邢益平
- 作品数:45 被引量:98H指数:5
- 供职机构:江苏省人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种随机引物联合多特异性DNA片段检测结核分支杆菌的新方法被引量:2
- 2014年
- 目的:针对目前结核性疾病实验室诊断的局限性,探索一种更为敏感和特异的结核分枝杆菌DNA检测新方法。方法:选取10株江苏地区流行的结核分支杆菌(MTB)菌株,选取临床其他常见菌株及分枝杆菌菌株作为对照组,分别提取DNA作为随机引物的模板。参考国内、外文献设计12条随机引物,并分别对MTB及对照菌株进行单个引物随机扩增,2%的琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行分离并切胶纯化,通过TA克隆将纯化片段连接到质粒pEASYTM-T5 Zero并进行测序,通过BLAST-nr比对验证是否为MTB DNA片段。按照所确定的MTB片段序列,在其内部设计、合成一对特异性引物。用此特异性引物扩增对应的随机引物扩增产物,获得MTB特异性条带图谱。并将该方法检测的敏感性和特异性与临床上常用的real-time PCR进行比较。结果:经BLAST-nr比对,随机引物IS986F,S535及IS986R扩增的条带与MTB DNA有高度同源性(均为99%)。随机引物IS986F、S535和IS986R分别联合其特异性引物可以检测稀释105倍、105倍和103倍的MTB DNA,其特异性分别为100%、90%和80%。常规real-time PCR可检测出稀释104倍的MTB DNA。结论:随机引物IS986F联合其特异性引物检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性优于S535、IS986R两组,特异性为100%,且灵敏度优于常规real-time PCR法。
- 黄威邢益平严有德严玉娟艾月梅
- 关键词:结核分支杆菌RAPDPCR
- 乙型肝炎病毒核心抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的小鼠免疫应答研究
- 2006年
- 目的构建乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和Flt3配体(FL)胞外段双表达核酸疫苗,并观察其免疫原性。方法分别将HBcAg、FL基因克隆入pJW4303载体,获得双表达核酸疫苗,体外转染293T细胞检测目的基因的表达。分组免疫BABL/c小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清抗-HBc IgG效价,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测HBcAg特异性Th1/Th2型细胞因子的分泌水平。结果所构建疫苗在体外均能表达HBcAg和FL,当基因位于内部核糖体切入位点(IRES)元件上游时表达水平明显较优。pJW4303/C/FL免疫组产生的抗-HBc IgG效价和Th1/Th2型细胞因子的分泌水平均显著优于pJW4303/C和pJW4303/FL/C组。结论成功构建双表达核酸疫苗,基因位于上游时表达水平高于下游。FL基因的引入明显增强了HBcAg核酸疫苗的免疫原性。
- 杨永林李军贺奇彬邢益平黄祖瑚
- 关键词:核心抗原乙型肝炎病毒核酸疫苗酶联免疫斑点试验
- 新型乙型肝炎病毒核心区核酸疫苗的免疫原性研究被引量:2
- 2004年
- 目的 观察新型乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)核酸疫苗的免疫原性。方法 应用新型人体应用载体质粒pSW3891构建HBcAg核酸疫苗(pSW3891/HBC),对照组和实验组Balb/c小鼠分别以基因枪法免疫对照载体质粒(pSW3891)和HBcAg核酸疫苗,采用酶联免疫吸附试验检测抗-HBc,乳酸脱氢酶(LDH)释放测定法检测小鼠HBcAg特异性CTL杀伤活性。结果 HBcAg核酸疫苗可在体外293T细胞中高效表达,免疫小鼠后可产生高滴度抗-HBc(1:97200),免疫鼠脾细胞HBc特异性CTL杀伤活性达73.25%。结论 新型HBcAg核酸疫苗在Balb/c小鼠实验中表现出良好的体液和细胞免疫原性。
- 邢益平黄祖瑚王世霞蔡洁李军卢山
- 关键词:核酸疫苗免疫原性核心抗原体液免疫细胞免疫
- 原发毛霉菌病临床特点分析
- 严友德王茜邢益平李军
- 丙型肝炎特异性诊断的比较及其意义探讨被引量:3
- 1995年
- 丙型肝炎特异性诊断的比较及其意义探讨邢益平,S.Bowdcn,S.Locarnini自Choo等首先发现并应用融合蛋白C100-3诊断丙型肝炎以来,一些新的检测特异性抗体或直接检测病毒核酸的诊断方法相继问世,大大提高了丙型肝炎检测的敏感性和特异性。本...
