中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室
- 作品数：356 被引量：797H指数：12
- 相关作者：王敏屈建国陈国敏滕智平姜慧英更多>>
- 相关机构：北京工业大学生命科学与生物工程学院安徽理工大学医学院西安交通大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 贵州省巴马森林病毒和罗斯河病毒感染的调查研究被引量：7
- 2012年
- 目的了解贵州省虫媒病毒中巴马森林病毒(BFV)、罗斯河病毒(RRV)的感染现状,为不明原因病毒性脑炎防治工作提供科学依据。方法 2005-2008年在贵州省采集不明原因发热和病毒性脑炎病例检测BFV、RRV IgM抗体,并对2007年健康人群进行BFV、RRV IgG抗体检测。结果①共检测204例不明原因发热病例BFV和RRV IgM抗体,BFV IgM抗体阳性4例,阳性率1.96%,RRV阳性6例,阳性率2.94%;②共检测426例病毒性脑炎病例BFV和RRV IgM抗体,BFV IgM抗体阳性12例,阳性率2.82%,RRV阳性15例,阳性率3.52%;③共检测870份健康人群BFV、RRV IgG抗体,BFV IgG抗体阳性率1.49%,RRV IgG抗体阳性率1.15%;④地区分布显示,2005-2008年BFV、RRV IgM抗体阳性病例数和分布县数呈逐年增加趋势。结论贵州省可能存在由BFV和RRV感染引起的疾病,应加强对这两种病毒引起的相关疾病监测和研究工作。
- 叶绪芳付士红高晓艳赵苏晔刘淳婷王环宇吴升伟梁国栋
- 关键词：IGM抗体IGG抗体
- 人朊蛋白相关蛋白Shadoo的表达、纯化及抗体的制备
- 2007年
- 目的克隆、表达和纯化人朊蛋白相关Shadoo(SHO)蛋白并制备抗Shadoo的多克隆抗体。方法提取仓鼠各组织的mRNA,分析SHO基因在仓鼠各组织中转录水平的差异;提取人DNA,PCR方法获得人SHO基因,克隆至融合表达载体,在大肠埃希菌中表达人SHO蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清,用Western blot方法分别检测与重组及内源性SHO蛋白的免疫反应性。结果SHO基因在仓鼠各组织中的转录水平差异很大,脑组织转录水平高。在大肠埃希菌中表达了分子质量单位为37 ku的人SHO融合蛋白,制备的SHO蛋白抗体可与重组的SHO蛋白反应,可识别内源性的SHO。结论成功表达纯化人SHO融合蛋白并制备了抗SHO抗体,为研究SHO和正常朊蛋白之间的关系打下初步基础。
- 高永军高晨陈建明石琦郭燕张宝云董小平
- 关键词：朊蛋白蛋白纯化多克隆抗体
- CVB32A蛋白酶抑制帽样结构依赖的蛋白翻译
- 2013年
- 目的探讨CVB3的蛋白酶2A对真核细胞帽样蛋白翻译和内部核糖体进入位点（IRES）翻译机制的影响。方法构建表达载体pcDNA3．1—2A，将此表达载体分别与pEGFP—N1、pGL3（F-luc）以及pIRES-GFP载体共转染细胞后，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达，检测荧光素酶蛋白的表达。WesternBlot检测CVB3病毒和pcDNA3．1-2A对真核生物翻译起始因子4GI（eIF4GI）及多聚A尾结合蛋白（PABP）的影响。结果pcDNA3．1之A可以减少帽样依赖的GFP和荧光素酶蛋白的表达，但可以促进IRES依赖的GFP表达。CVB32A基因质粒转染和CVB3感染后，均可发现细胞内elF4G的切割现象；同时CVB3对PABP也有降解作用，而CVB32A基因转染对PABP无明显作用。结论CVB3的蛋白酶2A抑制真核细胞帽样途径蛋白翻译，促进IRES途径的翻译。
- 卢明枝宋娟孙鹏宋芹芹盛琳君王宝栋迟苗苗姚海兰李朝品韩俊
- 关键词：柯萨奇病毒感染蛋白激酶类核糖体
- 2020年中国克–雅病监测网络病例特征分析被引量：8
- 2022年
- 目的 了解2020年中国克–雅病(CJD)的发病情况、流行病学及临床特征。方法 对2020年我国CJD监测网络获得的可疑CJD病例的临床及流行病学资料进行分析,并收集患者的血液及脑脊液,提取全血基因组DNA并利用聚合酶链式反应及测序方法对朊蛋白基因(PRNP)129位及219位氨基酸多态性进行分析,Western Blot检测脑脊液中14-3-3蛋白。结果 2020年共监测病例458例,其中散发型CJD临床诊断病例179例(39.08%),疑似诊断病例12例(2.62%),遗传型CJD病例18例(3.93%),吉斯特曼–施特劳斯综合征(GSS)1例(0.22%)。病例报告无季节聚集性,长久居住地呈散在分布,职业分布无聚集性。临床诊断病例年龄中位数为63.14(43,87)岁,男女性别比为0.97∶1;疑似诊断病例年龄中位数为68.08(54,77)岁,男女性别比为1∶1。快速进行性痴呆为最常见的首发症状。脑脊液14-3-3蛋白、脑电图以及头颅磁共振成像3项检测结果中,出现阳性结果越多的病例典型症状也较多。对439份血液样品进行PRNP检测,其中129位氨基酸为M/M纯合子的434例,M/V杂合子的3例,V/V纯合子的2例;219位氨基酸为E/E纯合子的435例,E/K纯合子的4例。结论 2020年我国监测到的CJD病例的报告时间、长久居住地分布、职业、性别比例以及年龄分布均符合CJD的发病特点。
- 高利萍肖康周伟王园董小平石琦
- 关键词：朊蛋白基因
- rAd5和rAAV2／1载体疫苗诱导载体特异性和外源基因特异性免疫反应的研究被引量：1
- 2011年
- 目的 在小鼠体内比较携带相同外源基因的rAd5和rAAV2/1载体疫苗诱导的载体特异性和外源基因特异性免疫应答的差异.方法 分别用携带HIV-1 gag基因的rAd5和rAAV2/1疫苗免疫BALB/c小鼠,在免疫后不同时间点用Elispot方法和ELISA方法检测小鼠体内的rAd5或rAAV2/1载体特异性及HIV-1 gag特异性细胞免疫反应和抗体反应.结果 rAd5-gag能够诱导较强的gag特异性细胞免疫反应,显著高于针对Ad5载体的细胞免疫反应；而rAAV2/1 -gag诱导的gag特异性及AAV2/1载体特异性细胞免疫反应水平都较低.rAd5-gag诱导的P24特异性和Ad5特异性IgG抗体水平都较高,并且二者相当；与rAd5-gag相比rAAV2/1 -gag可诱导更高水平的P24 IgG抗体,而且rAAV2/1 -gag诱导的P24 igG高于AAV2/1载体特异性IgG水平.结论 rAd5载体可诱导强的外源基因特异性细胞免疫和抗体反应,针对载体的细胞免疫反应较弱而抗体反应较强；rAAV2/1载体可诱导强的外源基因特异性抗体反应,明显高于针对载体的抗体反应,外源基因特异性和载体特异性细胞免疫反应水平都很低.
