刘毅
- 作品数：13 被引量：50H指数：5
- 供职机构：南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家技术创新计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：化学工程理学生物学轻工技术与工程更多>>
- 微波辐射下L-氨基酸的快速消旋方法被引量：5
- 2005年
- 微波辐射作用下的L氨基酸消旋反应是一种新的氨基酸消旋方法,具有对环境友好的优点。本文报道了在微波辐射下,以1.0molL氢氧化钠水溶液替代有机酸作为反应溶剂,水杨醛为催化剂,水杨醛与L氨基酸的摩尔比为0.1,L-氨基酸可以快速消旋;消旋反应随微波辐射功率的提高而加快,在600W时已接近最大反应速率。同时也讨论了微波作用下L-氨基酸的消旋反应机理。
- 刘毅郭丽芸吴晓燕焦庆才
- 关键词：D-氨基酸消旋
- 赖氨酸脱羧酶发酵工艺及酶学性质被引量：12
- 2006年
- 考察了蜂房哈夫尼菌(H.alveiAS1.1009)的L-赖氨酸脱羧酶对L-赖氨酸的脱羧作用,分析了培养基、温度、pH、激活剂等因素对酶活力的影响。实验结果表明,最适培养基成分为:ρ(蔗糖)=20 g/L、ρ(玉米浆)=20g/L、ρ(酵母膏)=5 g/L、ρ(牛肉膏)=3 g/L、ρ(蛋白胨)=10 g/L、ρ(氯化钠)=5 g/L、ρ(硫酸铵)=2 g/L、ρ(维生素B6)=5 g/L和ρ(L-赖氨酸)=5 g/L,100 mL发酵液中接种量为5 mL液体菌种。最佳转化工艺条件为:转化体系温度35℃、pH=5.0,ρ(菌体)=10 g/L,ρ(吐温-80)=0.15 g/L。L-赖氨酸脱羧酶在最适发酵和转化条件下比酶活可达7 984.43 U,底物转化率可达70%。
- 蒋丽丽吴晓燕刘毅刘茜焦庆才
- 关键词：L-赖氨酸发酵工艺
- D-谷氨酰胺的制备被引量：4
- 2006年
- 报道了以化学合成和生物转化的方法制备光学纯D-谷氨酰胺.首先在中试规模上用化学方法合成DL-谷氨酰胺.即以廉价的DL-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流15min,使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2mol/L氨水反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酰胺,中间产物在室温条件下与0.5mol/L水合肼反应48h脱除保护基,以57%总收率得到DL-谷氨酰胺.在37℃,pH4.8的条件下,利用大肠杆菌(E.coli.AS1.505)脱羧酶将底物浓度30g/L的DL-谷氨酰胺中L型对映体在8h内完全转化为4-氨基丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺.
- 钱绍松吴晓燕李加友刘毅陈然焦庆才
- 关键词：脱羧酶
- 中试规模制备L-茶氨酸及其衍生物被引量：9
- 2005年
- 报道了中试规模制备L-茶氨酸和L-谷氨酰胺的一种方法。以廉价的L-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基,保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流10 m in使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2 mol/L氨水和2 mol/L乙胺水溶液反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-L-谷氨酰胺、N-邻苯二甲酰-L-茶氨酸,中间产物在室温条件下与0.5 mol/L水合肼反应48 h脱除保护基,分别以57%、61%的收率得到L-谷氨酰胺和L-茶氨酸。
- 钱绍松陈然刘毅吴晓燕李加友焦庆才
- 关键词：L-谷氨酰胺L-谷氨酸
- 巨大芽孢杆菌酶法转化制备D-苯丙氨酸被引量：1
- 2006年
- 以DL-苯丙氨酸为底物,利用巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）AS1.127苯丙氨酸脱氨酶光学异构选择性,仅对L-苯丙氨酸专一氧化脱氨,而不作用于D型,从而高效制备D-苯丙氨酸.考察了影响酶促反应的几种因素,得到了最佳酶促反应条件,结果表明,该转化反应最适温度37～40℃.最适pH 5.8,0.2%磷酸缓冲液可提高脱氨酶活力,在反应液中加入表面活性剂0.2%吐温-80或10^-5mol/L K＋能显著提高脱氨酶活力.转化率与底物浓度、菌体用量有关,在此反应体系中,底物DL-苯丙氨酸浓度0.09mol/L,菌体用量0.03g/mL,转化时间18 h,L-苯丙氨酸转化率最高达98%以上.转化液经脱色、减压浓缩和等电点结晶后得D-苯丙氨酸,比旋光为[α]20D=＋32.4°,光学纯度达到95%以上.
