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类Crustin抗菌肽及编码基因的获取方法与应用: 本发明涉及由凡纳滨对虾基因组中多WAP编码基因转录并经选择性剪切产生的一组类Crustin抗菌肽的获取及其抗菌应用。该组成熟mRNA分子编码类Crustin抗菌肽LvTWD‑C1W1C3、LvTWD‑W2C4和LvTWD...; 李诗豪李富花胡婕

一种日本沼虾Ⅰ型甲壳素（Crustin）基因的免疫功能分析方法及应用: 本发明公开了一种日本沼虾Ⅰ型甲壳素(Crustin)基因的免疫功能分析方法及应用。本发明首次克隆出了日本沼虾2种Ⅰ型甲壳素(Crustin)基因，并利用体内抗病原体感染以及RNA干扰(RNAi)合并病原体感染的技术方法分...; 江红霞刘雪巍李欢欣李屹峥张帅帅张冉李玉华张猛王磊于淼乔志刚

脊尾白虾抗菌肽Crustin基因的克隆、表达与功能研究: 2022年; 为研究脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)抗菌肽Crustin的结构特征和功能,本研究从脊尾白虾中克隆得到一个Crustin的新变体,命名为EcCrustin1。研究结果表明,EcCrustin1基因cDNA序列长度为740 bp,开放阅读框(ORF)长度为477 bp,编码158个氨基酸,EcCrustin1蛋白具有Ⅱ型Crustin的典型特征,包括N端的信号肽,C端WAP结构域,以及二者之间的甘氨酸富集区(GRR)和半胱氨酸富集区(CRR)。EcCrustin1基因主要在脊尾白虾血淋巴中表达,副溶血弧菌刺激后,EcCrustin1在血淋巴中的表达显著上调(P<0.05),说明EcCrustin1在脊尾白虾先天免疫应答中发挥重要作用。此外,通过原核表达获得了该抗菌肽的重组蛋白,为进一步研究其抑菌功能和机理提供了基础。; 徐凯刘鑫玟覃昊张珍珍阎斌伦高焕胡广伟; 关键词：脊尾白虾抗菌肽 CRUSTIN 基因克隆原核表达

类Crustin抗菌肽及编码基因的获取方法与应用: 本发明涉及由凡纳滨对虾基因组中多WAP编码基因转录并经选择性剪切产生的一组类Crustin抗菌肽的获取及其抗菌应用。该组成熟mRNA分子编码类Crustin抗菌肽LvTWD‑C1W1C3、LvTWD‑W2C4和LvTWD...; 李诗豪李富花胡婕

克氏原螯虾一种新型甲壳素基因的鉴定和抑菌功能研究被引量：2: 2022年; 抗菌肽是无脊椎动物非特异性免疫系统中重要的免疫因子,抗菌肽具有良好且广谱的抗菌活性,并且不易产生耐药性,有望替代传统抗生素药物发挥功能。甲壳素(Crustin)是目前甲壳类动物中研究比较广泛的一类抗菌肽家族。研究鉴定了来自克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中的一种新型Crustin基因,命名为Pc-CruL。通过Pc-CruL抵抗病原性细菌的免疫防御反应的初步探究,发现Pc-CruL对克氏原螯虾的天然免疫系统至关重要,为深入研究克氏原螯虾奠定了一定的基础,在克氏原螯虾的人工养殖过程中的疾病的预防和治疗中具有一定的指导意义且提供了一定的理论基础。Pc-CruL包含330 bp,编码109个氨基酸,与已知的克氏原螯虾甲壳素同源性较低,为Ⅰ型甲壳素蛋白家族新成员。Pc-CruL在健康的克氏原螯虾的血淋巴、鳃、肠道、胃、心和肝胰腺中均存在,在血淋巴中的含量最高,而在肝胰腺中含量最低。同时进行了体外抑菌实验,结果表明Pc-CruL重组蛋白显著地抑制了几种常见的病原性细菌的生长,具有良好的广谱抑菌活性。体内实验表明,对健康的克氏原螯虾注射Pc-CruL重组蛋白可以保护克氏原螯虾,在副溶血弧菌感染后,提高存活率。Pc-CruL是克氏原螯虾中关键的免疫因子,在克氏原螯虾抵抗外界病原菌入侵和感染过程中起着重要的作用。; 焦厚琪霍诗天闫黎明李艳和刘学芹; 关键词：克氏原螯虾抗菌肽先天免疫甲壳素副溶血弧菌

