国家教育部博士点基金(20050057001)
- 作品数：7 被引量：32H指数：3
- 相关作者：肖冬光和东芹吕烨邹静郭学武更多>>
- 相关机构：天津科技大学邯郸职业技术学院更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- pSH-CUP重组质粒的构建及面包酵母酸性海藻糖酶基因的敲除被引量：4
- 2008年
- 设计含有与面包酵母(Saccharomyces cerevisiae BY-6)编码酸性海藻糖酶ATH基因内部部分序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除单元,转化面包酵母获得G418阳性克隆。将铜抗性基因(CUP1-MT1)导入Cre重组酶表达质粒pSH47,得到重组质粒pSH-CUP,并转化阳性克隆,以铜抗性筛选面包酵母转化子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kan^r基因。重组质粒pSH-CUP的构建,不仅解决了酵母转化子筛选标记问题和非酵母基因的引入,而且使LoxP-kanMX-loxP基因敲除体系在进行真核生物基因敲除时更加方便可行。
- 和东芹肖冬光吕烨
- 关键词：面包酵母基因敲除
- 面包酵母酸性海藻糖酶活性测定被引量：3
- 2006年
- 首先通过单因素实验研究了pH值、温度、底物浓度对面包酵母酸性海藻糖酶活性的影响,然后通过正交试验得出了酸性海藻糖酶活性测定的适宜条件:海藻糖浓度1.6%、温度30℃、pH 4.0、酵母菌泥接种量为0.02g/mL。在此条件下,海藻糖的消耗量与时间成线性关系,并得出该菌的酸性海藻糖酶活性为338.6 mg/(g.h)。可用于面包酵母酸性海藻糖酶活性的测定和耐冷冻酵母菌株的选育。
- 肖冬光邹静和东芹
- 关键词：面包酵母
- 面包酵母中性海藻糖酶活性的测定方法
- 2007年
- 酵母中性海藻糖酶是受蛋白激酶磷酸化作用调控的酶,其在体内的酶活性与用破壁后提出的酶活性有很大的差异。本文构建了一种活体测定面包酵母中性海藻糖酶活性的方法,在pH为6.8的100mL模拟面团溶液中,接新鲜酵母泥2g,30℃下作用5min,以每克菌体单位时间内胞内海藻糖的消耗量来定义酶的活性。
- 邹静肖冬光宋飞谷向春和东芹
- 关键词：面包酵母
- 酿酒酵母海藻糖含量与酒精和高温耐性的关系被引量：2
- 2009年
- 海藻糖的积累对增加酿酒酵母多种压力耐性具有重要作用。为了深入研究海藻糖与酒精和高温耐性的关系,以工业酵母菌株为出发菌株构建中性海藻糖酶突变株(△nth1)。研究结果显示,与出发菌株相比,突变株△nth1海藻糖积累能力提高,用20%的酒精处理后仍可保持高的细胞存活率,无呼吸缺陷型的出现,并且在45℃发酵时仍能保持相对较高的产酒量,表明高海藻糖含量可以保护细胞,提高细胞酒精耐性和高温耐性,突变株△nth1可作为酿酒和燃料酒精等工业优良生产菌株。
- 肖冬光张翠英吕烨
- 关键词：发酵工程基因工程酿酒酵母海藻糖
- 面包酵母耐冷冻性影响因子的研究进展被引量：10
- 2007年
- 论述了影响面包酵母耐冷冻性的各种因子。耐冷冻面包酵母是冷冻面团技术的关键,许多因素与酵母冷冻耐受性有关,如酵母胞内海藻糖含量、甘油含量、酒精含量、热休克蛋白含量、不同脂肪成分的比例、某些带电荷的氨基酸含量、呼吸能力、控制质膜的水运送的基因的表达等等,而海藻糖在酵母胞内起到的耐冷冻作用被广泛证明。
- 和东芹肖冬光邹静
- 关键词：面包酵母海藻糖
- Cre/lox P系统介导的基因重组及其在酵母中的应用被引量：3
- 2008年
- Cre/loxP系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,具有位点特异、时期特异、组织特异和高效重组的特点,它为转基因生物工程研究提供有力工具。概述了Cre/loxP系统的组成、结构、作用方式、机制、特点及其在酵母中的应用。
- 和东芹肖冬光吕烨
- 关键词：CRE/LOXP系统CRE重组酶基因重组
- 酵母海藻糖酶缺失突变株的构建及其耐性被引量：11
- 2008年
- 【目的】构建酵母海藻糖酶缺失突变株,并进行耐性分析,进一步研究海藻糖与酵母耐性之间的关系,为商业生产打下一定的基础。【方法】利用同源重组的方法,敲除了编码酸性海藻糖酶的ATH1基因和中性海藻糖酶的NTH1基因,构建了酸性海藻糖酶缺失突变株(△ath1)、中性海藻糖酶缺失突变株(△nth1)和双缺失突变株(△ath1△nth1),并进行了耐性分析。【结果】结合PCR和Southernblot的结果,验证了突变株构建的正确。所有突变株的海藻糖积累量和细胞密度均高于亲本,冷冻、高温、高糖和酒精耐性提高了。【结论】说明海藻糖含量与酵母耐性有一定的相关性。突变株耐性的改善,表明它们在酿造和烘焙产业中具有潜在的商业价值。
- 吕烨肖冬光和东芹郭学武
- 关键词：海藻糖
