大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
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- miR-155靶向JAK/STAT3通路促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应被引量：2
- 2022年
- 目的探讨miR-155在THP-1巨噬细胞炎性反应中的作用及调控机制。方法使用脂多糖(LPS)处理THP-1来源的巨噬细胞构建体外巨噬细胞炎性模型,分为control组、LPS组、miR-155 mimics+LPS组和mimics NC+LPS组;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测上述各组中miR-155、炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)mRNA、STAT3 mRNA表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清中炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)含量,免疫印迹(Western blot)法检测细胞中STAT3蛋白及STAT3磷酸化(p-STAT3)蛋白水平。结果LPS诱导THP-1巨噬细胞中miR-155表达增加,同时炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达增加;转染miR-155 mimics组进一步促进LPS诱导的巨噬细胞中上述炎性细胞因子的表达;Western blot法分析显示miR-155 mimics+LPS组中p-STAT3蛋白表达水平较LPS组进一步增加。结论miR-155可上调THP-1巨噬细胞炎症中TNF-α、IL-1β的表达,其调控机制是增加转录因子STAT3的磷酸化活化,进而靶向JAK/STAT3信号通路促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应。
- 谭仕廉李艳丽何永勋郭乐申元英
- 关键词：MIR-155
- MicroRNAs在黏膜屏障及炎症反应中的作用
- 2021年
- 黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到重要的作用。本文综述了相关miRNAs与黏膜炎症的研究,进一步理解miRNAs参与黏膜生理和炎症过程中的作用,找到具有防治黏膜炎症的新作用靶点。
- 谭仕廉郭乐申元英
- 关键词：MICRORNAS黏膜炎症
- Nrf2/HO-1通路在氧化应激和炎性反应中的作用被引量：1
- 2023年
- 氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白三烯、血栓素A 2等促炎介质,从而引起细胞凋亡和炎性反应。近年来研究表明,核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路可以通过抗炎、抗氧化等作用抵抗氧化应激损伤。因此,有效调控Nrf2/HO-1通路可成为治疗氧化应激性疾病和炎性疾病的重要靶点。
- 于馨雅申元英郭乐
- 关键词：氧化应激炎性反应
- 结核分枝杆菌与树突状细胞相互作用的研究进展被引量：2
- 2021年
- 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的结核病是严重威胁人类健康的慢性传染病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是重要的抗原提呈细胞及连接机体固有免疫和适应性免疫应答的桥梁细胞。DC通过表面表达受体识别并吞噬病原体,参与抗原提呈,并发育成熟,同时分泌不同类型的细胞因子,决定T细胞分化方向,最终影响细胞免疫应答效应。在MTB感染过程中各成分与DC相互作用的特性研究,是分析MTB毒力基因及致病机理的基础,并可为结核疫苗研究提供候选优势抗原。现对目前MTB与DC的相互作用机制的研究进展作一概述。
- 杨雨婷(综述)杨国平李光华孟余(审校)
- 关键词：结核分枝杆菌树突状细胞细胞因子受体
- miR-146a在黏膜免疫中的调控作用被引量：3
- 2022年
- 黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-146a作为协调免疫反应和炎症信号最重要的miRNAs之一,在包括免疫反应在内的多种生物过程和途径中发挥关键作用。本文综述了miR-146a与黏膜免疫的相关研究进展。
- 李艳丽申元英郭乐
- 关键词：MICRORNASMIR-146A黏膜免疫炎症
- OBE教学理念在临床免疫学检验技术教学中的应用
- 2022年