- 贾晓娟郭丽芸刘毅焦庆才
- 关键词：D-苯丙氨酸DL-苯丙氨酸酶转化
- 精氨酸脱亚胺酶发酵条件研究被引量：5
- 2006年
- 对一种新型肿瘤增殖抑制酶类一精氨酸脱亚胺酶的发酵生产工艺进行了研究。运用单因子扫描方法，考察了不同碳源、氮源等影响因子对粪肠球菌（Enterococcus faecalis）NJ402产精氨酸脱亚胺酶的影响。优选出其较佳培养基组分为（g／L）；蔗糖15，蛋白胨5，酵母膏5，牛肉膏2．5，NaCl3，KH2PO42，MgSO40．01，MnSO40．0025，L-精氨酸15；接种量以4％～5％为宜，最佳培养温度是37℃，最适起始pH为7．5。100L发酵罐实验表明，发酵到10h时，菌量与比酶活量均为最大，分别为40mg／mL和2．57U／mL。
- 李加友曹瑜钱绍松刘毅刘茜焦庆才
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶粪肠球菌发酵
- 生物转化制备D-谷氨酰胺的研究
- 2005年
- 报道了制备D-谷氨酰胺的一种新方法,即利用大肠杆菌AS1.505的L-谷氨酰胺脱羧酶立体选择性地将D,L-谷氨酰胺中L型对映体降解为4-氨基-丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺。同时考察了转化体系温度、pH等因素对L-谷氨酰胺脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳条件为:温度37℃,转化体系pH=4.8,菌体质量浓度5 g/L,吐温-80质量浓度0.15 g/L,菌龄14 h,底物质量浓度40 g/L。L-谷氨酰胺脱羧酶在最适转化条件下比酶活可以达到4 200 U,L-谷氨酰胺在8 h内完全转化成4-氨基-丁酰胺,D-谷氨酰胺收率达到理论收率的92%。
- 钱绍松吴晓燕刘毅陈然李加友焦庆才
- 关键词：酶法转化
- 化学生物耦合法制备D-赖氨酸被引量：4
- 2007年
- L-赖氨酸经化学消旋反应后,应用蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)AS1.1009对其进行生物转化,可制备D-赖氨酸,理论收率为56.6%。确定了在100℃下,以1.0mol/L氢氧化钠水溶液,用0.10摩尔比的水杨醛催化L-赖氨酸在4h内消旋,反应活化能为62187.86J/mol;对生物转化中赖氨酸脱羧酶性质研究结果表明该酶最适pH为8.0,最适温度为37℃,吐温-80质量浓度0.5g/L,菌体质量浓度10g/L,底物质量浓度为30g/L时,最高比酶活为3840U。在此优化条件下转化时间为12h。
- 刘毅刘毅焦庆才
- 关键词：脱羧酶消旋生物转化
- 刺孢小克银汉霉9980生物酶法制备D苯丙氨酸被引量：1
- 2005年
- 筛选到一株产氨基酰化酶的真菌刺孢小克银汉霉9980,直接利用其菌体细胞拆分N乙酰DL苯丙氨酸,最终制得D苯丙氨酸。最适反应条件为:0.2mol/LN乙酰DL苯丙氨酸(含Co2+5×10-4mol/L),0.04g/mL菌体,在pH值为7.0、50℃条件下反应24h,拆分率达90%以上。产物经JK008阳离子交换树脂分离。N乙酰D苯丙氨酸经6mol/LHCl加热回流4h脱乙酰得D苯丙氨酸。DPhe[α]20D=+34.4°(水溶)。
- 郭丽芸刘毅贾晓娟李兆兰焦庆才
- 关键词：D-苯丙氨酸氨基酰化酶光学拆分
- 苯丙氨酸脱氨酶发酵工艺及其酶学性质研究被引量：4
- 2005年
- 选育出一株具有较高苯丙氨酸脱氨酶活性的菌株巨大芽孢杆菌AS1.127-NJU10。考察了该菌的发酵产酶条件,结果表明:蔗糖为最佳碳源、酵母浸膏和NH4C l组成最佳氮源,其质量浓度分别为:ρ(蔗糖)=20 g/L,ρ(酵母浸膏)=2 g/L和ρ(NH4C l)=10 g/L;发酵培养基最适pH=6.5,培养温度为37℃;诱导物ρ(L-苯丙氨酸)=1 g/L时,酶活最高达1 070 U。同时对苯丙氨酸脱氨酶的性质进行了研究,结果表明:该酶最适pH=5.8,最适温度为40℃,反应液中添加φ(吐温-80)=0.2%和c(K+)=10-5mol/L能明显提高酶活。
- 贾晓娟郭丽芸刘毅焦庆才
- 关键词：发酵
