石河子大学动物科技学院基础兽医学教研室
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 布鲁杆菌BP26重组卡介苗的构建及对小鼠CD4＋和CD8＋T细胞的影响被引量：3
- 2012年
- 目的构建预防布鲁杆菌病的新型疫苗——布鲁杆菌BP26重组卡介苗（rBCG—BP26），观察rBCG—BP26对免疫小鼠CD4＋．CD8＋T细胞的影响。方法利用常规分子生物学技术构建重组穿梭分泌载体pMV261-Ag85B—BP26，电转入卡介苗（BCG）后经过卡那霉素抗性筛选，对获得的基因重组株进行PCR鉴定。采用Western免疫印迹法检测菌体和液体培养基中BP26蛋白表达情况。选用45只BALB／c小鼠进行安全性实验分析，将其分成3组：目标实验（rBCG—BP26）组、阳性对照（BCG）组、阴性对照（PBS）组，每组15只。分别在小鼠皮内接种100μl rBCG—BP26[含106克隆形成单位（CFU）]、BCG、PBS。观察各组小鼠体征，在小鼠免疫后的第10、20、30、40天称量体质量，并于尾部采血，用流式细胞仪分析CD4＋,CD8＋T细胞含量。结果成功构建rBCG—BP26重组疫苗株。在菌体和液体培养基中均能检测到BP26蛋白的表达。安全性实验分析表明，3组小鼠在免疫后第10、20、30、40天体质量比较，差异无统计学意义[rBCG—BP26组分别为（19．16±0．55）、（20．89±O．20）、（22．15±0．76）、（24．60±0．64）g；BCG组分别为（19．90±0．02）、（21．53±1．57）、（21．95±0．55）、（24．70±0．39）g；PBS组分别为（19．24±0．54）、（21．37±0．66）、（22．83±0．62）、（25．06±0．37）g；F值分别为2．468、0．331、1．520、0．739，P均〉0．05]。在免疫后第10、20天时，rBCG—BP26组小鼠全血CD4^＋T细胞含量（13．40％、26．70％）低于BCG组（26．70％、33．07％）和PBS组（33．85％、29.33％），rBCG—BP26组CD4＋／CD8＋T细胞含量比值随时间延长而逐渐增长（0．69％、1．27％、1．57％、1．70％）。结论rBCG-BP26能高效表达布鲁杆菌BP26蛋白，并具有毒力弱、能激活机体CD4＋、CD8＋T细胞的特点，可作为预防布鲁杆菌病的疫苗候选株之一。
- 诸婷婷张璘陈创夫王远志柳建新王慧
- 关键词：布鲁杆菌疫苗卡介苗
- 新疆维吾尔自治区蜱中布鲁菌的分子流行病学分析被引量：3
- 2019年
- 目的掌握新疆维吾尔自治区(简称新疆)蜱中布鲁菌分子流行病学特征,为制定有效的防控措施提供科学依据.方法2016-2018年,在新疆边境10个县(市)采集家畜体表寄生蜱(包括孕雌蜱),在阿拉山口市采用布旗法采集游离蜱.将孕雌蜱分别放入透气昆虫管中进行产卵,每管卵堆平均分成两部分:一部分为蜱卵;另一部分继续发育,直至为幼蜱为止.对所有蜱类进行分子生物学(16S rRNA)鉴定,确定其蜱种.提取蜱DNA,基于布鲁菌外膜蛋白omp22和IS711两个基因进行PCR检测,将扩增产物测序并进行BLAST比对分析.结果在新疆的11个县(市)共采集1084只蜱,其中寄生蜱747只(包括孕雌蜱34只),游离蜱337只.经16S rRNA基因鉴定,确定为4属5种,草原革蜱、边缘革蜱、刻点血蜱、亚洲璃眼蜱、图兰扇头蜱所占比例分别为29.43%(319/1084)、16.51%(179/1084)、10.42%(113/1084)、37.27%(404/1084)、6.37%(69/1084).共检出214份布鲁菌阳性核酸样本,阳性率为19.74%.寄生蜱阳性率为25.30%(189/747),游离蜱阳性率为7.42%(25/337),寄生蜱阳性率明显高于游离蜱(χ2=46.873,P<0.05).在34份"孕雌蜱-蜱卵"发育阶段检出2份羊种布鲁菌核酸,在22份"蜱卵-幼蜱"发育阶段检出1份羊种布鲁菌核酸.结论布鲁菌在新疆边境地区寄生蜱和游离蜱中广泛分布,寄生蜱阳性率较高.羊种布鲁菌在蜱中存在潜在的经卵和经期传播现象,在家畜布鲁菌病的防控过程中,应加强体表寄生蜱和环境中游离蜱的灭蜱工作.
- 姜蒙蒙杨梅花宋瑞霞王远志盛金良
