张伟 作品数:42 被引量:112 H指数:6 供职机构: 新疆农业职业技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486靶基因的研究 2021年 【目的】为了深入挖掘巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486的靶基因,为最终阐明巴什拜羊优良肉质性状形成的分子调控机制奠定基础,同时为巴什拜羊的持续选育提供理论依据。【方法】分别采集了巴什拜羊胎儿期40,50,60,80,100和120 d,以及出生当天,出生后30,60和90 d共计10个不同发育阶段的骨骼肌组织,分别利用胎儿期6个阶段的混合mRNA和出生后4个阶段的混合mRNA构建了胎儿期和出生后骨骼肌中miR-486调控靶基因的cDNA文库,并利用高通量测序技术对cDNA文库中的靶基因信息进行了深入挖掘。在对所得候选靶基因功能分析的基础上,选择10个候选靶基因,使用qRT-PCR检测其在巴什拜羊上述10个不同发育阶段骨骼肌中表达量的变化,结合课题组前期获得的miR-486在巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中的表达规律,对其靶向调控关系及生物学功能进行初步验证和分析。进而选择其中的4个候选靶基因使用荧光素酶报告载体试验和巴什拜羊骨骼肌卫星细胞中的靶向调控试验最终确认其靶向调控关系。【结果】通过对两个cDNA文库高通量测序数据的分析,胎儿期和出生后分别获得了123个和118个miR-486的靶基因,因其靶向调控关系未经实验验证,故暂称为候选靶基因。其中有96个为两个阶段共表达的候选靶基因,其余27个和22个分别为胎儿期和出生后骨骼肌中特异表达的候选靶基因。GO和KEGG分析结果表明所得候选靶基因显著富集于与肌肉分化和肌纤维发育相关的代谢和信号转导通路,诸如PI3k-Akt、MAPK、Wnt、Adherens junction和Regulation of actin cytoskeleton等。qRT-PCR检测结果表明所选10个候选靶基因在不同发育阶段巴什拜羊骨骼肌中均有表达,但其表达变化规律有所不同。PTEN、Foxo1、Dock3、PAX7、IGF1R、PIK3I1和FBN1在胎儿期巴什拜羊骨骼肌中呈高表达,出生后其表达量显著下调,而OLFM4的表达量则� 张伟 张伟 王世银 高莉 杨力伟 邓双义 刘晓娜 石国庆关键词:巴什拜羊 靶基因 骨骼肌 CDNA文库 基于项目化教学的高职畜禽场环境控制课程改革与实践 被引量:1 2019年 项目化教学的思想很好地契合了我国高等职业教育的现实需求,近年来在我国高职院校得到了迅速推广,并取得了很好的效果。笔者在前期实践的基础上,以畜禽场环境控制课程为例,从项目化教学课程实施的先决条件、设计理念和思路、教学设计以及效果评价四个方面对该课程项目化教学的实施情况进行了总结,以期促进项目化教学的开展,提高高等职业教育水平,培养出高素质的技能型人才。 张伟 王世银 杨力伟 李桉关键词:项目化教学 高等职业教育 一种高效猪精液冷冻和解冻稀释液及其制备方法和应用 本发明涉及家畜精液冷冻保存技术领域,具体涉及一种高效猪精液冷冻和解冻稀释液及其制备方法和应用。一种高效猪精液冷冻和解冻稀释液,由以下原料制备而成:葡萄糖、柠檬酸三钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠、三羟甲基氨基甲烷、青霉素和链... 张伟 王世银 邓双义 赵永旭 郭庆河 杨力伟 刘晓娜 宁程程 高家良 冯凯 崔炳灿oar-miR-133的表达对巴什拜羊骨骼肌细胞增殖和分化的影响 被引量:3 2019年 以巴什拜羊为对象,初步研究oar-miR-133的表达与巴什拜羊骨骼肌发育的关系。结果表明,oar-miR-133在巴什拜羊胎儿期第100天的骨骼肌和心肌中高表达;在巴什拜羊骨骼肌发育的不同阶段,oar-miR-133的表达量有明显的变化,在胎儿期的第100天和初生当天前后,骨骼肌中oar-miR-133的表达量均出现上调;当巴什拜羊骨骼肌卫星细胞处于增殖状态时,oar-miR-133表达量较低,而当骨骼肌卫星细胞处于诱导分化状态时,oar-miR-133表达量迅速升高,显著高于增殖状态(P<0.05);当骨骼肌卫星细胞中的oar-miR-133表达水平升高时,骨骼肌卫星细胞几乎停止增殖,细胞有相互融合转化为肌管的趋势,同时细胞内可检测到细胞分化的标志基因MyHC基因的表达;生物信息学分析共预测到96个oar-miR-133的靶基因,GO分析及KEGG信号通路分析结果表明,这些基因在细胞内通过参与一些重要的信号通路而发挥其生物学功能。 