- 邢益平Bowd.,S
- 关键词:丙型肝炎聚合酶链反应丙型肝炎病毒核糖核酸
- 优思弗治疗原发性胆汁性肝硬化的疗效观察被引量:7
- 2006年
- 目的:分析熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化的疗效,旨在提高对该病的治疗水平。方法:将临床、病理学诊断原发性胆汁性肝硬化的30例住院患者随机分为两组,总结应用熊去氧胆酸治疗组与对照组的患者治疗前后的临床特征、各项生化等指标并进行统计学分析。结果:30例患者治疗前两组肝功能无明显差异。治疗组在治疗前后ALT、AST、TBil、ALP、GGT存在差异,对照组在治疗前后ALT、AST、TBil存在差异,两组治疗后肝功能比较,TBil、GGT存在差异。临床分析,治疗后16例治疗组中10例患者显效,5例患者有效,总有效率98.3%;而对照组14例中,4例显效,5例有效,总有效率64.3%,两组病例治疗后有明显的统计学意义。在治疗过程中患者耐受性好,未见明显不良反应。结论:熊去氧胆酸可明显改善PBC患者的临床症状和肝功能生化指标,且其不良反应较小,是目前治疗PBC的首选药物。
- 戴善梅邢益平董莉王瑞云
- 关键词:熊去氧胆酸原发性胆汁性肝硬化
- 人肝细胞毛细胆管表达IL-2Rα的研究及意义被引量:1
- 2008年
- 目的了解人肝细胞毛细胆管是否表达IL-2Rα,观察其表达特异性和灵敏度。方法对正常人肝组织、慢性乙型肝炎等不同病种人肝组织进行IL-2Rα标记,通过免疫组织化学染色、免疫荧光化学染色及免疫电镜3种方法观察其表达。结果免疫组化染色法和免疫荧光染色法显示IL-2Rα标记人肝细胞膜毛细胆管面定位正确,无非特异性染色,而肝细胞膜的血窦面、细胞质、细胞核不被IL-2Rα标记。酶标记免疫电镜显示人肝细胞膜毛细胆管面有明显电子致密物沉积。结论人肝组织毛细胆管确实表达IL-2Rα,其特异性和灵敏度均优于CEA(多克隆抗体)。
- 陆忠华印永强胡锡琪朱腾方邢益平范钦和
- 关键词:IL-2RΑ免疫组织化学免疫电镜
- 不明原因发热的临床综合诊断被引量:3
- 2012年
- 不明原因发热是临床常见疑难疾病,其定义随着疾病种类的不断变化及诊断流程的进步而逐步完善。不明原因发热(feverof unknown origin,FUO)病因包括感染性疾病、风湿免疫性疾病及肿瘤性疾病三大类,三大病因各自具有不同临床特征。详细病史采集、全面体格检查及常规实验室检查对诊断FUO至关重要,必要时应及时进行相关影像学及病理学检查,疾病的最终诊断应综合分析病史及实验室检查。
- 孙桂英邢益平李军周东辉翁亚丽
- 关键词:不明原因发热肿瘤
- 突变型乙肝病毒核心抗原DNA疫苗的体外表达
- 2013年
- 目的:构建突变型核心抗原核酸疫苗,观察该核酸疫苗在体外蛋白的表达。方法:采用基因工程定点突变技术,构建5种突变型核酸疫苗,分别去除乙肝病毒核心抗原N端的第1、2位氨基酸,命名为M12,去除3、4位氨基酸命名为M34以及去除5、6位的氨基酸命名为M56,用上述构建的核酸疫苗与野生型HBc核酸疫苗(pJW4303/HBc)及空载体质粒pJW4303分别用脂质体转染293T细胞,应用蛋白印迹法检测核心蛋白的表达。结果:经过pst1和BglII双酶切和测序鉴定结果突变型核心抗原核酸疫苗构建成功。在去除2个氨基酸的核酸疫苗结果中显示:野生型pJW4303/HBc、M12、及M56体外转染293T细胞后,在细胞上清和裂解中能很好的表达,而M34上清未见表达,仅裂解中可见极少量疑似表达条带;在原有基础上分别去除第3位和第4位氨基酸,命名为M3和M4,结果显示M3上清未见表达,裂解液中可见少量表达,而M4在上清和裂解中均可见明显的表达。结论:去除核心抗原N端第3位的氨基酸(M3)可以明显影响核心抗原的表达,HBcAg氨基端第3位氨基酸对蛋白的表达可能起到重要的作用。
- 王文娟邢益平黄威李军黄祖瑚
- 关键词:突变型乙肝核心抗原核酸疫苗
- 新型乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白和核心区酸疫苗的免疫原性研究
- 目的:观察新型乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原中蛋白(MHBs)和核心抗原(HBcAg)核酸疫苗的免疫原性研究.方法:应用新型人体应用载体质粒pSW3891构建MHBs核酸疫苗(pSW3891/MHBs/adr)和HBcA...
- 邢益平王世霞黄祖瑚蔡洁李军卢山
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