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中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所中国医药生物技术研究所
作品数:
1
被引量:4
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相关领域:
医药卫生
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张月琴
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2003
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以大肠埃希氏菌肽脱甲酰基酶为靶点的高通量筛选模型的建立(英文)
被引量:4
2003年
本文用 PCR法从大肠埃希氏菌 K-12中克隆出肽脱甲酰基酶 (peptide deformylase,PDF)基因 ,通过测序确证与文献报道的 pdf基因序列完全一致。将 p df连接到原核蛋白表达载体 p ET-3 0 -a(+ )上 ,并转化到大肠埃希氏菌 BL 2 1(DE3 )菌株中 ,IPTG诱导表达。过量表达的 PDF酶用 Q Sepharose HP离子交换柱和 Superdex 75纯化得到高纯度 Ni-PDF。应用荧光测试仪Polar Fluostar检测 PDF对底物 For-Met-Ala-Ser的水解活性 ,PDF酶的已知抑制剂放线酰胺素 (actinonin)为阳性对照 ,通过优化酶反应条件 ,建立了以
唐先兵
司书毅
张月琴
关键词:
肽脱甲酰基酶
高通量筛选模型
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