性的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的构建H5N1亚型禽流感病毒株密码子优化的血凝素(HA)DNA疫苗并研究其免疫原性。方法应用MacVector软件分析H5N1亚型禽流感病毒A/VietNam1203/04株HA(H5-VNHA)基因序列,对这些序列进行密码子优化处理,人工合成优化后的H5-VNHA基因。将密码子优化H5-VNHA基因与pSW3891质粒连接,并以人组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)信号肽取代H5-VNHA信号肽,构建成表达H5-VNHA基因的重组质粒,命名为HA-VN.tPA(即密码子优化的H5-VNHA基因DNA疫苗)。以HA-VN.tPA转染293T细胞,应用蛋白质印迹法检测转染细胞中HA蛋白的表达。以HA-VN.tPA对2只新西兰兔进行DNA免疫,用ELISA方法检测分析免疫后兔血清中HA特异性抗体的产生。结果密码子优化的H5-VNHA基因中哺乳动物细胞偏爱的密码子频率高于野生型H5-VNHA基因。蛋白质印迹法分析结果表明,HA-VN.tPA转染293T细胞后,细胞裂解液中检测出HA蛋白的表达。ELISA分析结果表明,以HA-VN.tPA免疫3次后,实验兔体内产生了较高水平的HA特异性抗体(血清中平台期抗体滴度达1:13500)。结论成功构建了H5N1亚型禽流感病毒密码子优化的HA基因DNA疫苗,该疫苗可引导免疫后宿主体内产生高滴度特异性抗体。
- 张春华张璐王世霞李军黄祖瑚卢山
- 关键词：密码子
- 流感病毒核酸、多肽及其用途
- 本文提供了编码流感病毒多肽的密码子优化的核酸以及该核酸和多肽在诱导免疫应答中的用途。
- 卢山王世霞
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒核心抗原基因疫苗对小鼠的体液和细胞免疫原性观察被引量：15
- 1999年
- 目的观察不同品系小鼠（Ｈ２ｂ，Ｈ２ｄ）经乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃＡｇ）基因疫苗免疫后特异性辅助性Ｔ细胞反应类型和特异性细胞毒性Ｔ细胞活性。方法Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法鉴定该基因疫苗的体外表达产物；基因枪法和肌内注射法接种该基因疫苗；间接ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗ＨＢｃＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ａ）水平；５１铬释放法测定小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性细胞毒性Ｔ细胞活性。结果两种品系小鼠经不同方法接种该基因疫苗后均产生高滴度血清抗ＨＢｃ（１∶１０９３５０～１∶３２８０５０）；抗ＨＢｃＩｇＧ亚类以ＩｇＧ２ａ占优，肌内注射法接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠后尤然。各组小鼠的ＨＢｃＡｇ特异性细胞毒性Ｔ细胞杀伤活性均达５０％以上。结论该基因疫苗具有良好的体液免疫和细胞免疫原性，值得进一步探索其临床应用前景。
- 黄祖瑚卢山刘宁王世霞王世霞李军
- 关键词：乙型肝炎核心抗原基因疫苗疫苗
- 密码子优化对乙肝病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗免疫原性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:观察密码子优化能否增强乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗的免疫原性。方法:根据乙型肝炎病毒(adr亚型)表面抗原中蛋白(MHBs)的氨基酸序列,在不改变其氨基酸序列的基础上,设计并人工合成了密码子优化的基因,并将该基因克隆到核酸疫苗载体pSW3891中,构建了密码子优化的表达MHBs核酸疫苗(命名为:pSW3891/MHBs/adr/opt,简称opt)。用上述核酸疫苗与表达野生型MHBs核酸疫苗(命名为:pSW3891/MHBs/adr,简称adr)及空载体质粒pSW3891一起瞬时转染293T细胞,应用蛋白质印迹法检测转染细胞中MHBs的表达。采用肌肉注射法,以opt、adr及pSW3891,分别对BALB/c小鼠进行免疫。用ELISA方法检测免疫后小鼠血清中HBs抗体的滴度,ELISPOT法检测免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN-γ的脾细胞。结果:opt和adr均可在体外293T细胞中高效表达,且opt的蛋白表达量要高于野生型。opt免疫组小鼠特异性抗体滴度和免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN-γ脾细胞数量都要显著的高于adr免疫组小鼠。结论:密码子优化可以增强乙型肝炎病毒DNA疫苗在体外的蛋白表达量及免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫原性。
- 杜合娟王世霞李军黄祖瑚卢山邢益平
- 关键词：密码子优化表面抗原核酸疫苗免疫原性
