陈伟
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：湘南学院附属医院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组pEGFP-C1-CXCL1真核表达载体构建及其对内质网应激下人肝癌细胞HepG2的增殖作用被引量：1
- 2017年
- 目的构建pEGFP-C1-CXCL1真核表达载体,研究过表达CXCL1对内质网应激(ERS)下肝癌细胞增殖作用。方法以Hep G2细胞的c DNA文库为模板,通过PCR扩增CXCL1编码序列,并将其插入pEGFP-C1空载体,构建pEGFP-C1-CXCL1真核表达载体,随后将其瞬时转染到293T细胞中,通过荧光显微镜和蛋白质免疫印迹法检测CXCL1在真核细胞中的表达情况,将pEGFP-C1-CXCL1转染至Hep G2细胞中,CCK8检测CXCL1对TM诱导下的ERS肿瘤增殖的抑制作用。结果菌液PCR和测序结果均证实得到pEGFP-C1-CXCL1真核表达载体,其转染293T细胞后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,免疫印迹表明CXCL1在293T细胞中表达,CCK8实验表明,ERS条件下肿瘤的增殖受到抑制,而过表达的CXCL1可降低ERS下的Hep G2细胞的增殖抑制。结论成功构建了真核表达质粒pEGFP-C1-CXCL1,并在人胚肾293T细胞中瞬时表达成功,过表达的CXCL1可有效降低由ERS造成的肝癌细胞的增殖抑制。
- 毛瑞涛陈伟李自慧邹岭叶甲舟白涛陈洁陈健康王翠刘宁杨晓莉魏从文钟辉吴飞翔
- 关键词：趋化因子类
- 内质网应激对肝癌细胞中趋化因子表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨肝癌细胞发生内质网应激时,细胞中趋化因子的表达情况。方法:培养HepG2细胞,用荧光定量PCR检测经不同浓度衣霉素(TM)刺激后,趋化因子CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL8的mRNA水平,用ELISA方法检测培养基中的CXCL1含量。结果:TM刺激Hep G2细胞后,CXCL1、CXCL2、CXCL3的mRNA水平显著升高,而CXCL8的mRNA水平降低,其中CXCL1的mRNA水平呈剂量依赖性。结论:内质网应激影响细胞内趋化因子的表达,不同因子的表达趋势有差别。
- 毛瑞涛陈伟邹岭李自慧叶甲舟白涛陈洁陈健康王翠刘宁杨晓丽吴飞翔
- 关键词：趋化因子内质网应激肝细胞癌
- CXCL1促进内质网应激在肝癌肿瘤微环境中传递被引量：1
- 2018年
- 目的:研究趋化因子1(CXCL1)对肝癌肿瘤微环境中肿瘤细胞间及肿瘤细胞和巨噬细胞间内质网应激(ERS)的作用。方法:收集受衣霉素(TM)刺激的HepG2细胞的上清作为条件培养基,用于培养未受TM刺激的HepG2和THP-1细胞,检测培养基中未折叠蛋白反应(UPR)相关蛋白IRE1、PERK和ATF6的mRNA表达,构建ERS在细胞间传递的模型;合成si-CXCL1,瞬时转染HepG2细胞,RT-PCR检测HepG2细胞的CXCL1的转染效率,ELISA检测上清中CXCL1的表达水平;TM刺激CXCL1敲低的HepG2细胞,收集其上清用于培养未受TM刺激的HepG2和TPH-1细胞,RT-PCR检测HepG2细胞和THP-1细胞中UPR相关的IRE1、PERK及ATF6的mRNA表达。结果:用TM刺激后的条件培养基培养HepG2和TPH-1细胞时,2种细胞中的IRE1、PERK、ATF6表达均上调,构建了ERS在细胞间传递的模型;si-CXCL1转染HepG2细胞后,与对照组相比,si-CXCL1组HepG2细胞中CXCL1的表达降低,同时ELISA检测培养基中的CXCL1也降低;用TM刺激CXCL1敲低的HepG2细胞的上清培养未受TM刺激的HepG2和TPH-1细胞后,与对照组相比,CXCL1血清敲低组培养的细胞中IRE1、PERK和ATF6的mRNA水平均下降。结论:CXCL1能够促进肝癌肿瘤微环境中内质网应激在细胞间传递。
- 彭雨蒙陈伟邹岭叶甲舟白涛陈洁陈健康王翠刘宁杨晓莉魏从文钟辉吴飞翔
- 关键词：肝癌内质网应激未折叠蛋白反应
- CXCL1促进人肝癌细胞发生内质网应激
- 2018年
- 目的:探究趋化因子CXCL1过表达对人肝癌HepG2细胞内质网应激的影响。方法:将GFP-CXCL1质粒转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白;将该质粒转染人肝癌HepG2细胞,24 h后收集细胞,提取细胞总mRNA后进行反转录,荧光定量PCR检测内质网应激相关蛋白IRE1、PERK、ATF6的表达。结果:CXCL1过表达后,通过荧光定量PCR检测出内质网应激相关蛋白IRE1、PERK、ATF6均升高。结论:过表达的CXCL1能够促进人肝癌HepG2细胞的内质网应激,为后续研究奠定了基础。
- 邹岭陈伟李自慧叶甲舟白涛陈洁陈健康王翠刘宁杨晓丽吴飞翔
- 关键词：肝癌内质网应激
