王芳
- 作品数：25 被引量：108H指数：5
- 供职机构：青海省农林科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金青海省科技厅基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 应用隶属函数法对马铃薯进行抗旱性综合评价被引量：43
- 2014年
- 为研究不同马铃薯品种的抗旱性,本文以抗旱性不同的马铃薯品种为材料,在水分胁迫条件下,通过测定马铃薯的丙二醛、游离脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖和叶绿素等生理指标和马铃薯产量,研究了19份马铃薯材料的抗旱性,并采用主成分分析法和隶属函数法对其抗旱性进行了综合评价。结果表明,模糊隶属函数法可以避免单一指标的片面性,能较全面地评价马铃薯的抗旱性,根据隶属函数平均值的大小对马铃薯抗旱性进行了排序,抗旱性由强到弱的顺序为:F12,青薯9号、克新6号、393371.58,FL1533,139,冀张薯8号、乐薯1号、Er-1,波S,R9,陇薯2号、下寨65,Pepo 418,552,石引08-1,国外品种2,俄引、Russia 2。
- 王谧王芳王芳
- 关键词：马铃薯水分胁迫抗旱性隶属函数法
- 马铃薯杂交后代表型性状的遗传变异分析
- 2023年
- 为了研究马铃薯杂交后代表型性状的分离和遗传变异规律,本研究以116份青薯9号与大西洋的杂交后代和425份青薯9号与品系12-9-33的杂交后代为研究对象,采用性状离散特征描述、Pearson相关性分析和聚类分析等统计学方法对杂交后代的26个性状进行遗传多样性分析。结果表明,2个组合的26个农艺性状都存在广泛而丰富的遗传变异,地上部分各性状之间、地下部分各性状之间以及地上和地下各性状之间都存在复杂的相关性,说明营养生长与生殖生长之间存在一定的遗传关系。2个组合的26个性状中,中亲优势率分别为-45.00%~47.65%和-29.35%~25.35%,超亲优势分别为-30.59%~102.24%和-64.78%~202.80%。根据马铃薯加工产品标准,初步筛选出70个单株,并通过主成分分析,在经过初筛后的70个单株中选出综合性状最优的10个单株。70个后代以及3个亲本在遗传距离10.2处分为五大类群,其中第Ⅰ类群和第Ⅳ类群的品质性状较好,第Ⅴ类群产量较高。
- 李雅萍王舰王芳
- 关键词：马铃薯聚类分析主成分分析
- 大麦干种子DNA提取研究被引量：8
- 2007年
- 进行了应用改进后CTAB方法从半粒大麦种子中提取DNA的研究。结果表明,从干种子中提取的DNA是完整的,多糖等大分子及RNA也被去除;提取的DNA与大麦叶片中提取的DNA是一致的;其PCR扩增产物与从叶片中提取的DNA扩增产物有相同的条带类型。
- 王芳
- 关键词：半粒种子DNA提取CTAB法分子标记
- PEG模拟干旱胁迫下马铃薯茎段转录组分析被引量：11
- 2020年
- 该研究以‘青薯9号’马铃薯无菌苗为材料,采用转录组测序技术分析模拟干旱胁迫下马铃薯茎段的差异表达,探究茎段在干旱胁迫下的分子机制。结果表明:(1)不同程度干旱胁迫下,马铃薯叶片脯氨酸、可溶性糖以及可溶性蛋白含量明显增加;马铃薯茎段差异表达基因下调的数量均多于上调,其中3种处理条件下共有的差异表达基因有657个。(2)GO富集分析表明,马铃薯茎段差异表达基因主要集中在氧化还原过程、激素响应、氧化还原酶活性以及糖基水解酶活性;Pathway富集分析表明,马铃薯茎段差异表达基因主要集中在植物激素信号转导、苯丙酸生物合成、玉米素生物合成、苯丙氨酸代谢、淀粉和蔗糖代谢以及次生代谢产物的生物合成。(3)实时荧光定量PCR验证结果表明,6个差异表达基因在不同程度干旱胁迫中的差异表达与转录组分析的结果基本一致,证明转录组数据的可靠性。该结果对进一步研究马铃薯干旱胁迫响应机制有一定参考价值,也丰富了马铃薯抗旱育种的基因资源。
- 赵龙王舰王芳
- 关键词：马铃薯干旱胁迫差异表达基因
- 马铃薯蔗糖合酶基因家族序列及表达模式分析
- 2022年