克氏原螯虾受鲶爱德华氏菌刺激后Pc-crustin 6基因的表达分析被引量：1: 2021年; 【目的】为了后续深入研究克氏原螯虾甲壳肽基因的功能。【方法】以Pc-crustin 6甲壳肽基因作为研究对象,通过设计特异性引物进行PCR扩增,利用生物信息学软件进行氨基酸序列比对与系统进化树分析,探讨PcCrustin 6的分子特性;并利用qRT-PCR技术分析目的基因在不同组织中的表达水平,检测鲶爱德华氏菌刺激后基因的表达模式。【结果】Pc-crustin 6的cDNA序列全长为465 bp,开放阅读框包括384 bp,编码127个氨基酸残基;在分子的N端包含一个由25个氨基酸残基组成的信号肽序列,C端包含一个由8个保守的半胱氨酸残基构成的WAP结构域。Pc-crustin 6在被检测的5个组织中均存在一定的表达,其中,鳃组织的相对表达量最高。鲶爱德华氏菌刺激后,Pc-crustin 6在血细胞、肝胰腺、鳃、肠组织中均表现出了明显的上调趋势。【结论】机体在受到鲶爱德华氏菌刺激后,Pc-crustin 6相对表达量发生改变,推测其在小龙虾抗鲶爱德华氏菌过程中发挥了作用。; 杨兵兵魏哲蔺思函李倩倩李博王春丹沈秀丽杜志强; 关键词：克氏原螯虾抗菌肽先天免疫

酿酒酵母表达中华绒鳌蟹甲壳肽及其抗菌功能研究: 2021年; 抗菌肽是宿主抵御外来病原入侵时在先天免疫中的重要效应因子。作为一种抗菌蛋白,甲壳动物中的甲壳肽是其先天免疫系统的组成成分。在本研究中,中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)甲壳肽Crustin(以下简称EsCrustin)在酵母真核系统中表达。先将EsCrustin的ORF克隆到质粒载体pHAC181中,然后通过同源重组技术将重组质粒整合到酿酒酵母菌株GAL1-ScRCH1的GAL1启动子下游以启动表达。重组蛋白在其C末端含有3个HA标签,经Westernblot分析表明重组蛋白MrCrustin的分子量约为20kDa。重组蛋白的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)值分别为0.467-0.921μM和0.887-1.135μM。重组蛋白几乎可以凝集除铜绿假单胞菌外的多种革兰氏阴性及阳性细菌。此外,重组蛋白EsCrustin对嗜水气单胞菌有明显的抑制作用,在琼脂平板上出现较大抑菌圈。以上研究结果表明,本研究中酵母表达的重组蛋白对部分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均表现出抗菌活性。因此,重组蛋白EsCrustin是一种具有杀菌功能的抗菌肽,它在参与甲壳类先天免疫,抵抗病原细菌和病毒的入侵过程中发挥重要作用。; 杜婕张容彬徐浩鹏周广帅; 关键词：酿酒酵母真核表达中华绒鳌蟹抗菌功能

一种三疣梭子蟹新型Crustin基因及其重组蛋白的应用: 本发明涉及一种三疣梭子蟹新型Crustin基因及其重组蛋白的应用，涉及三疣梭子蟹基因工程，该三疣梭子蟹新型Crustin基因序列如SEQ NO.1所示，本发明还提供一种制备三疣梭子蟹新型Crustin基因重组蛋白的方法，...; 陶欣悦母昌考王春琳李荣华宋微微史策刘磊叶央芳; 文献传递

克氏原螯虾抗菌肽crustin5基因克隆及其表达分析被引量：2: 2020年; 【目的】深入了解克氏原螯虾先天免疫过程中抗菌肽的作用与功能,丰富先天免疫中抗菌肽的理论知识,为克氏原螯虾的病害机理研究及防控措施制定提供参考依据。【方法】从克氏原螯虾肝胰腺组织提取总RNA,利用PCR扩增crustin5基因全长cDNA序列,运用DNAMAN 6.0、ProtParam、ProtScale、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件对其进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测crustin5基因在克氏原螯虾各组织中的表达情况。【结果】克氏原螯虾crustin5基因cDNA序列全长954 bp,开放阅读框(ORF)为429 bp,共编码167个氨基酸残基,其编码蛋白相对分子量为16485.42 Da,理论等电点为8.58,为不稳定的疏水性蛋白。克氏原螯虾crustin5蛋白具有典型的crustins家族结构特征,包括N端的信号肽,C端的WAP结构域,以及二者间的半胱氨酸富集区;其二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链分别占20.36%、7.78%、58.08%和13.77%。crustin5基因在克氏原螯虾血细胞、肝胰腺、鳃、肠道、肌肉和淋巴器官等6种组织中均有不同程度的表达,以在血细胞中的相对表达量最高,淋巴器官次之,在肌肉组织中的相对表达量最少。【结论】克氏原螯虾抗菌肽crustin5具有典型的crustins家族结构特征,且主要分布在血细胞和淋巴器官中,说明crustin5是在克氏原螯虾的血淋巴中参与先天免疫并发挥抗菌作用。; 李博王凯于晓东刘睿哲蔺思函商静沈秀丽杜志强; 关键词：克氏原螯虾抗菌肽先天免疫

凡纳滨对虾Crustin基因的多样性及其在抵御弧菌感染中的作用机制研究: 抗菌肽作为先天免疫应答产生的一类重要的效应分子，在宿主抗感染免疫防御中发挥重要作用。Crustin是甲壳动物广泛存在的一类抗菌肽，目前已在甲壳动物中报道了Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型，它们在体外具有抗微生物、抑制蛋白酶等多种活...; 吕新嘉; 关键词：凡纳滨对虾基因多样性弧菌感染免疫学功能

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