温州医科大学肝病研究所
- 作品数：21 被引量：57H指数：3
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- 肝纤维化的研究进展
- ＜正＞～～
- 陈永平
- 文献传递
- 鼠李唐乳杆菌对酒精性肝损伤的免疫调节作用被引量：1
- 2015年
- 目的研究鼠李唐乳杆菌（LGG）对酒精性肝损伤Treg／Th17免疫调节作用及TLR通路的表达变化，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。方法10周龄雄性C57／BL6小鼠根据随机数字表均分为对照组、乙醇组和LGG＋乙醇组，每组6只。乙醇组小鼠用含有5％乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养10d，第11天清晨按小鼠体质量5g／kg予40％乙醇灌胃9h后处死；对照组小鼠用不含乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后予5％麦芽糖灌胃9h后处死；LGG＋乙醇组小鼠用LGG菌液（LGG〉1mL／d）加含5％乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后，予40％乙醇灌胃9h后处死。收集各组小鼠肝组织行HE和油红O染色，观察组织病理改变。检测各组小鼠血清ALT、AST含量。RT—PCR检测各组小鼠肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1 mRNA表达。Western免疫印迹法检测各组小鼠肝脏TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、IL-1受体相关激酶（IRAK-1）、核因子-κB和TNF-α蛋白表达。流式细胞仪分析LGG对小鼠脾脏Treg／Th17平衡的影响。各组间的统计分析用单因素方差分析和多重比较分析。结果HE染色和油红0染色示，经LGG干预后小鼠肝脏内脂滴数量和大小明显改善。乙醇组ALT为（147．0±42．1）U／L，AST为（373．5±169．7）U／L，对照组分别为（56．8±15．3）U／L和（211．5±57．8）U／L，LGG＋乙醇组分别为（75．3±150．2）U／L和（211．7±36．3）U／L，各组间相比差异均有统计学意义（F值分别为19．474和4．702，P值分别为0．000和0．026）。乙醇组肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1mRNA表达明显低于对照组，LGG＋乙醇组紧密连接蛋白表达增加（F值分别为149．219、145．561和154．237，均P=0．000）。乙醇组小鼠肝脏内大肠埃希菌蛋白表达高于对照组，LGG＋乙醇组其表达减少（F=130．317，P=0．000）。乙醇组小鼠肝脏内TLR4、MyD88
- 杜珊洁陈瑞聪黄思思吴和董佳佳王晓东许烂漫陈永平
- 关键词：鼠李糖乳杆菌酒精性TOLL样受体调节性TH17细胞
- 细胞因子信号转导抑制蛋白1过表达的树突状细胞对急性肝功能衰竭小鼠的治疗作用及机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的研究细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）过表达对DC功能的影响及对急性肝衰竭小鼠的治疗作用。方法利用SOCsl过表达的慢病毒或阴性对照病毒以感染复数（MOI）-50转染C57BL／6小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC），96h后转染成功的DC分别标识为SOCS1过表达的DC（DC-SOCS1）和阴性对照慢病毒转染的DC（DC-VNG）。脂多糖（1rag／L）刺激成熟后收集DC做表面分子流式检测，混和淋巴实验、蛋白质印迹法检测JAK／STAT通路蛋白表达变化。90只6～7周龄健康雄性C57BL／6小鼠分成正常组12只，急性肝功能衰竭组26只，急性肝功能衰竭DC—SOCS1治疗组26只，急性肝功能衰竭DC-VNG治疗组26只，分别通过尾静脉注射0．9％氯化钠溶液、重悬于0．9％氯化钠溶液中的DC-VNG和DC-SOCS1，12h后利用腹腔注射脂多糖（10#g／kg）联合D-GaIN（600mg／kg）诱导小鼠急性肝功能衰竭模型建立。观察各组小鼠死亡率和各组肝脏病理表现，检测各组小鼠外周血ALT和AST水平，检测脾脏Treg比例。样本均数比较采用单因案方差分析，分类资料比较使用卡方检验。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐性采用LSD检验。结果混合淋巴实验结果显示，混合培养比为100：1的DC—SOCS1组刺激T淋巴细胞的增殖率为（25．87±0．38）％，低于lO：1的mDC组[（84．29±3．25）％]，差异有统计学意义（y。一49．821，P〈0．01）；IL-10细胞因子浓度高于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F一20．112，P〈0．05）；IL-6细胞因子浓度明显低于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F=47．718，P〈0．05）。与imDC比较，脂多糖刺激成熟后的mDC、DC—VNG、DC-SOCS1组的JAK2表达量（f值分别为0．525、0．523和0．489，均P〈0．01）、STAT1表达量（t值分别为0．442、0．400和0．402，均P〈o．01）、SOCS1表达量（￡值分别为0．322、0．363和1．090，均P〈0．01）
- 张盛果李姗姗唐新月杨敏卢明芹
- 关键词：肝功能衰竭树突细胞
- 骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭大鼠肝脏信号转导子和转录活化子3表达的影响被引量：1
- 2014年
- 急性肝功能衰竭（acute liver failure，ALF）是因肝细胞大量坏死而出现的严重肝功能障碍，可短期内进展至肝性脑病，具有病程进展快、病死率高、预后差的特点，其治疗仍是世界性难题。原位肝移植是最有效的治疗方法，但由于存在供体器官短缺和移植免疫排斥等问题，其临床应用明显受限。
- 侯一珺王丽萍许烂漫王晓东林镯陈永平
- 关键词：骨髓间充质干细胞移植急性肝功能衰竭信号转导子大鼠肝脏LIVER肝功能障碍
- 鼠李唐乳杆菌对酒精性肝损伤的免疫调节作用
- 目的 研究鼠李唐乳杆菌(LGG)对酒精性肝损伤Treg/Th17免疫调节作用及TLR通路的表达变化,为酒精性肝损伤早期治疗提供依据.方法 10周左右的雄性C57/BL6小鼠(上海动物实验中心)于温州医科大学标准动物房内喂...
