吴岚
- 作品数:7 被引量:28H指数:3
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学化学工程更多>>
- 含质粒复制起始区ori44的苏云金芽胞杆菌解离载体的构建被引量:4
- 2002年
- 将苏云金芽胞杆菌转座子Tn44 30的解离酶识别位点res分别插入克隆载体pRSETB和pUC19得到质粒pBMB12 0 1和pBMB12 0 2。这两个质粒分别经BamHI HindⅢ和EcoRI HindⅢ双酶切回收含res位点的小DNA片段 ,与穿梭载体pHT310 1经EcoRI HindⅢ双酶切后回收的含大肠杆菌复制起始区、氨苄青霉素抗性基因和红霉素抗性基因的 3 3kb片段连接 ,获得重组质粒pBMB12 0 3。封闭pBMB12 0 3两res位点外的BamHI和EcoRI位点后 ,得到解离载体pBMB12 0 4。将来源于苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种YBT 15 2 0的质粒复制起始区ori44片段插入pBMB12 0 4的两res位点之间 ,得到解离穿梭载体pBMB12 0 5。该解离载体插入壮观霉素抗性基因后电转化无晶体突变株 ,在辅助质粒所提供的解离酶作用下可发生解离消除抗性基因 ,解离频率为 10 0 % ,解离后的质粒稳定性为 93%。利用解离穿梭载体pBMB12 0
- 吴岚孙明朱晨光张蕾喻子牛
- 关键词:苏云金芽胞杆菌
- 苏云金芽胞杆菌解离载体的构建及其特性
- 该论文主要围绕构建苏云金芽胞杆菌解离载体而开展研究工作,研究结果如下:1.利用转座因子构建解离载体的可行性.利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430的解离区构建了解离载体.2.整合酶对载体解离特性的影响.整合酶对解离载体的解...
- 吴岚
- 关键词:苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因表达
- 利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1 Ac10基因的解离载体被引量:21
- 2000年
- 将cry1Ac1 0基因和苏云金芽胞杆菌的复制起始区连接在一起 ,并在其两侧按相同方向各连接一个来自苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430的解离位点 ,构成转移单位。再将革兰氏阳性细菌的抗性标记基因和大肠杆菌克隆载体 pUC1 9与之连接 ,获得含cry1Ac1 0基因的解离载体pBMB80 1。将其转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变体 ,再导入含解离酶基因的辅助质粒 pBMB1 2 0 0。在解离酶作用下 ,两个解离位点间发生重组 ,消除基在操作中的抗性标记基因等非必需基因片段 ,获得仅保留有完整cry1Ac1 0基因和来自苏云金芽胞杆菌质粒复制起始区 ,在无抗生素选择压力下能稳定遗传的重组质粒pBMB80 1B。
- 吴岚孙明喻子牛
- 关键词:苏云金芽胞杆菌
- 异源基因片段在大肠杆菌克隆株中的缺失
- 1997年
- 在研究苏云金芽孢杆菌基因克隆和表达时,发现当把以色列亚种P19和cytA蛋白基因的重组质粒转入大肠杆菌MV1190后,cytA蛋白基因起始密码上游第18位碱基至下游第48位碱基之间缺失约30个碱基,导致cytA蛋白生物活性丧失。同样也发现,把大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT3101转化大肠杆菌TG1时,其载体中约1.6kb片段也发生类似缺失事件,说明大肠杆菌细胞对某些异源基因片段具有不相容性。
- 刘子铎吴岚郑嵘孙明喻子牛
- 关键词:异源基因大肠杆菌基因克隆
- 苏云金芽孢杆菌新亚种和新基因得发现及新方法的建立
- 喻子牛孙明刘子铎邵宗泽张宏宇姚宝安程萍张利莉刘梅戴经元吴岚
- 从我国分离到苏云金芽胞杆菌1800多个菌株,鉴定出国际上公认的云南亚种,H20,从而使我国的这一研究首次进入国际行列,相继又鉴定了华中亚种,H40和中华亚种,H0。从分离菌株中筛选出对棉铃虫,小菜蛾等高毒力菌株YBT-1...
- 关键词:
- 关键词:苏云金芽孢杆菌生物测定
- 苏云金芽胞杆菌CT-43的杀虫晶体蛋白及其基因
- 苏云金芽胞杆菌CT-43,为无鞭毛菌株,产生140kDa、130kDa和65kDa杀虫晶体蛋白。通过突变得到两类突变株,Ⅰ型只产生140kDa晶体蛋白,Ⅱ型产生130和65kDa晶体蛋白。140kDa和130kDa晶体蛋...
- 孙明吴岚刘子铎喻子牛
- 关键词:杀虫晶体蛋白基因PCR
- 文献传递