- 杨柳李芸杨玲张凌斐冯霞余双庆陈丹瑛李泽琳曾毅
- 关键词：腺病毒科免疫抗体生成
- 人乳头瘤病毒2(HPV-2)变异株的突变E2蛋白转录抑制作用的研究
- 2008年
- 皮肤寻常疣的发生与多种基因型别HPV的感染密切相关。本研究利用PCR方法对1例临床罕见的寻常疣患者感染的HPV-2毒株LCR及E2基因序列进行扩增、测序,分别构建含HPV-2变异株及原毒株LCR的重组CAT基因报导质粒pBLCAT-LCR和表达突变及野生型E2蛋白的重组真核表达质粒pcDNA3.1-E2,通过瞬时转染HeLa细胞,研究变异株启动子活性及突变E2蛋白的转录抑制作用。结果显示,患者感染的HPV-2变异株LCR及E2基因均存在多处点突变。变异株早期启动子活性明显高于原毒株;突变的E2蛋白转录抑制作用较野生型E2蛋白显著降低;变异株LCR上E2结合位点核苷酸的突变明显降低E2蛋白对病毒早期启动子的抑制作用。提示HPV-2变异株启动子活性增强及突变E2蛋白转录抑制作用的降低与这一罕见巨大寻常疣临床表型之间存在着重要的联系。
- 雷艳君高晨姜慧英韩俊陈建明石琦周伟袁育康董小平
- 关键词：寻常疣E2LCR启动子活性
- EBV-LMP2蛋白的表达和初步纯化
- 2010年
- 目的 应用杆状病毒表达载体表达并纯化EB病毒LMP2蛋白.方法 利用杆状病毒Bac-to-Bae杆状病毒表达系统,将EBV-LMP2基因插入到质粒pFastBacTMHT B中,获得携带EBV-LMP2基因的重组杆状病毒Bac-LMP2.重组病毒感染Sf-9细胞,表达N端携带6个组氨酸（6 X His）的LMP2融合蛋白His-LMP2.经镍离子亲和层析纯化,获得纯化蛋白.结果 SDS-PAGE及Western-Blot检测表达的蛋白相对分子质量大小与预计结果一致.HPLC分析纯化后蛋白的纯度可达86%.结论 利用杆状病毒表达系统表达EB病毒LMP2基因并经过初步纯化后,可以获得较好纯度的LMP2蛋白.
- 王湛马晶周玲张晓光杜海军杨松梅曾毅
- 关键词：基因表达
- 细胞浆中PrP蛋白的表达及其细胞毒性作用的研究被引量：1
- 2008年
- 为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP的细胞毒性作用。结果显示,CytoPrP在胞浆内的存在受蛋白酶抑制剂的控制;与野生型PrP相比,CytoPrP具有相对较强的蛋白酶K(PK)抗性。MTT和细胞计数实验均显示,Cyto-PrP的存在可诱导明显的细胞毒性效应,而CytoPrP的细胞毒性作用受蛋白酶抑制剂含量的影响,呈剂量依赖关系。上述结果为研究CytoPrP在朊病毒病的发病机制中的意义提供了一定的科学数据。
- 王新董辰方石琦石崧王桂荣雷艳君安润徐琨姜慧英韩俊赵玉军董小平
- 关键词：朊病毒细胞毒作用
- 一种基于连续PMCA的PrP^Sc体外扩增方法的建立被引量：1
- 2008年
- 为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测。结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制。连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc。
- 石崧董辰方张宝云石琦王桂荣王新韩俊董小平
- 关键词：PRION病
- 感染羊瘙痒因子263K和139A仓鼠脑组织中tau、磷酸化tau、GSK3β和β-tubulin变化的研究
- 前言朊病毒病又称传播性海绵状脑病,是一类以脑内出现海绵状病理改变为特征的致死性神经退行性疾病,被认为是细胞内正常PrP蛋白转化为PrPSc所致,包括人类的克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJ...
- 王桂荣石崧高晨张宝云田婵董辰方周瑞敏李晓丽陈操韩俊董小平
- 文献传递