- 杜珊洁陈瑞聪黄思思吴和董佳佳王晓东许烂漫陈永平
- 姜黄素衍生物C66对转化生长因子-β刺激的大鼠肝星状细胞增殖和活化的研究被引量：1
- 2017年
- 目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖及α-平滑肌动蛋白（R-SMA）、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体（CB）1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组（1、2、5、10和20／,tool／L），细胞计数试剂盒一8检测其吸光度（A）值。选取最佳C66作用浓度及时间，分为对照组、TGF-β干预组、TGF＋β＋CB1拮抗剂组、TGF-β＋C66干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂＋C66联合干预组，分别培养48h，以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α—SMA、I型胶原蛋白及mRNA的表达，以蛋白质印迹法检测磷酸化c—jun氨基末端激酶（p-JNK）、C—jun氨基末端激酶（JNK）表达水平。多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较，方差不齐者采用DunnettT3检验，组间比较采用单因素方差分析。结果C66能有效抑制HSCT6增殖，呈现浓度和时间依赖性，其中10μmol／LC66作用48h对HSC—T6的抑制效果最明显，抑制率为54％。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义（￡值分别为6．188、3．48和20．64，均P〈0．05）。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、I型胶原、Ⅰ-SMAmRNA相对表达显著升高，差异均有统计学意义（￡值分别为4．705、9．492和38．27，均P〈0．05）。与对照相组比，TGF—B1干预组p-JNK水平显著升高，差异有统计学意义（t=9．567，P〈0．05）。结论C66能有效抑制HSC—T6细胞的增殖及胶原合成，且联合使用CB1拮抗剂效果更明显，该过程可能涉及JNK磷酸化水平的调节，有助于理解肝纤维化发生、发展的机制及为治疗肝纤维化寻找新的靶点。
- 陈泽陈达之萧云蕾肖茜茜王永林许烂漫陈永平
- 关键词：姜黄素衍生物肝星状细胞肝纤维化
- 复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎伴脾功能亢进患者的临床疗效被引量：14
- 2016年
- CHB是全世界严重的公共卫生问题，每年约有65万人死于CHB引起的并发症。脾功能亢进是肝炎后肝硬化严重且常见的并发症，主要表现为脾脏肿大，一种或数种血细胞成分减少，骨髓呈造血细胞增生象。药理研究证实，中药主要通过保护肝细胞、抑制纤维增生、缩小脾脏、改善脾脏循环等作用达到治疗脾功能亢进的效果。
- 董佳佳陈永平王晓东许烂漫萧云蕾吴和黄思思杜珊洁陈瑞聪
- 关键词：脾功能亢进复方鳖甲软肝片慢性乙型肝炎临床疗效恩替卡韦公共卫生问题
- 骨髓间充质干细胞在不同培养体系中对肝星状细胞的影响及其潜在机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞（BMMSC）在不同共培养体系与肝星状细胞（HSC）共培养后细胞因子及TLR4通路表达的变化。方法将分离提纯的HSC分别经0、50、100、150 g/L脂多糖处理48 h，细胞增殖（CCK）-8检测HSC增殖率以确定最佳浓度。在该脂多糖浓度下，2×105/mL HSC分为单纯培养组、1∶1与BMMSC直接共培养组和Transwell共培养组，检测各组上清液IL-6、TNF-α。再将细胞分为无脂多糖下BMMSC组、HSC组、脂多糖＋BMMSC组、脂多糖＋HSC组、Transwell HSC组、Transwell所有细胞组、直接共培养所有细胞组，用实时荧光定量PCR检测各组α-肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原mRNA表达水平，用蛋白质印迹法检测TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、核因子-κB蛋白表达。各样本均数比较采用单因素方差分析。结果与无脂多糖相比，HSC在50、100、150 g/L脂多糖浓度下增殖率分别为（129.77±11.26）%、（162.90±13.15）%、（55.12±11.6）%，差异均有统计学意义（t值分别为5.91、10.70和8.65，均P〈0.05）。