国家自然科学基金(30572323)
- 作品数：12 被引量：62H指数：5
- 相关作者：张仕状李耀辉康建功程鑫王滨更多>>
- 相关机构：潍坊医学院潍坊医学院附属医院黄山学院更多>>
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- 荧光光度法测定血清中碱性磷酸酶被引量：6
- 2009年
- 合成了一种新的底物水杨酸磷酸酯(SP),用于荧光光度法测定血清中碱性磷酸酶(ALP)活力。在37.0℃的Tris-HCl缓冲液(pH9.0)条件下,碱性磷酸酶作用于荧光底物SP,水解生成强荧光产物水杨酸(SA),生成的SA的量与参与反应的ALP的活力成正比。据此建立了荧光光度法测定血清中碱性磷酸酶活力的新方法。测定碱性磷酸酶的线性范围是0.03～6.00 U/L,检测限为7.04 mU/L。本方法适用于血清中碱性磷酸酶的测定。测定结果与临床上常用的以对硝基苯磷酸酯为底物的分光光度法相比,无显著性差异。
- 张娜边玮玮李耀辉
- 关键词：碱性磷酸酶荧光光度法
- 稀土离子络合物荧光探针测量胆红素及其荧光猝灭机理研究被引量：2
- 2010年
- 在NH4Ac-HAc缓冲溶液(pH6.90)中,强力霉素可以和铕离子(Eu3+)生成二元络合物,能量从强力霉素转移到Eu3+,发射出Eu3+位于612nm处的特征荧光。加入胆红素后,强力霉素将能量转移给胆红素。因此,Eu3+位于612nm处的特征荧光强度降低,且降低的荧光强度与加入胆红素的浓度成正比,据此建立了荧光光度法测量胆红素的方法。在最佳实验条件下,测量的线性范围为5.0×10-8～3.0×10-5mol/L;检出限为8.4×10-9mol/L。本方法操作简单,可以较好地避免共存物质的干扰,并成功用于人血清样品中胆红素含量的测定。
- 边玮玮张娜阎芳王守训李耀辉
- 关键词：强力霉素铕血清胆红素荧光
- MTT法指导分离壁虎抗肿瘤活性成分的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的 采用四氮唑盐（MTT）法指导壁虎抗肿瘤活性成分的分离,寻找壁虎抗肿瘤活性单体化合物,并初步观察其抗肿瘤作用.方法 常规培养人肝癌Bel-7402细胞、人肺癌Bel-95C细胞,在倒置显微镜下观察细胞形态及数量,采用MTT法检测多批次壁虎活性成分提取物对体外培养的肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算肿瘤抑制率.结果 经过11批次重复药筛实验,逐步分梯次指导分离纯化,得到壁虎抗肿瘤活性单体化合物＂守宫咪唑衍生物＂.该化合物可明显抑制人肝癌Bel-7402细胞的生长,用药后前3d的抑瘤率分别为71.24%,91.37%,94.45%,在显微镜下发现肿瘤细胞变圆、体积变小.结论 用MTT法结合倒置显微镜观察细胞状态,指导中药壁虎抗肿瘤活性成分的提取分离,得到抗肿瘤作用明显的壁虎单体化合物.
- 高丽娟程鑫赵荣荣张仕状
- 关键词：壁虎抗肿瘤活性成分肿瘤细胞株MTT法
- 鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分生物碱脂质体的研制及其质量评价被引量：17
- 2009年
- 目的:采用旋转薄膜分散-超声法制备鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体,并考察其包封率的影响因素。方法:以凝胶过滤法分离脂质体,于220 nm处测定吸收度,计算包封率,以包封率为测试指标,考察鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体的制备方法、药脂比、胆固醇含量、超声时间和超声强度对包封率的影响。结果:采用薄膜分散-超声法、药脂比为1∶10,磷脂-胆固醇比为2∶1,超声时间10 min的条件制备脂质体的包封率较高,可达62.5%,在低温4℃条件下放置4个月,包封率基本没有变化。结论:旋转薄膜分散-超声法制备鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体包封率较高,质量比较稳定,重现性好。
- 康建功张仕状李真真李耀辉
- 关键词：脂质体生物碱包封率
- 潍坊地区鲜无蹼壁虎地道药材鉴别法的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的:建立潍坊地区鲜无蹼壁虎地道药材的鉴别方法。方法:夏秋季捕捉潍坊地区成体鲜壁虎,随机抽恥100只,断食72h,水清洗晾干,95%乙醇中固定,电子天平称重,游标卡尺测长度。观察尾基部的肛疣数目特征、鼻间鳞和腹部环体一周的鳞片数目特征、指趾腹面的鳞片形状特征和指趾末端结构特征。利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PACE),观察无蹼壁虎及其伪品蜥蜴的电泳迁移率,根据其蛋白电泳区带的差异。绘制电泳图谱。结果:潍坊地区无蹼壁虎头部扁平较大、呈三角形、躯干背部疣鳞极少,两侧几乎无疣鳞,大形鼻间鳞1~2枚。腹部最宽处的一横列鳞22~28枚。足指间无蹼,每指的指腹和指尖足底侧有攀瓣,一足或多足足部有暗红色斑点,分布在足背上,95%乙醇浸泡足部暗红色斑点消失。经试验鉴别,无蹼壁虎与蜥蜴的电泳图谱有显著差异,各有其特有谱带。结论:潍坊地区壁虎均为无蹼壁虎。无蹼壁虎平均体质量为(3.7±0.46)g,体长为(11.08±1.18)cm。无蹼壁虎与蜥蜴的凝胶电泳区带具有显著区别,可作为有效鉴别依据之一。
- 高鸿康建功丁传华
- 无蹼壁虎抗肿瘤成分的提取及其对CT-26小鼠结肠腺癌的抑制作用被引量：20
- 2009年
- 目的:研究无蹼壁虎药物成分的抗肿瘤效果.方法:提取壁虎中有效药物成分,甲基噻唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞的生长,观察壁虎药用成分的抗肿瘤效果;BALB/c小鼠CT-26小鼠结肠癌造模分组,抗肿瘤活性成分组按0.25,0.10,0.05 mg/kg剂量,阳性对照组为内皮抑素6 mg/kg,阴性对照组为同体积生理盐水,每日一次性侧腋部皮下注射,自由摄食摄水,第15日称体质量,脱颈处死,解剖皮下肿瘤,称湿质量,计算肿瘤抑制率.结果:从壁虎提取得到的成分对肿瘤生长具有良好的抑制作用且与时间和剂量呈相关性;体外抑瘤实验,抑制率最高可达45.50%;小鼠体内抑瘤实验,肿瘤抑制率为67.24%.结论:壁虎含抗肿瘤有效药物成分,具有开发利用的潜力.
