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关键基因在体外调控卵母细胞GVBD的用途及干扰片段
本发明属于基因学技术领域,公开了关键基因在体外调控卵母细胞GVBD的用途及干扰片段。通过对不同发育时间段GV期和GVBD期卵母细胞进行转录组测序分析,确定卵母细胞GVBD前后转录差异,筛选出差异表达的基因,构建分子调控网...
郇延军孙建强相洪晓李健毕方龙王宁高文举
uPA对体外成熟牛卵母细胞生发泡破裂的影响
2018年
为了探明尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对体外成熟牛卵母细胞核成熟的可能作用,试验根据uPA及其特异性抑制剂(amiloride)的有效浓度分成4组,即对照组、uPA(0.5 ng/mL)组、amiloride(1μg/mL)组及联合添加(uPA+amiloride)组,然后采用地衣红染色方法分别研究体外成熟培养6 h与12 h后uPA对牛卵母细胞生发泡破裂(GVBD)的影响,采用ELISA方法研究体外成熟培养6 h后uPA对牛卵丘-卵母细胞复合体(COCs)中cAMP水平变化的可能调节作用。结果表明:减数分裂不同时期(GV期、GVBD期及MⅠ~MⅡ期)卵母细胞染色质(体)形态呈现不同特征。卵母细胞在体外成熟培养6 h后各组细胞均处于GV^GVBD期,其中uPA组GVBD期卵母细胞率(12.72%)显著低于对照组(24.83%)与联合添加组(30.42%,P〈0.05);体外成熟培养12 h后,uPA组GVBD期卵母细胞率(54.81%)显著高于对照组(37.49%)与联合添加组(25.64%,P〈0.05),uPA组MⅠ~MⅡ期卵母细胞率(44.85%)显著低于对照组(62.51%)与联合添加组(74.36%,P〈0.05);体外成熟培养6 h后,uPA组cAMP水平显著高于对照组与联合添加组(P〈0.05)。说明uPA通过上调cAMP水平阻滞牛卵母细胞的减数分裂进程。
段云娇刘新宇塔娜赵玉芬于泊洋钱英红李海军
关键词:卵母细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂减数分裂环磷酸腺苷
小鼠卵母细胞中14-3-3蛋白亚型的表达被引量:2
2015年
目的对小鼠卵母细胞生发泡期(GV)、生发泡破裂期(GVBD)的14-3-3蛋白亚型表达进行鉴定。方法RT-PCR法检测GV、GVBD期卵母细胞中14-3-3蛋白7个亚型的mRNA水平,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测其蛋白表达水平。结果检测了7个14-3-3亚型(β,γ,ε,σ,ζ,τ和η)mRNA的表达水平,结果显示,在GV期只有14-3-3β和14-3-3ε两个亚型表达,并且14-3-3εmRNA水平显著高于14-3-3β(P<0.01)。在蛋白水平上,在小鼠卵母细胞GV期和GVBD期均检测到14-3-3ε亚型蛋白表达,未检测到14-3-3β蛋白表达。结论 14-3-3蛋白ε亚型在小鼠卵母细胞GV、GVBD期均稳定表达。
孟峻侯艳军张永梅呼格吉乐刘洋宿瑞俊
关键词:卵母细胞
提高体外成熟卵母细胞质量研究:抑制GVBD的后作用及体外成熟系统优化
本文分为两个部分进行探讨:  PARTⅠ:通过抑制卵母细胞GVBD,增加胞质成熟时间来提高体外成熟卵母细胞质量的方法很少有成功的,主要由于缺乏对GVBD抑制期间发生分子事件了解。这方面的报道对研究卵母细胞GV期间基因表达...
焦光忠
关键词:卵母细胞体外成熟氧化应激
Akt1和Akt2在小鼠卵母细胞中定位的差别被引量:1
2015年
目的研究小鼠卵母细胞减数分裂恢复过程中Akt1和Akt2在从GV期向GVBD期转化期间亚细胞定位的特点。方法采用间接免疫分析技术观察Akt1和Akt2在小鼠卵母细胞GV期和GVBD期的定位;利用显微注射实验技术将Akt1和Akt2抗体分别注射入卵细胞,在不同时间点观察GVBD的发生的数量。结果 Akt1在小鼠卵母细胞GV期均匀的分布于细胞质,而在GVBD期则分布于细胞膜。Akt2在GV期和GVBD期分布于整个细胞,但是GV期以细胞质更为密集,而在GVBD期以细胞核附近更为密集。结论 Akt1可能参与小鼠卵母细胞减数分裂恢复的调控。
邓欣李森刘艳春曹宇李亘松于秉治
关键词:卵母细胞减数分裂
孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查
2014年
非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。
曹闪楼钦钦魏无际秦占芬
关键词:卵母细胞内分泌干扰物孕酮非洲爪蟾
Cdh1基因在牛卵母细胞GVBD中的功能研究
在哺乳动物卵母细胞减数分裂GV期阻滞和减数分裂恢复过程中,MPF(CDK1-Cyclin B1)活性的变化起着关键性作用。有报道表明Cdh1基因在小鼠卵母细胞GV期阻滞过程中发挥重要的作用,APCCdh1通过降解Cycl...