单纯HSC组IL-6和TNF-α浓度分别为（252.02±30.94） ng/L、（148.00±10.27） ng/L，直接共培养组分别为（88.52±6.61） ng/L、（72.63±5.54） ng/L，Transwell共培养组分别为（103.76±7.14） ng/L、（81.79±6.92）ng/L，直接共培养组和Transwell组与单纯HSC组比较差异有统计学意义（t值分别为12.66、15.82和11.81、12.34，均P〈0.05）。直接共培养组与间接共培养组相比差异有统计学意义（t值分别为3.83、2.53，均P〈0.05）。与无脂多糖组相比，HSC在脂多糖中的α-SMA和Ⅰ型胶原表达均有明显增加，差异均有统计学意义（t值分别为14.16、11.84，均P〈0.05）。经与BMMSC Transwell共培养后，Transwell HSC组的α-SMA和Ⅰ型胶原表达均有显著降低，差异均有统计学意义（t值分别为11.98、4.47，均P〈0.05）。Transwell所有细胞组与直接共培养组相比，α-SMA和Ⅰ型胶
- 萧云蕾陈泽黄登肖茜茜王永林许烂漫陈永平
- 关键词：间质干细胞肝星状细胞肝硬化TOLL样受体共培养体系
- 不同分期慢性乙型肝炎肝纤维化患者黑色素瘤缺乏因子2的表达被引量：3
- 2019年
- 目的探讨不同分期CHB肝纤维化患者黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)的表达水平及其临床意义。方法选择温州医科大学附属第一医院2017年12月至2018年3月的CHB患者48例,非酒精性脂肪性肝病(non alcohol fatty liver disease,NAFLD)患者12例。采用免疫组织化学法和实时PCR检测两组患者肝组织和血清中AIM2的表达水平,两组间比较采用t检验和χ^2检验,相关性分析采用Spearman等级相关分析。结果CHB患者肝组织中AIM2表达阳性33例,NAFLD患者AIM2表达阳性2例,差异有统计学意义(χ^2=8.68,P<0.05)。HBV DNA>1×10^5 IU/mL患者的AIM2表达强度高于HBV DNA<1×10^5 IU/mL患者,两组比较差异有统计学意义(χ^2=6.22,P<0.05)。CHB患者AIM2的表达强度与HBV DNA载量有关(r=0.34, P<0.05)。CHB患者肝组织AIM2的表达与炎症程度和纤维化分期呈正相关(r值分别为0.59和0.72,均P<0.05),外周血白细胞中AIM2的表达与纤维化分期和炎症程度也呈正相关(r值分别为0.87和0.39,均P<0.05)。结论AIM2表达水平与肝脏的炎症程度和纤维化程度相关。
- 吴春央陈永平李骥林文雅王晓东林镯张友才
- 关键词：乙型肝炎肝纤维化黑色素瘤非酒精性脂肪性肝病免疫组织化学法纤维化分期
- 姜黄素衍生物对肝纤维化小鼠核因子-κB表达的影响
- 2016年
- 目的观察姜黄素衍生物C66的抗小鼠肝纤维化效果及其相关机制。方法33只C57BL／6J小鼠分为正常对照组、模型对照组和C66治疗组。正常对照组小鼠9只，普通饲料和自来水喂饲，其余24只小鼠予腹腔注射40Z四氯化碳（CCl4）混合液，首剂量为4mL／kg，以后按照剂量2mL／kg腹腔注射，每周2次，共6周。于造模6周末随机选取6只小鼠，行病理学检测，判断造模是否成功。造模小鼠随机均分成模型对照组和C66治疗组，每组9只。第6周开始，给予治疗组C6610mg／（kg·d）灌胃，其余组给予等量的0．5％羧甲基纤维素钠溶液灌胃。检测各组小鼠血清ALT、AST和肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量；肝组织行HE染色及Masson染色，光学显微镜下观察病理学改变，并进行肝纤维化半定量评分；采用实时荧光定量PCR检测I型胶原、r平滑肌肌动蛋白（a-SMA）mRNA表达情况；Western印迹法检测各组I型胶原、α-SMA及核因子-xBp65p65、核因子-κB抑制蛋白α（IκBα）蛋白表达情况。样本均数比较采用单因素方差分析。结果模型对照组ALT、AST水平分别为（202．71±19．66）U／L和（233．42±23．97）U／L，C66治疗组分别为（102．00±11．04）U／L和（120．87±13．83）U／L，正常对照组分别为（36．66±6．37）U／L和（43．33±8．08）U／L，模型对照组与正常对照组比较差异均有统计学意义（T值分别为23．96和22．39，均P〈0．05），C66治疗组与模型对照组比较差异均有统计学意义（t值分别为11．56和10．52，均P〈0．05）。模型对照组肝组织Hyp含量与正常对照组比较差异有统计学意义（t=17．50，P〈0．05），C66治疗组肝组织Hyp含量与模型对照组比较差异有统计学意义（t=11．45，P〈0．05）。C66治疗组I型胶原和a-SMAmRNA表达明显下降，与模型对照组比较差异有统计学意义（t值分别为7．23和7．95，均P〈0．05）。与模型对�
- 吴和陈永平黄思思杜珊洁陈瑞聪董佳佳
- 关键词：肝硬化姜黄素衍生物核因子-ΚBC57BL/6J小鼠
