太和医院生命科学研究所
- 作品数：87 被引量：324H指数：8
- 相关作者：丁妍张军更多>>
- 相关机构：武汉大学人民医院北京工业大学生命科学与生物工程学院湖北医药学院生物医药研究院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 腺病毒介导反义AT_1R转染对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2003年
- 目的 观察腺病毒介导反义AT1基因转染对培养的大鼠动脉平滑肌细胞 (VSMCs)增殖的影响。方法 用定向克隆和同源重组方法构建携带人反义AT1基因的复制 -缺陷型重组腺病毒 (Ad/CMV·ahAT1) ,转染体外培养的VSMCs,用RT PCR半定量法和免疫组化法检测AT1R的表达 ,用3 H TdR掺入实验和流式细胞仪检测VSMCs的DNA合成和增殖指数。结果 与对照组相比 ,转染Ad/CMV·ahAT1后 4 8h的VSMCs,AT1R的mRNA表达低 5 0 % ,蛋白表达也显著低于对照组 (P <0 0 1)。给予AngⅡ刺激的VSMCs的3 H TdR掺入量和增殖指数明显高于空白对照组 (分别为P <0 0 5和P <0 0 1) ;转染Ad/CMV·ahAT1组3 H TdR掺入量和增殖指数则显著降低 (与DMEM组比P <0 0 5 ,与AngⅡ对照组比P <0 0 1)。 结论 腺病毒介导的反义AT1R转染 ,通过抑制AT1R的表达 。
- 涂明利罗国仕涂远超雷怀定刘为舜任思群王家宁杨桂元
- 关键词：反义腺病毒血管平滑肌细胞
- 单克隆抗体CD_(133)在内皮祖细胞表达的实验研究被引量：5
- 2006年
- 目的研究CD133在内皮祖细胞(endothelialprogenitorcell,EPC)表面表达,为内皮祖细胞的鉴定提供依据。方法取兔髂骨骨髓,经密度梯度离心法分离并培养骨髓间充质干细胞(mensenchymalstemcell,MSC),在血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子等诱导条件下定向向内皮祖细胞分化,流式细胞仪检测不同时间内皮祖细胞CD133表达。结果定向诱导分化细胞形态学呈现“鹅卵石”样或“铺路石”样外观,流式细胞仪检测发现细胞表达CD133,并随时间推移表达逐渐下降。结论内皮祖细胞高表达CD133,与培养时间密切相关。
- 方志成周昌娥王玮刘志祥
- 关键词：CD133骨髓间充质干细胞内皮祖细胞
- 129例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析被引量：8
- 2013年
- 免疫分型是用已知的单克隆抗体鉴定细胞表面或细胞内的免疫标志，剖析细胞的来源及分化阶段，与流式细胞术联合应用使诊断白血病更精细、全面，对为临床合理治疗、判断预后提供科学依据。我们应用CD45／SSC设门的三色荧光流式细胞术对129例急性白血病患者进行较全面的免疫分型检测，对其结果和诊断标准进行分析。
- 刘志祥姚忠红李瑞明王晓勋
- 关键词：急性白血病患者流式细胞术免疫分型CD45免疫标志
- BHA诱导人脐带间充质干细胞分化为神经细胞被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨丁基羟基茴香醚(BHA)能否将人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)诱导分化为神经细胞。方法:正常培养的第4代hUC-MSCs利用200μmol.L-1BHA加2 mmol.L-1巯基乙醇(β-ME)进行诱导。每12 h观察细胞形态变化,并于诱导后24和72 h收集细胞,提取RNA,RT-PCR检测基因表达情况,于第3天进行免疫荧光染色。结果:诱导12 h后即有少量细胞发生形态变化,随着时间的推移变化越来越明显,72 h时绝大部分细胞都已变成神经细胞形态。免疫荧光染色nestin、GFAP及NSE阳性。RT-PCR检测诱导后24 h开始有nestin、MAP及NF-L表达,72 h后nestin和NF-L表达减少,MAP表达增强,同时NeuroD1也有较强表达,表明此时已分化为成熟的神经元细胞。结论:BHA能快速地将hUC-MSCs诱导分化为神经细胞。
- 王卫民丁妍
- 关键词：人脐带间充质干细胞神经元
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因转染骨髓间充质干细胞后基因表达情况及其对C6胶质瘤细胞作用的体外研究
- 2013年
- 目的 探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法 实验分三组，即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中，反转录PCR法检测BMSC的TRAIL mRNA水平，Western blot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达；将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养，通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应，Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响。结果 免疫荧光检测显示，转染TRAIL 24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达，24 h比48 h荧光强，空白对照组及空载体组细胞未见表达。反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAIL mRNA及蛋白高表达，空白对照组及空载体组未见表达。转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活，抑制率为（62.7±0.1）%，高于空载体组的（16.7±0.1）%（P＜0.05），同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡。结论 转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因，且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡，具有明显的旁观者效应。
