余蓓蓓
- 作品数：12 被引量：94H指数：6
- 供职机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省教育厅科研计划浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 浙江省1998-2005年甲3亚型流感病毒株HA1区和NA区基因特性分析被引量：4
- 2007年
- 目的分析近几年浙江省甲3亚型流行性感冒(流感)流行株血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的特性、变异与流感流行的关系。方法选择浙江省1998—2005年流感流行期间分离的甲3亚型代表株25株,提取病毒RNA,扩增HA1和NA基因,进行序列测定,用BioEdit软件分析处理。结果浙江省近几年甲3亚型流感流行株在HA1区的核苷酸长度均为987 bp,编码329个氨基酸;在NA区的核苷酸长度为1362 bp,编码454个氨基酸。1998—2005年甲3亚型流感病毒HA1区与NA区的氨基酸同源性分别在90.9%～99.3%与95.2%～99.5%之间,HA1区的变异较NA区更大。这8年间在HA1区共发生了30个氨基酸的替代,其中14个氨基酸位点涉及HA1区的4个抗原决定簇;NA区发生了21个氨基酸替代,其中5个氨基酸位点涉及NA区的3个抗原决定簇。在1998与2002年无论是HA1区还是NA区,均产生了较大的变异,在氨基酸进化树上也形成了独立的分支。近年的甲3亚型毒株HA1区有11个糖基化位点,较早期毒株A/Aichi/2/68增加了5个,仅1998年至今的8年中就增加了3个。结论浙江省1998与2002年的二次较大规模的甲3亚型流感流行均与病毒的抗原性漂移有关。
- 卢亦愚严菊英茅海燕冯燕徐昌平周敏余蓓蓓
- 关键词：流行性感冒病毒甲3亚型基因特性
- 一种沙门氏菌的核酸恒温扩增检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种沙门氏菌核酸的恒温扩增检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包含DNA提取试剂、恒温扩增反应液、阳性对照和阴性对照；本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高；核酸扩增反应全部恒定同一温度，恒温扩增仅需35分钟，核酸试...
- 徐昌平余蓓蓓卢亦愚冯燕须周恒胡宗悦
- 文献传递
- 一种沙门氏菌核酸快速扩增检测技术的建立
- 目的 :建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增技术快速检测沙门氏菌。方法 :根据Genbank上公布的沙门氏菌invA基因序列,选择保守区域设计恒温扩增引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的特异性...
- 余蓓蓓张钧
- 关键词：沙门氏菌
- 重组酶聚合酶扩增技术研究进展被引量：29
- 2020年
- 重组酶聚合酶扩增(RPA)是一种近年来发展起来的等温扩增技术。不仅具有检测速度快,灵敏度高,特异性好等特点,而且由于该反应可以在体温条件下等温扩增,特别适用于实验室外的现场诊断与床边诊断,具有广泛的应用前景。本文对RPA技术的发展进行了回顾与综述,对RPA技术的扩增原理、反应机制、反应体系、引物探针设计的优化,以及在此基础上发展起来的RPA产物检测方法,如侧向流试纸、絮凝分析、实时荧光、电化学、化学发光、表面增强拉曼散射等诊断技术进行了全面阐述,同时分析了当前RPA技术发展中的热点问题,为该技术的深入研究和推广应用提供参考。
- 施奕徐昌平余蓓蓓卢亦愚梅玲玲
- 呼吸道合胞病毒G蛋白基因重组质粒诱导小鼠免疫保护性及机制研究
- 2010年
- 目的构建编码呼吸道合胞病毒（RSV）G蛋白基因的重组质粒，观察其对RSV感染小鼠的保护性及特异性免疫效应，为研制安全有效的RSV新疫苗提供线索和实验依据。方法利用基因重组方法构建含RSVG蛋白编码基因的重组质粒，测序和酶切鉴定，Westernblot检测目的基因经体外表达后的免疫原性。重组质粒免疫小鼠后以RSV感染，病毒滴定法检测肺组织标本中RSV滴度，HE染色法检查肺组织病理改变，ELISA检测血清抗体水平，双抗体夹心ELISA测定肺泡灌洗液（BALF）内Th1／Th2细胞因子表达量，流式细胞术检测BALF中T淋巴细胞亚群数量及活化状态。结果成功构建了编码RSVG蛋白基因的重组质粒pcDNA3．1G。Westernblot证实目的蛋白在体外具有免疫原性。被免疫小鼠感染RSV后肺组织病毒滴度降低，肺组织中未见明显的炎性细胞浸润。小鼠血清中产生较高滴度的抗RSV—GIgG。小鼠BALF细胞中CD4＋CD25＋T淋巴细胞比例显著增加，并且IFN-γ（Th1）、IL-4（Th2）两类细胞因子表达显示平衡。结论编码RSVG蛋白基因的重组质粒pcDNA3．1G能诱导产生CD4＋CD25＋T细胞亚群，对小鼠具有明显的保护作用。