井勇
关键词:CDH1GVBD卵母细胞ROSCOVITINE
小鼠卵母细胞生发泡破裂前的钙离子波动及分布被引量:1
2000年
用显微操作技术将Ca2 + 特异荧光染料Calcium greenTM 1注射入GV期卵母细胞的细胞质内 ,在激光扫描共聚焦显微镜下观察生发泡破裂前Ca2 + 的时间和空间分布的变化 ,利用Lasersharp软件进行分析 ,发现一种有规律的Ca2 + 波动 ,其波动周期约为 90s .卵母细胞内Ca2 + 的分布并不均匀 ,核膜周围的Ca2 + 浓度最高 ,细胞质中次之 ,而生发泡内部Ca2 +
毕春明陈彦戴谷陆金春李朝军张锡然
关键词:卵母细胞钙离子GVBD
cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用被引量:1
2001年
谭信孙青原王永潮彭安陈大元何大澄
关键词:CAMP卵丘细胞卵母细胞GVBDMAPK磷酸化
Kisspeptin stimulates oocyte maturation,and food deprivation modulates the abundance of kisspeptin system in zebrafish gonads被引量:1
2022年
Kisspeptin is a hormone involved in the neuroendocrine control of reproduction in fish.We hypothesized that kisspeptin stimulates oocyte maturation and modulates other reproductive hormones in zebrafish;and the gonadal kisspeptin system in zebrafish is affected during energy unavailability.The main goals of this research were to test in vitro effects of kisspeptin on oocyte maturation and mRNA abundance in zebrafish ovarian follicles and determine how short-term feed restriction affects kisspeptin and its receptors in zebrafish testis and ovary.This study demonstrates the presence of kisspeptin and its receptors in zebrafish(Danio rerio)gonads and its direct action on ovarian follicles in vitro.Kisspeptin(10 ng/mL)induced oocyte maturation,as indicated by germinal vesicle break down at 18-and 24-hours post-treatment.Kisspeptin significantly increased the abundance of mRNAs encoding reproductive hormones and its receptors in zebrafish oocytes.This suggests that kisspeptin-10 affects ovarian functions by modulating other hormones.Reproduction is a process that requires energy.Therefore,whether energy availability affects the kisspeptin system in zebrafish gonads was determined.Food deprivation modulated kisspeptin expression differently in zebrafish testis and ovary.Kiss2 and kiss1ra were upregulated while kiss1rb was downregulated in the testis post-food deprivation.Meanwhile,no changes in kiss in the ovary were found after food deprivation.However,kiss1rb was downregulated in unfed fish at 3-and 7-days post-food deprivation.Overall,our results suggest sex-and tissue-specific changes in the gonadal abundance of the kisspeptin system in zebrafish.The fine tuning of reproduction during energy fluctuations in fish is likely mediated via changes in hormones,including kisspeptin as shown in this research.
Azadeh HatefJithine Jayakumar RajeswariSuraj Unniappan
关键词:OOCYTEKISSPEPTINGVBDGONADOTROPINOVARYZEBRAFISH

相关作者

郭峰
作品数:52被引量:213H指数:10
供职机构:中国水产科学研究院长江水产研究所
研究主题:黄鳝 日本鳗鲡 精子 抗冻剂 稀释液
陈大元
作品数:189被引量:719H指数:15
供职机构:内蒙古大学
研究主题:卵母细胞 精子 小鼠 核移植 受精
孙青原
作品数:139被引量:605H指数:14
供职机构:中国科学院动物研究所
研究主题:卵母细胞 受精 小鼠 MAPK 减数分裂
秦占芬
作品数:87被引量:307H指数:11
供职机构:中国科学院生态环境研究中心
研究主题:非洲爪蟾 黑斑蛙 内分泌干扰物 蝌蚪 两栖动物
张阳
作品数:77被引量:668H指数:15
供职机构:中国医科大学
研究主题:艾滋病 医学生 卵母细胞 知识 小鼠卵母细胞