安晓萌
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:山东大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 棉铃虫组织蛋白酶B组织分布及不同发育阶段的表达研究
- 该实验室从棉铃虫卵巢中纯化得到了一种蛋白酶,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为30kDa,根据其能被半胱氨酸蛋白酶的特异性抑制剂E-64抑制,鉴定出这是一种半胱氨酸蛋白酶,又通过对其氨基酸N端序列的测定确认它属...
- 安晓萌
- 关键词:棉铃虫组织蛋白酶B免疫印迹免疫组化
- 文献传递
- 棉铃虫组织蛋白酶B多克隆抗体制备及鉴定被引量:4
- 2004年
- 介绍了用重组的棉铃虫组织蛋白酶B(HCB)制备兔多克隆抗体的方法。用已经克隆得到的pGEX 4T 1 HCB重组质粒转化的大肠杆菌 (Escherichiacoli)BL2 1菌株进行诱导表达 ,获得融合表达的包涵体产物。经过变性、复性等方法处理包涵体 ,获得可溶性融合蛋白。用凝血酶裂解融合蛋白 ,再经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化目的蛋白HCB ,用做抗原免疫家兔。产生的抗血清经硫酸铵沉淀 ,最后得到了抗棉铃虫组织蛋白酶B的多克隆抗体。用间接酶联免疫吸附测定法测得该抗体对重组表达的组织蛋白酶B和棉铃虫体内的组织蛋白酶B的效价分别为 1∶5 1 2 0 0和 1∶2 5 60 0。通过免疫印迹检测证明此抗体不仅可以识别重组表达的棉铃虫组织蛋白B ,而且可以识别棉铃虫卵巢匀浆液中的棉铃虫组织蛋白酶B。
- 安晓萌邵红莲杜欣军赵小凡王金星
- 关键词:棉铃虫组织蛋白酶B多克隆抗体免疫印迹