国家教育部博士点基金(2002037006)
- 作品数：5 被引量：64H指数：4
- 相关作者：徐幸莲周光宏黄明赵莲林国庆更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 牛肉宰后嫩化机制的研究被引量：23
- 2004年
- 为了阐明牛肉的成熟机理,本试验模拟尸僵后牛肉的内在环境和成熟温度,将纯化后的钙激活酶 (μ-Calpain)、内源性钙激活酶 专一抑制剂(Calpastatin)、肌原纤维和钙激活酶 外源性抑制剂抑亮酶肽(Leupeptin)用于6个不同的处理组合,反应不同时间后,分别做变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western-blotting)。结果表明,Ca2+(100μM)对肌原纤维没有降解作用,而在含Ca2+(100μM)的反应体系中,μ-Calpain对肌间线蛋白(Desmin)和肌钙蛋白T(Troponin-T)都有明显的降解作用,且降解产物和宰后牛肉自然成熟条件下的降解产物类似;Calpastatin不能完全抑制μ-Calpain的活性;离体反应和自然成熟的牛肉中的肌动蛋白都没有发生变化。以上结论表明Ca2+很可能是通过激活μ-Calpain而间接发挥对肌原纤维的降解作用,而溶酶体组织蛋白酶在牛肉成熟的早期对嫩度的改善贡献不大。
- 黄明周光宏徐幸莲王俊
- 关键词：牛肉嫩化钙离子
- m-钙激活酶的分离纯化方法研究被引量：3
- 2006年
- 本试验对牛脾脏中的m-钙激活酶进行了分离纯化,以便进一步研究其动力学特性和在牛肉成熟中的作用。对宰后30min牛肉匀浆后利用超高速冷冻离心、离子交换层析、疏水层析等技术,从中分离纯化出了m-钙激活酶,测得其比活力为39.7U/mg。利用变性电泳对纯化后的样品进行了验证。
- 黄明徐幸莲马汉军赵莲周光宏
- 关键词：纯化
- 钙离子和钙激活酶外源抑制剂对牛肉钙激活酶活性和超微结构的影响被引量：19
- 2004年
- 3头改良黄牛 (鲁西黄牛×犁木赞 )在屠宰厂按照标准的屠宰工艺屠宰并预冷 2 0h后取样 ,样品分 7组 ,按样品重 10 %分别注射蒸馏水 (对照 )、 2 0 0mmol·L-1CaCl2 、 2 0 0mmol·L-1EGTA、 2 0 0mmol·L-1ZnCl2 、 0 2mg·mL-1亮抑蛋白酶肽、 0 2mg·mL-1亮抑蛋白酶肽 +0 0 1mg·mL-1TritonX 10 0、 0 0 1mg·mL-1TritonX 10 0 7个不同处理 ,将样品分别成熟 3、8和 16d后测 μ 钙激活酶 (μ calpain)和m 钙激活酶 (m calpain)的活性并观察肌纤维超微结构。实验结果发现 ,与注射CaCl2 的牛肉相比 ,注射外源性钙激活酶抑制剂 (亮抑蛋白酶肽、ZnCl2 )牛肉的 μ 钙激活酶保持活性时间延长 ,超微结构变化受到抑制。提示 ,钙激活酶特别是 μ 钙激活酶很可能参与了牛肉嫩化过程并发挥着关键作用。
- 黄明赵莲徐幸莲周光宏
- 关键词：牛肉钙激活酶超微结构
- 不同日粮水平和成熟时间对牛肉质量的影响被引量：25
- 2003年
- 3组未去势公牛分别采用不同日粮水平饲养并按照标准的屠宰工艺屠宰 ,对具有代表性的牛肉切块 (背最长肌、腰大肌、半膜肌、臀中肌、臂三头肌、半腱肌 )的质量指标如滴水损失、pH值、颜色、蒸煮损失、剪切力等进行了测定。结果表明 ,低日粮水平下牛肉 pH值偏高 (P <0 0 5 ) ,除腰大肌、臀中肌、臂三头肌的剪切力差异显著 (P <0 0 5 )外 ,对其余各项指标的影响不显著。成熟时间除了对牛肉的pH值无影响外 ,对其他各项指标均有显著影响 (P <0 0 5 ) ,随着成熟时间的延长 ,牛肉的滴水损失、蒸煮损失呈增加的趋势 ,而剪切力、颜色得分呈降低趋势。
- 黄明周光宏徐幸莲林国庆
- 关键词：牛肉质量日粮水平肉牛
- 牛脾脏中μ-钙激活酶的分离纯化方法研究被引量：4
- 2006年
- 本试验旨在通过采用多种生物学分离手段和多个分离步骤从牛脾脏中分离纯化μ-钙激活酶。对宰后30min黄牛脾脏通过匀浆后利用超高速冷冻离心、离子交换层析、疏水层析、分子筛等技术,从中分离纯化出了μ-钙激活酶,最后得到的μ-钙激活酶的比活力为38.4U/mg。并对分离纯化过程中各主要步骤μ-钙激活酶的总活性、比活力等参数变化进行了测定,同时采用不连续十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和活性电泳(caseinzymography)对纯化过程中的样品进行了鉴定。
- 黄明藏大存徐幸莲赵莲周光宏
- 关键词：纯化柱层析活性电泳