- 蔗糖合酶(sucrose synthase,SUS)是一种广泛存在于植物中,催化尿苷二磷酸葡糖(UDPG)上的葡萄糖基团转移到果糖上形成蔗糖和尿苷二磷酸(UDP),也可催化可逆反应的糖基转移酶。蔗糖在植物抵御逆境胁迫中有着重要的作用。为了解马铃薯蔗糖代谢相关基因StSUSs基因分子作用机制,本研究对从马铃薯基因组中获取到的StSUSs进行了蛋白理化性质、保守蛋白结构域、基因结构、染色体定位、系统进化树构建、顺式作用元件预测等的分析,利用RT-qPCR对非生物胁迫(干旱,高温,低温,盐)和脱落酸(ABA)、生长素(IAA)、赤霉素(GA_(3))三种激素诱导下的StSUS表达模式进行了分析。结果表明,马铃薯SUS家族编码氨基酸长度为803~892个aa,分子量介于92 607.56~100 746.25 kD之间,等电点在5.91~6.95之间。其亚细胞定位预测在叶绿体,染色体定位分别分布于2、3、7、9和12号染色体上。与禾本科水稻和玉米的亲缘关系较近,且马铃薯SUS家族蛋白序列具有高度保守性。主要有干旱、低温、激素响应元件。RT-qPCR分析结果表明蔗糖合酶基因可能参与干旱、低温胁迫调控的途径,受到激素的诱导上调或下调,可推论蔗糖合酶也参与激素调控途径。本研究结果可为马铃薯SUS功能解析和在逆境中调控蔗糖代谢途径的改造提供基础参考。
- 严荣王芳王芳
- 关键词：马铃薯蔗糖合酶非生物胁迫激素诱导
- StSRK2E-like基因的序列分析及表达载体构建
- 2022年
- SnRK2作为脱落酸(abscisic acid,ABA)信号转导途径的关键因子,对应答非生物胁迫防御机制的形成具有重要作用。为验证马铃薯SnRK2s的功能,本试验以‘青薯9号’为材料,利用RT-PCR对SnRK2家族中的StSRK2E-like基因进行克隆。序列分析显示,该基因CDS序列为1089 bp,编码蛋白全长为362 aa,相对分子质量为41.06 kD,脂溶指数为89.67,亲水指数为-0.321,为亲水性蛋白;进化分析显示该基因与番茄中同源基因的亲缘关系最近,相似性高达98.44%;该基因上游2000 bp启动子序列中除了含有TATA-box和CAAT-box核心元件,还含有干旱相关元件(MBS)及激素响应元件(TCA-element,ABRE,TGA-element),推测该基因参与干旱和激素胁迫应答。用RT-qPCR定量检测不同干旱胁迫时间下马铃薯根、茎和叶中StSRK2E-like基因表达水平。结果显示:StSRK2E-like基因在胁迫处理下的表达量显著低于对照,该结果表示该基因对干旱胁迫敏感;且随胁迫时间增加,对照组茎和叶中StSRK2E-like基因的表达量下调显著,胁迫组叶中下调显著(P<0.05),推测该基因在马铃薯抵御干旱胁迫过程中扮演着重要角色。StSRK2E-like基因的具体功能需要进一步研究。本试验成功构建pJAM1502-StSRK2E-like表达载体,为后续进行StSRK2E-like基因的功能验证提供试验基础。
- 冯月娟李荣王芳
- 关键词：马铃薯干旱胁迫
- 马铃薯StWRKY40基因的序列及表达模式分析被引量：3
- 2020年
- WRKY转录因子是植物重要的调节因子,在植物逆境生长过程中起着关键的作用。为探究马铃薯WRKY转录因子在非生物胁迫下的调控作用,本研究以‘青薯9号’为试验材料,基于RT-PCR技术获取StWRKY40基因序列,利用DNAMAN、MEGA 7.0、ExPASy-ProtParam Tool等软件对其进行序列分析,通过QRT-PCR技术分析干旱胁迫(10%PEG-8 000)和盐胁迫(NaCl浓度为150 mmol/L)下该基因的表达模式。结果表明:StWRKY40的全长序列为1 713 bp,CDS序列为1 083 bp,该基因编码蛋白全长为360 aa,相对分子质量为39.79 kD,脂溶指数为64.72,理论等电点为8.37。其平均亲水系数为-0.698,说明StWRKY40基因编码的蛋白表现为亲水性。StWRKY40与番茄WRKY40的亲缘关系最近,相似性为94.16%。StWRKY40启动子除含有常见的CAAT-box顺式元件,还含有胁迫应答元件(TC-rich repeats)和干旱胁迫响应元件(DRE core)。QRT-PCR结果表明:盐胁迫4 d时,茎中的表达量最高,为对照的19.54倍;干旱胁迫8 d时,叶中的表达量最高,为对照的5.7倍。利用Gateway技术成功构建pJAM1502-StWRKY40表达载体。本研究为深入研究马铃薯WRKY基因的功能提供了理论基础,同时在提高马铃薯抗逆性能力和分子育种方面提供了一定的参考依据。
