李安
- 作品数：12 被引量：65H指数：4
- 供职机构：山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
- 发文基金：山东省自主创新成果转化重大专项项目“十一五”国家科技支撑计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种RT-nPCR鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗的诊断方法
- 本发明涉及一种能够鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的诊断方法。该方法设计合成了4条引物，引物P1、P2和P4是根据CSFV的高度保守区设计的，用引物P1/P2/P4进行套式PCR能...
- 沈志强李安谢金文苗立中吴信明王金良
- 文献传递
- 猪瘟病毒强毒株与疫苗C株鉴别方法的建立及疫苗病毒定量检测的研究
- 猪瘟/(Classical swine fever,CSF/)是由猪瘟病毒/(Classical swine fever virus,CSFV/)引起的一种高度接触性传染病。近年来,我国猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变...
- 李安
- 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗株猪瘟强毒
- 文献传递
- SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟疫苗病毒含量的研究
- 为建立一种能够快速定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守的5′端非编码区设计一对针对猪瘟兔化弱毒...
- 李安沈志强崔言顺谢金文王金良李建亮李峰
- 关键词：猪瘟猪瘟病毒荧光定量
- 文献传递
- 荧光定量PCR技术在分子检测上的研究进展被引量：34
- 2009年
- 荧光定量PCR技术是近年来发展起来的一种核酸定量技术,因其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确等优点成为核酸检测中的重要工具,作者将其研究进展作一综述,以供参考。
- 李安谢金文魏加贵沈志强
- 关键词：荧光定量PCR探针
- 猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用
- 对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp.该方法能...
- 李安崔言顺沈志强谢金文王金良曲光刚李峰李建亮
- 关键词：猪瘟病毒兔化弱毒疫苗
- 文献传递
- SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟疫苗病毒含量被引量：12
- 2010年
- 为建立一种能够快速定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。对GenBank登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守的5′端非编码区设计1对针对猪瘟兔化弱毒疫苗的特异性引物,扩增片段为245 bp,且不与牛病毒性腹泻病毒以及其他猪源病毒发生非特异性反应。应用实时荧光定量RT-PCR法对16份猪瘟脾淋苗和细胞苗进行定量检测,结果表明,102拷贝/μL的总RNA即能得到特异性扩增,在107~102拷贝/μL线性范围内有良好的扩增曲线,并与兔体定型热反应有良好的相关性。该法具有敏感性、特异性、重复性好等优点,可望取代传统的兔热法用于猪瘟疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供一种新的有效工具。
- 李安崔言顺沈志强谢金文王金良李建亮曲光刚李峰
- 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量
- 猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用
- 对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp。该方法能...
- 李安崔言顺沈志强谢金文王金良曲光刚李峰李建亮
- 关键词：猪瘟病毒兔化弱毒疫苗
- 文献传递
- 新型反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗方法的建立被引量：7
- 2011年
- 对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计1对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对疫苗弱毒的特异引物,扩增片段为237bp,建立一种能够区分猪瘟病毒强毒和疫苗弱毒的敏感、特异、重复性好的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别诊断方法。该方法能将我国大陆地区流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒与疫苗弱毒完全区分开来,且不与牛病毒性腹泻病毒及其他猪源病毒发生非特异反应。应用本试验建立的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)方法可以及早对猪瘟作出准确诊断,并可将强毒感染猪迅速从弱毒疫苗免疫猪群中筛选出来,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性。
- 李安崔言顺沈志强谢金文王金良曲光刚李峰李建亮
- 关键词：猪瘟病毒强毒兔化弱毒疫苗
- SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟疫苗病毒含量的研究
- 立一种能够快速定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析，在其高度保守的5'端非编码区设计一对针对猪瘟兔化...
- 李安沈志强崔言顺谢金文王金良李建亮李峰
- 文献传递
- 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法对猪瘟强毒与疫苗弱毒的鉴别研究被引量：11
- 2012年
- 为建立一种能够区分猪瘟病毒(CSFV)强毒与弱毒疫苗C株的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR结合熔解曲线分析方法,本研究对GenBank中登录的25株CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗C株全基因组序列进行比较分析,设计一对共用下游引物以及分别针对CSFV强毒株与弱毒疫苗的特异性上游引物,其Tm值分别为84.5±0.5℃和88.5±0.5℃,熔解曲线分析显示为单特异峰。检测结果显示本实验建立的鉴别CSFV强毒感染与弱毒疫苗的荧光定量RT-PCR结合熔解曲线分析方法特异性强,对其他相关病毒无特异性扩增;敏感性高,最低检出量为5×RID50的细胞疫苗基因组拷贝;重复性好;并且扩增效率高、线性范围广、检测时间短,可对免疫猪群中CSFV强毒感染做出快速准确的鉴别检测,为有效防制猪瘟提供依据。
- 谢金文李安肖跃强王金良李峰沈志强崔言顺
- 关键词：猪瘟熔解曲线