- 余蓓蓓胡勇彭慧琴严杰钱景
- 关键词：呼吸道合胞病毒G蛋白重组质粒T淋巴细胞
- 浙江省2005年麻疹病毒流行株基因特性分析被引量：23
- 2006年
- 目的分析浙江省2005年麻疹病毒流行株的基因特性。方法对暴发疫情中分离的 4株麻疹病毒采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,纯化产物进行核苷酸序列测定。结果浙江省2005年分离到的4株麻疹病毒流行株均为麻疹H1基因型,属于中国麻疹病毒优势基因型。各分离株之间H基因氨基酸同源性为99．2％-99．7％,N基因氨基酸同源性为99．8％;与中国疫苗株沪191株的H基因和N基因比较,其氨基酸水平上的同源性分别为 95．2％-95．5％和95．5％。结论浙江省2005年分离到的麻疹病毒流行株属于同一性状毒株,均为 H1基因型;与中国疫苗株沪191株相比较,两者在基因特性上存在明显差异。
- 冯燕严菊英卢亦愚史雯茅海燕周敏余蓓蓓
- 关键词：麻疹病毒基因型别核苷酸序列
- 福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究
- 2009年
- 以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“疫苗增强性疾病”（vaccine enhanced disease，VED）。目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上。本研究通过制备FI—RSV疫苗，建立BALB／c小鼠FI—RSV相关VED模型，定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征，为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料。
- 余蓓蓓彭慧琴顾晓萌刘怡严杰钱景
- 关键词：疾病模型福尔马林灭活BALB/C小鼠呼吸道合胞病毒病原微生物感染
- 含内质控多重荧光RT-PCR同时检测麻疹病毒和风疹病毒的研究被引量：7
- 2010年
- 由于从临床症状上难以区分麻疹病毒或风疹病毒引起的人群急性发热出疹性传染病,故而分别设计针对麻疹病毒和风疹病毒的特异性引物和荧光标记探针,建立含内质控的多重荧光RT-PCR以同时检测麻疹病毒和风疹病毒的核酸。结果表明:建立的多重荧光RT-PCR方法特异性好,试验验证没有出现假阳性和假阴性现象;该方法的灵敏度高,对麻疹病毒和风疹病毒的最低检出限分别达到0.1TCID50/mL和1TCID50/mL,可从疑似患者咽拭子等标本中直接检测到病毒核酸;同时该方法具有良好的稳定性,当分别用0.1～103TCID50/mL麻疹和风疹病毒的样本进行重复试验时,其CT值变异系数均在0.9%以下。此外,以人核糖核酸酶P(RNaseP)作为内质控,可以有效监控临床标本的采样质量及因操作失误等所致的假阴性结果出现。本方法尤其适用于疑似麻疹或风疹暴发疫情的临床快速诊断。
- 余蓓蓓冯燕徐昌平卢亦愚钱景
- 关键词：麻疹病毒风疹病毒RNASEP
- 双重荧光定量PCR检测西尼罗病毒和基孔肯雅病毒被引量：9
- 2013年
- 目的建立同时检测西尼罗病毒(WNV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)的双重荧光定量PCR法,为临床疑似病例的诊断提供依据。方法分别针对WNV CAP基因、CHIKV E1基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立并优化双重荧光定量PCR反应体系,评价方法的特异性和灵敏度。结果建立的双重荧光定量PCR可同时检测WNV、CHIKV核酸,标准曲线相关系数(r)分别达0.999、0.998,灵敏度达10 copies/μL,具有良好的特异性。结论建立了同时检测WNV、CHIKV的双重荧光定量PCR法,但尚需临床进一步验证。
- 余蓓蓓卢亦愚谢鑫友徐昌平张钧
- 关键词：西尼罗病毒基孔肯雅病毒荧光定量PCR
- 沙门氏菌核酸恒温扩增快速检测技术的建立
- 目的建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增技术快速检测沙门氏菌。方法根据Genbank上公布的沙门氏菌invA基因序列,选择保守区域设计恒温扩增引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的特异性和灵敏度...
- 陈宁杰余蓓蓓杨婷张钧