- 汤祥军张力王晓勋黄宽明鲁军体曹刚张相华涂汉军
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体骨髓间充质干细胞凋亡
- 医学生物化学理论课教学改革与实践被引量：8
- 2009年
- 生物化学是医学院校重要的基础课,其信息广、概念多、难度大,是医学生学习较困难的一门课程。根据多年的教学经验,要搞好生物化学教学,必须从教学理念、教学内容、教学环节如教材选择、教师队伍建设、教学组织等进行改革,同时采用多种教学方法,如启发式教学、理论教学与临床教学相结合、理论教学与实践教学相结合、对比教学和课后辅导等。
- 唐微孙设宗朱明磊张红梅
- 关键词：生物化学教学质量教学改革
- 端粒酶活性在骨髓间充质干细胞体外分化过程中的表达观察被引量：7
- 2003年
- 为了探讨兔骨髓间充质干细胞体外增殖前后及诱导分化内皮细胞过程中端粒酶活性的表达及意义 ,我们联合应用密度梯度离心和贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞 ,继而诱导其向内皮细胞方向分化 ,用TRAPezeELISA法分别检测新鲜分离的骨髓细胞及骨髓间充质干细胞、原代培养的内皮样细胞及传代细胞端粒酶活性 ,结果发现新鲜分离的骨髓细胞及增殖前的骨髓间充质干细胞端粒酶活性低水平表达 ,一旦经过VEGF诱导分化 ,细胞端粒酶活性表达上调 ,在 5代内其端粒酶活性不因细胞传代而下降或消失 ,说明骨髓间充质干细胞体外有限扩增和诱导分化时保持端粒酶活性 ,维持组织干细胞特性 。
- 何朝荣刘先军严世荣张群林王晓勋
- 关键词：端粒酶活性骨髓间充质干细胞体外分化
- NS-398对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其作用机制
- 2011年
- 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS-398对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法用不同浓度NS-398作用MCF-7细胞后,采用四甲基唑蓝法(MTT)检测NS-398对MCF-7细胞增殖的抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期、细胞凋亡以及COX-2、Bcl-2和Bax蛋白的表达;用放射免疫分析(RIA)检测培养液上清中前列腺素E2(PGE2)含量。结果 NS-398可显著抑制MCF-7细胞的生长,并随药物的浓度升高、时间延长其抑制作用增强。NS-398使MCF-7 G0/G1期细胞显著增多(P<0.01),S期及G2/M期细胞显著减少(P<0.01),并引起显著的细胞凋亡。NS-398使MCF-7细胞COX-2和Bcl-2表达显著降低(P<0.01),而Bax表达显著增高(P<0.01),并使MCF-7细胞产生的PGE2显著降低(P<0.01)。结论 NS-398可抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖并可诱导其凋亡,其作用机制可能通过抑制COX-2活性,使PGE2产量降低,从而下调Bcl-2表达及激活Bax表达。
- 刘志祥姚忠红李瑞明王晓勋
- 关键词：MCF-7细胞株环氧合酶-2选择性抑制剂凋亡流式细胞术
- 冠脉内导入重组β-半乳糖苷酶腺病毒的实验研究被引量：1
- 2002年
- 目的 :研究经冠状动脉内导入重组 β-gal腺病毒后心肌的转染效率 ,证明冠脉内导入途径是否为重组基因导入心脏的有效的可行的途径。方法 :用定向克隆的方法构建重组 β -gal腺病毒载体 ,将 1 .53× 1 0 1 2 pfu重组 β-gal腺病毒经冠状动脉造影导管由左冠状动脉分别导入到 7只雄性Yorkshire猪心脏中 ,于术后 1周、2周、4周及 8周处死动物 ,取左右冠状动脉、3～ 5mm厚的不同部位的心肌及各实质脏器标本 ,经 1 .2 5 %戊二醛固定 2 0min ,用PBS洗涤 3次 ,在室温下用X -gal染液染色 1 6～ 2 4h ,脱水、石蜡包埋、切片及HE复染 ,光镜下计算出表达 β -gal的心肌细胞百分数即为转染效率。结果 :经冠状动脉内导入重组基因后 ,于术后 1周即有 β-gal表达 ,2周达高峰 ,心肌细胞的转染效率高达 45 .57% ,全层左冠状动脉壁、心肌间质中均有 β-gal表达 ,4周 β-gal表达下降 ,8周 β -gal恢复至对照组的基线水平。结论 :经冠状动脉内导入重组腺病毒 ,心肌细胞及冠脉壁重组基因表达效率高 。
- 王崇全黄从新张群林黄永章党书毅张军
- 关键词：腺病毒基因表达冠状动脉冠心病基因治疗
- 5-氮胞苷对培养兔骨髓基质细胞心房利钠肽表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的研究5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对体外培养兔骨髓基质细胞中心肌特异性心房利钠肽(atrialnatriureticpolypeptide,ANP)表达的影响,探讨骨髓基质细胞向心肌样细胞分化的条件。方法体外分离培养兔骨髓基质细胞用不同浓度5-aza诱导培养,以RT-PCR方法测定诱导前后ANP的表达。结果正常培养兔骨髓基质细胞不表达ANP。经5-aza诱导并继续培养24h后,骨髓基质细胞表达ANP,在一定时间、浓度范围内ANP含量逐渐增加。结论5-aza诱导体外培养兔骨髓基质细胞表达心肌特异性ANP,与诱导时间及浓度呈正相关,提示可诱导兔骨髓基质细胞向心肌样细胞分化。
- 方志成周昌娥王玮王晓勋王卫民刘志祥李瑞明
- 关键词：骨髓基质细胞心房利钠肽5-氮胞苷RT-PCR方法体外分离培养细胞分化