- 杨振红王芳王芳
- 关键词：WRKY转录因子逆境胁迫
- 紫色马铃薯花青素StAN1基因的克隆及功能分析被引量：7
- 2019年
- MYB是植物花青素合成代谢途径中最主要的转录因子。该研究以紫色马铃薯B-5为试验材料,通过同源克隆技术,克隆了马铃薯花青素StAN1基因,并对StAN1基因的表达、遗传转化及其转基因烟草的花青素含量进行分析。结果表明:(1)StAN1基因全长774bp,编码了258个氨基酸;系统进化树分析发现,StAN1与辣椒、茄子、芦竹的亲缘关系最近,与矮牵牛、苹果等的亲缘关系最远。(2)荧光定量PCR分析显示,StAN1基因在马铃薯不同组织均有表达,其表达量从小到大依次为:根<叶<茎<匍匐茎<薯皮<薯肉。(3)成功构建了表达载体pJAM1502-AN1,并经农杆菌(Gv3101)转化获得根、茎、叶片及叶脉均为紫红色的转StAN1基因烟草,PCR鉴定表明目的基因StAN1已成功转入烟草中。(4)花青素含量分析表明,野生型烟草叶片中花青素含量为2mg/g,叶片颜色为绿色,而转StAN1基因烟草叶片花青素含量达20mg/g,叶片颜色变成了紫红色。
- 贾羊毛加王芳王芳王舰
- 关键词：紫色马铃薯功能分析
- 干旱胁迫对马铃薯生理特性及解剖结构的影响被引量：6
- 2021年
- 通过研究不同土壤含水量条件下马铃薯的植物学性状、生理指标和显微指标等,探讨马铃薯在干旱胁迫下的抗旱反应和抗旱生理机制。试验用‘青薯9号’和‘闽薯1号’2个品种,以T0(CK)适宜水分(土壤相对含水量为70%~75%)为对照、其他土壤含水量分别为55%~60%(T1)、40%~45%(T2)、25%~30%(T3)和出苗后不再浇水(T4)等水分胁迫处理下,分析其植物学性状、生理指标和显微指标。试验结果:(1)水分胁迫对2个马铃薯品种的植物学性状(株高、茎粗、地上部分鲜重、地上部分干重、叶面积、根的鲜重、根的干重和根长)均有显著影响,随着土壤含水量的降低,‘青薯9号’和‘闽薯1号’2个品种的上述性状指标均有降低趋势,其中‘青薯9号’的株高、地上部分鲜重、地上部分干重、根的鲜重、干重和根长均大于‘闽薯1号’。(2)生理指标分析表明:在T2~T4水分胁迫下,马铃薯的脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)等含量与对照T0相比有极显著差异(P<0.01);(3)显微结构分析表明:叶片的上表皮厚度、下表皮厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度和栅海比均受到水分胁迫影响。该试验为马铃薯的抗旱栽培和育种提供了理论依据。
- 郑植尹王芳
- 关键词：马铃薯干旱胁迫生物学性状生理生化显微结构
- 马铃薯StWRKY15在转基因烟草的耐寒性分析被引量：3
- 2021年
- WRKY转录因子在植物的正常生长发育以及逆境生长过程中起着重要作用。本研究以4℃作为低温胁迫水平,对‘青薯9号’马铃薯组培苗进行胁迫处理。通过RT-qPCR技术对马铃薯的5个WRKY转录因子基因进行表达分析,筛选出对低温响应的基因,构建表达载体遗传转化烟草,初步分析基因的功能。结果显示,4℃低温胁迫下,马铃薯中的StWRKY15基因上调显著(P<0.05);STRING预测分析StWRKY15编码蛋白的互作蛋白,主要包括StWRKY72编码蛋白、StGRAS6编码蛋白、c2结构域QUIRKY蛋白;通过双酶切方法成功获得重组质粒PRI101-StWRKY15;冻融法介导转化烟草,过表达StWRKY15基因显著提高了转基因烟草的耐寒性。4℃低温胁迫下,StWRKY15基因的过表达明显增加了脯氨酸、可溶性糖及总蛋白含量,降低了丙二醛含量;胁迫10 d时,转基因烟草的长势优于野生型烟草。综上所述,可推断出StWRKY15对低温胁迫有响应,在逆境胁迫下可减轻植株受到的损伤,在一定范围内增强转基因烟草的耐寒性。本研究为进一步了解马铃薯WRKY转录因子的功能提供了理论依据。
- 冯月娟杨振红王芳
- 关键词：马铃薯WRKY转录因子生物信息学分析低温胁迫