- 李耀辉刘冬梅盛继文阎芳张仕状
- 关键词：无蹼壁虎抗肿瘤作用
- 鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分提取分离的初步研究被引量：2
- 2015年
- 目的:研究鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分的提取分离。方法:不同浓度乙醇以不同方法进行提取,提取物经过反复冻融脱蛋白质脱脂肪分离后经高效液相法分离纯化,采用MTT比色法检测其抗肿瘤活性。结果:85%乙醇超声提取工艺Ⅲ组A值为0.548±0.045,抑瘤率最高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:药效学实验结果表明85%乙醇超声提取为最佳提取工艺。
- 李红霞康建功张仕状
- 关键词：抗肿瘤活性成分
- 胃癌螺旋CT征象与CD44v6及MMP-9表达的关系
- 2008年
- 目的探讨胃癌螺旋CT征象与CD44v6及MMP-9表达的关系。方法对60例进展期胃癌患者于手术前1周内行SCT平扫及三期动态增强扫描,术后应用免疫组织化学染色的方法测定肿瘤组织CD44v6和MMP-9蛋白的表达。结果①60例进展期胃癌组织中CD44v6和MMP-9的阳性表达率分别为60%(36/60)和58.3%(35/60)。②SCT图像显示的肿瘤强化幅度≥30HU、<30HU组的CD44v6阳性表达率分别为76.5%(26/34)和38.5%(10/26),MMP-9阳性表达率分别为64.7%(22/34)和50.0%(13/26))。③浆膜侵犯有、无组CD44v6阳性表达率分别为72.2%(26/36)和41.7%(10/24),MMP-9阳性表达率分别为75%(27/36)和33.3%(8/24)。④淋巴结转移阳、阴性组CD44v6阳性表达率分别为68.2%(30/44)和37.5%(6/16),MMP-9阳性表达率分别为68.2%(30/44)和31.3%(5/16)。结论CD44v6的表达与SCT显示的肿瘤强化幅度、浸润深度、淋巴结转移有关,MMP-9的表达与SCT显示的浸润深度以及淋巴结转移有关。
- 戴生程鑫王滨张月梅董鹏张仕状
- 关键词：胃肿瘤CD44V6MMP-9
- 鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分抑制CT-26肿瘤细胞生长实验研究被引量：26
- 2007年
- 目的:观察鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对恶性肿瘤的药效学作用。方法:甲基噻唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞株的生长活性;BALB/C小鼠CT-26瘤造模分组,抗肿瘤活性成分组和抗肿瘤活性成分脂质体组分别按不同剂量10,5,1mg.kg-1,阳性对照组为环磷酰胺(CTX)100mg.kg-1,阴性对照组为同体积生理盐水,每天1次性腹腔注射,自由摄食摄水,第14天停止供食,称体质量,脱颈处死,解剖皮下肿瘤,称湿重,计算肿瘤抑制率(%)和脏器指数。结果:鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分及其脂质体体内外呈时间和剂量依赖性抑制细胞增殖,但同等剂量的鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体的抑瘤作用更为明显。结论:鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体对CT-26肿瘤细胞有明显的抑制作用。
- 康建功张仕状李耀辉曲林涛
- 关键词：抗肿瘤活性成分脂质体抗肿瘤作用
- 山东潍坊鲜无蹼壁虎的高效液相色谱指纹图谱被引量：1
- 2008年
- 目的建立山东潍坊鲜无蹼壁虎的高效液相色谱指纹图谱。方法采用高效液相色谱法分析壁虎提取液中相关物质的保留时间和吸收强度,以确定适当的色谱条件,获得色谱数据。结果在选定的色谱条件下,给出了较好的保留时间分布和吸收强度,建立起鲜无蹼壁虎的HPLC指纹图谱。结论山东潍坊鲜无蹼壁虎HPLC指纹图谱可有效地鉴定鲜无蹼壁虎,从而更好地控制中药材的质量。
- 李耀辉张仕状盛纪文秦骁强邓树娥
- 关键词：指纹图谱高效液相色谱法
