国家自然科学基金(30330660)
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 相关作者：樊明文郭继华李宇红张锋许庆安更多>>
- 相关机构：武汉大学附属口腔医院深圳市妇幼保健院武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向防龋质粒的体内存留时间研究
- 目的:观察靶向防龋质粒pGJA-P／VAX免疫小鼠后在免疫局部及引流淋巴结的存留时间。方法:将Bupivacaine-pGJA-P／ VAX复合体和Bupivacaine-pVAX1复合体分别经肌内注射途径和鼻黏膜滴注途...
- 许庆安樊明文边专彭彬贾荣
- 关键词：质粒免疫抗原
- 文献传递
- 细胞毒淋巴细胞相关抗原4融合蛋白靶向树突状细胞作用的体外研究
- 2012年
- 目的:研究细胞毒淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)靶向重组质粒pGJGLU/GFP在COS-7细胞中的表达水平,并研究CTLA-4融合蛋白的生物学活性,检测融合蛋白能否与体外培养的抗原递呈细胞树突状细胞靶向结合。方法:质粒pGJGLU/GFP体外转染COS-7细胞,荧光显微镜下观察蛋白的表达,利用双抗夹心法,以人IgG作为标准品,检测培养上清中蛋白的表达水平。体外培养人外周血来源的树突状细胞,并与浓缩的上清液作用,通过流式细胞术检测结合在树突状细胞表面的蛋白,在封闭(C组)与未封闭(B组)树突状细胞表面CTLA-4配体,即B7分子的条件下,比较树突状细胞的平均荧光强度,实验设置阴性对照(A组)。结果:转染后的COS-7细胞高表达绿色荧光融合蛋白,ELISA方法检测到浓缩后上清中蛋白浓度约相当于0.62mg/L人IgG。流式细胞术检测到B组细胞平均荧光强度明显高于A组和C组,而A组与C组细胞平均荧光强度没有明显差异。结论:靶向重组质粒pGJGLU/GFP在COS-7细胞中高表达CTLA-4融合蛋白,蛋白具有CTLA-4的活性并与体外培养的树突状细胞特异性结合。
- 张锋樊明文
- 关键词：DNA树突状细胞
- 靶向防龋质粒转染的树突状细胞抗原提呈相关基因表达研究
- 2008年
- 目的:比较靶向和非靶向防龋质粒转染的树突状细胞抗原提呈相关基因表达差异,分析靶向防龋质粒增强抗体反应的可能机制。方法:构建绿色荧光蛋白标记的靶向防龋质粒pMGJGLU/GFP和非靶向防龋质粒pCDG-LU/GFP。pMGJGLU/GFP和pCDGLU/GFP分别转染小鼠树突状细胞,芯片分析两组树突状细胞抗原提呈相关基因的表达差异,实时荧光定量RT-PCR检验差异表达基因。结果:与pCDGLU/GFP转染的树突状细胞相比,pMGJGLU/GFP转染的树突状细胞有28个基因表达上调,6个基因表达下调,其中Ccl17、Ccl19和CD209a上调最为显著。结论:靶向DNA质粒转染树突状细胞一系列活化和成熟基因发生了变化,其中Ccl17、Ccl19和CD209a可能发挥重要的免疫增强作用。
- 许庆安郭继华樊明文
- 关键词：树突状细胞基因芯片龋齿
- 实验性防龋DNA疫苗pGJA—P／VAX在小鼠体内分布和表达被引量：3
- 2008年
- 本研究将实验疫苗经滴鼻免疫后定量PCR应用于检测不同时间DNA疫苗pGJA-P／VAX在小鼠体内各组织中的分布及其在接种部位与引流淋巴结内mRNA的表达情况，从而为DNA疫苗产生持续性免疫应答的机制提供试验数据，对该疫苗进一步研究提供了安全性方面的试验资料。
- 刘畅樊明文
- 关键词：防龋DNA疫苗小鼠体内分布引流淋巴结定量PCR
- 防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX免疫小鼠后的抗DNA抗体检测被引量：10
- 2006年
- 目的:检测防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX经鼻腔免疫和肌肉免疫后是否会产生抗DNA抗体。研究该疫苗是否会导致自身免疫性疾病。方法:提取纯化的质粒pGJA-P/VAX分别经鼻腔和肌肉免疫小鼠,于第0、2、4、8周取血清做抗DNA抗体检测实验(ELISA法)。结果:各实验组之间均无显著性差异,各组免疫前后及各组间比较(P>0.01)。结论:说明DNA疫苗pGJA-P/VAX及其载体pVAX1对小鼠均不会引起自身免疫反应,导致自身免疫病。
- 杜宇樊明文李宇红郭继华边专陈智
- 关键词：DNA
- 靶向融合防龋DNA疫苗编码蛋白靶向于人树突状细胞的体外研究被引量：1
- 2007年
- 目的:体外检测靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX1编码蛋白的生物学活性,研究蛋白是否具有靶向于抗原递呈细胞如树突状细胞的能力。方法:pGJA-P/VAX1和pVAX1分别转染真核细胞COS-7,收集并浓缩细胞培养上清。利用双抗夹心法,以人的IgG为标准品,检测上清及浓缩液中pGJA-P/VAX1编码蛋白的含量。体外培养人外周血来源的树突状细胞,与两种上清浓缩液孵育一段时间后,通过流式细胞术检测树突状细胞是否结合编码蛋白。实验分A、B、C组,A组树突状细胞与VAX1浓缩液作用,B组中树突状细胞与GJA-P/VAX1浓缩液作用,C组中树突状细胞表面B7分子首先被B7-1和B7-2的单克隆抗体封闭,然后与GJA-P/VAX1浓缩液作用。结果:pGJA-P/VAX1转染细胞后,培养上清的浓缩液中蛋白浓度相当于0.22μg/mL人的IgG。而pVAX1转染上清及浓缩液均未有蛋白检出。流式结果显示B组细胞平均荧光强度及细胞表面编码蛋白阳性率明显高于A组和C组。B组相对A组和C组,细胞直方图峰向右偏移。A、C两组细胞平均荧光强度近似,且两组细胞直方图近乎重合。结论:靶向融合防龋DNA疫苗编码的融合蛋白保持了CTLA-4的活性,可通过B7分子靶向结合树突状细胞。
- 田其威张锋樊明文许庆安李宇红贾荣郭继华
- 关键词：DNA疫苗树突状细胞CTLA-4