- 临床免疫学检验技术对相关免疫疾病的发病机制等方面提供理论支持,这对临床对免疫疾病的防治有着积极性作用。但,由于临床免疫学检验技术教学内容过于复杂、抽象,语言较为深奥,进而导致学生无法对相关内容完全理解与掌握,而临床免疫学检验技术知识前后交织,若基础知识掌握不全面对整体教学效果有着不利影响,学生知识结构掌握不牢固对其日后参加检验工作也有所不利,而OBE(outome-based education)以结果为基础的教学手段,是一种新型的教学理念,对学生的综合能力与学习成果均有着积极性提升作用,可进一步优化教学模式。
- 潘云华
- 关键词：教学效果教学满意度
- LncRNA在固有免疫应答中的调控作用
- 2021年
- 固有免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线,主要通过固有免疫细胞表面的模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)识别病原体/损伤/危险相关分子模式(pathogen/damage/danger associated molecular patterns,PAMPs/DAMPs),引起一系列的免疫反应,参与机体抗感染、抗肿瘤等。长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)作为非编码RNA领域中的成员之一,与固有免疫应答密切相关。现就LncRNA在固有免疫应答调控中的作用进行综述。
- 宁晓县申元英郭乐
- 关键词：固有免疫免疫调控
- 结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达
- 2023年
- 目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。结论 成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。
- 陈瑞枫王瑄马枫茜李祥芳丁寿鹏吴利先
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达生物信息学表位
- 结核分枝杆菌PE22/PPE36融合蛋白对耻垢分枝杆菌表型及巨噬细胞功能影响的研究
- 2023年
- 目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达获取融合蛋白PE22/PPE36,纯化后免疫6~8周龄小鼠制备多克隆抗体;电击法构建重组菌Ms_PE22/PPE36及Ms_vec,并用所制备的多克隆抗体验证重组融合蛋白在Ms中的表达。将重组菌接种于2×YT培养基中观察其菌落形态及生长曲线;点板法及菌落计数法检测重组菌在H_(2)O_(2)、SDS、溶菌酶、NaNO_(2)、低pH、饥饿等压力条件下的存活情况,以分析PE22/PPE36融合蛋白对Ms表型的影响;重组菌侵染巨噬细胞ANA-1及RAW 264.7后,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡率,ELISA法检测ANA-1细胞TNF-α及IL-6分泌量,Griess法检测ANA-1及RAW 264.7细胞NO分泌量并用通道抑制剂检测所涉及的通路,菌落计数法检测重组菌在ANA-1及RAW 264.7细胞内的存活情况。结果与Ms_vec组相比,Ms_PE22/PPE36的菌落形态、生物膜形成及在溶菌酶、NaNO_(2)、低pH等压力条件下的存活率差异无统计学意义(溶菌酶:t 3 h=0.082,t 6 h=0.174,t 9 h=0.355;NaNO_(2):t 3 h=0.950,t 6 h=1.274;低pH:t 3 h=1.869,t 6 h=1.119,t 9 h=0.091;均P>0.05);在H_(2)O_(2)、SDS压力条件下存活率明显降低(H_(2)O_(2):t 6 h=4.35,t 8 h=4.80;SDS:t 4 h=10.43,t 6 h=2.793;均P<0.05);而稳定期生长速率及在饥饿压力条件下的存活率明显增高(生长速率:t 30 h=5.39,t 36 h=2.55,t 42 h=3.48;饥饿:t=3.323;均P<0.05);与Ms_vec感染组相比,Ms_PE22/PPE36组ANA-1细胞的早期凋亡率及TNF-α分泌量明显增加(早期凋亡:F=4.765;TNF-α:t 24 h=26.642,t_(48)h=7.634;均P<0.05),IL-6分泌量明显减少(t 24 h=5.888,t_(48)h=3.001;均P<0.05),ANA-1及RAW264.7细胞NO分泌量明显增加(ANA-1:F_(12)h=163.267,F_(24)h=111.530,F 48 h=500.328;RAW 264.7:F_(12)h=133.202,F_(24)h=718.436,F 48 h=1434.9;均P<0.05),且可被通道抑制
- 杨雨婷李玉洁余海燕杨国平
- 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌巨噬细胞
- 临床微生物学及检验精品课程建设的实践与思考被引量：3
- 2017年
- 为做好临床微生物学及检验课程的建设工作,从师资队伍建设、教学研究、教学改革以及课程文化的建设等方面进行了实践和探讨,逐渐形成了一门特色鲜明、成效显著的精品课程。
- 吴利先白丽王国富张雷武有聪刘奇
- 关键词：精品课程课程建设