张伟 王世银 邓双义 石国庆关键词:巴什拜羊 骨骼肌 卫星细胞 增殖 分化 一种细菌耐药性检测用存储装置 本实用新型公开了一种细菌耐药性检测用存储装置,涉及细菌储存技术领域,第一外壳上部表面设有若干列的呈皿台,每一列的呈皿台下部均设有转盘,转盘下部设有固皿壳,固皿壳内部设有若干个通孔,转盘上设有与通孔相配合的若干弧形孔,通孔... 王世银 宁程程 杨力伟 冯凯 田路路 武晔晖 郭旭川 张伟阿勒泰羊PLA2G16基因多态性检测及其对蛋白质高级结构影响的分析 2015年 本研究以脂肪沉积能力超强的阿勒泰羊为研究对象,探究绵羊PLA2G16基因多态性并分析其对氨基酸序列和蛋白高级结构的影响,为后续深入研究该基因在绵羊脂肪代谢中的作用机制奠定基础。采用PCR—SSCP技术对阿勒泰羊PLA2G16基因第4外显子的多态性进行了检测,并分析了氨基酸序列和高级结构的变化特征。结果表明,阿勒泰羊PLA2G16基因第4外显子处存在一个G〉A突变,该突变使原来的密码子GAG变为AAG,从而使PLA2G16蛋白第111位的氨基酸残基由谷氨酸变为赖氨酸.蛋白质高级结构预测软件显示该突变可以引起蛋白结构的变化,这可能影响其正常的生物学功能。该结果为进一步探讨PLA2G16基因在阿勒泰羊脂肪代谢中的作用机制,培养低脂肪绵羊品种积淀了数据基础。 王世银 张伟 张伟 赵伟利 刘守仁 沈敏 周平 高磊 杨井泉关键词:阿勒泰羊 SNP 脂肪沉积 巴什拜羊骨骼肌卫星细胞分离培养及诱导分化 被引量:5 2019年 为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。 张伟 张伟 王世银 邓双义 杨力伟 刘晓娜关键词:巴什拜羊 骨骼肌 卫星细胞 诱导分化 增殖能力 Kisspeptins/GPR54神经内分泌系统对哺乳动物生殖活动的调控 被引量:7 2014年 哺乳动物的生殖活动受到神经内分泌系统的精确调控。近年来的研究表明,KISS-1基因的表达产物Kisspeptins及其G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor 54,GPR54)在这一调控网络中发挥着重要作用,与哺乳动物青春期启动、发情排卵及季节性繁殖等过程密切相关。该文就近年来Kisspeptins/GPR54系统对哺乳动物生殖活动调控的研究进展进行简述。 张伟 张伟 张伟 王世银关键词:GPR54 KISS-1 生殖调控 绵羊X染色体59194976位点多态分析及其与尾(臀)脂性状相关性研究 被引量:6 2013年 尾脂沉积能力在脂尾型绵羊和瘦尾型绵羊间存在很大的差异,但其沉积脂肪的遗传特性与分子机制仍不明晰。为此,本研究选择尾型极端差异的阿勒泰羊(巨型脂臀)、湖羊(短脂尾)和黑萨福克羊(长瘦尾),采用PCR-RFLP方法检测绵羊X染色体59194976位点多态性,分析其与尾(臀)脂沉积能力的相关性。结果表明:在阿勒泰羊群体中G等位基因属优势等位基因,其两等位基因比值(G/A)分别是湖羊和黑萨福克羊的6倍和68倍,且G等位基因在阿勒泰羊中趋于纯合。卡方检验结果表明,阿勒泰羊在该位点均处于HardyWeinberg平衡状态(p>0.05),而湖羊和黑萨福克羊在该位点均处于Hardy-Weinberg极不平衡状态(p<0.01)。以上结果提示,绵羊X染色体59194976位点SNP可作为理想的分子标记应用于高、低脂绵羊品种选育。 王世银 张伟 张伟 张伟 沈敏 李欢 梁耀伟 杨井泉 高磊关键词:等位基因 基因型 分子标记 绵羊肌内前体脂肪细胞特异性分子标记、筛选方法及其应用 本发明涉及分子标记技术领域,具体涉及一种绵羊肌内前体脂肪特异性分子标记、筛选方法及其应用,该标记为ENSOARG00000019070基因,所述ENSOARG00000019070基因的cDNA序列如SEQ ID NO.... 张伟 王世银 邓双义 高莉 赵永旭 郭庆河 宁程程 杨力伟 刘晓娜 高家良