张华
- 作品数：7 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家攀登计划中国医学科学院基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氧化低密度脂蛋白诱导人载脂蛋白AI转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 为研究人载脂蛋白AI(h ApoA I)抗氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所导致的平滑肌细胞增生及脂质浸润的分子机制 ,克隆并分析可明显抑制动脉内膜脂质沉积和粥样斑块形成的h apoA I转基因小鼠血管平滑肌细胞 (vSMC)抗ox LDL所致AS过程中表达的相关基因。方法 以ox LDL为刺激物作用于培养的转基因小鼠vSMC ,应用抑制性差减杂交方法构建减除文库 ,筛选、克隆差异表达基因 ,并进行序列测定及同源性比较。同时用SMART技术构建了ox LDL诱导的转基因小鼠vSMC全长噬菌体文库。结果 从 5 7个差异克隆中随机选取 15个克隆测序并分析 ,得到 3个表达序列标签 (EST) ,均为与免疫系统有关的功能基因片段 ,即 :补体C1 抑制物 (C1 INH)、植物凝集素及T细胞受体 β(TCRβ)。有明显抗内膜脂质沉积能力的h apoA I转基因小鼠的vSMC在被ox LDL诱导后 ,筛选出的 3个EST均与免疫系统有关 ,其中C1 INH及植物凝集素与补体系统密切相关。结论 ox LDL致AS及h ApoA I抗AS可能有免疫机制参与 ,且与补体活化及其调控密切相关。其中C1 INH作为抗AS的潜在靶点值得关注。
- 于淼谷素敏周礼赵高峰余立清张华佘铭鹏
- 关键词：氧化低密度脂蛋白载脂蛋白AI转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因
- 载脂蛋白AⅠ基因启动子G/A置换多态性和饮酒的联合作用对凉山地区彝汉人群血浆载脂蛋白AⅠ水平的影响被引量：1
- 2000年
- 目的 探讨载脂蛋白AⅠ (apoAⅠ )启动子 - 75bp处G/A嘌呤置换和少量饮酒对凉山地区彝族及汉族人群血浆载脂蛋白AⅠ水平的影响。方法 现场调查随机抽样 742名凉山州 15周岁以上彝汉健康居民 ,包括 3个人群样本 :彝族农民、彝族移民、汉族居民。根据饮酒折合的乙醇量将两民族人群分为 4组 :不饮酒者、1～ 2 5g/d的饮酒者、2 6～ 75g/d的饮酒者、75g/d以上的饮酒者。采集每人清晨空腹血样 10ml作有关血脂和脂蛋白水平测定。此外 ,还自冷冻血凝块中抽提基因组DNA ,经PCR扩增 ,进行片段长度多态性分析。结果 随饮酒量的一定增加 ,血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL C)和apoAⅠ水平呈轻度升高。在彝族农民样本和汉族居民样本中差异有非常显著性意义。 3组人群样本间的A等位基因频率相似。在A等位基因携带者和GG基因型携带者的各项血脂水平间差异未见显著性意义。但在不饮酒人群中 ,A等位基因携带者的apoAⅠ水平明显高于GG基因型携带者 ;在饮酒人群中 ,A等位基因携带者的apoAⅠ和HDL C水平明显低于GG基因型携带者 ,这一差异在城镇居民中有显著性意义 (P <0 .0 5 )。在不饮酒的人群中 ,G/A置换可以解释 18%的个体间apoAⅠ水平变异 (F =8.94,P <0 .0 1)。结论 适量饮用低度酒
- 赵庆伟申萍张华周梦玲佘铭鹏
- 关键词：载脂蛋白AI启动子
- 反义大鼠凝血酶受体基因的构建及其对主动脉血管平滑肌细胞增生的影响被引量：6
- 2000年
- 凝血酶激活凝血酶受体引起的一系列细胞事件和内源性PDGF-A，bFGF的产生可能是血管病变发生发展过程中平滑肌细胞增生的重要因素。为进一步阐明血管损伤后平滑肌细胞增生的机理及探索有效治疗途径，针对凝血酶受体基因中一段包括转录起始点，翻译起始点，凝血酶结合和切割位点的序列作为靶序列，构建了凝血酶受体反义RNA重组表达载体pLXSN／ATR，并将其导入凝血酶刺激的动脉平滑肌细胞。结果表明重组基因转染能抑制凝血酶对大鼠平滑肌细胞DNA合成的刺激作用。提示序列特异的凝血酶受体反义重组基因的表达可以抑制凝血酶受体介导的血管平滑肌细胞增生。
- 任国锋王宗立李拥军许漫赵三妹刘佩毛张华佘铭鹏
- 关键词：凝血酶受体反义RNA再狭窄平滑肌细胞增生
- 表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响被引量：12
- 1999年
- 为研究反义单核细胞趋化蛋白－１ 转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用，首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－ １ 基因的逆转录病毒重组体，并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－ １ ｃＤＮＡ 反向插入到ｐＬＮＣＸ，构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ ＭＣＰ－１ 重组病毒质粒。再将重组质粒转染φ－２ 细胞，继以φ－ ２ 细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞，取得Ｇ４１８ＰＡ３１７ 抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养，收集病毒上清并感染ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞后进行检测。结果发现，病毒的滴度为５．６×１０７ ＣＦＵＬ，感染的ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中有重组病毒的整合。重组病毒感染培养的家兔动脉平滑肌细胞后，用聚合酶链反应检测发现，感染的平滑肌细胞基因组ＤＮＡ中有重组病毒整合；ＲＮＡｓｌｏｔ 杂交结果显示，感染的平滑肌细胞中有反义单核细胞趋化蛋白－１ 的表达，与未感染的平滑肌细胞相比，感染的平滑肌细胞中单核细胞趋化蛋白－ １ ｍＲＮＡ 的表达明显受到抑制。结果提示，反义单核细胞趋化蛋白－ １ 逆转录病毒表达载体在培养的动脉平滑肌中能表达反义基因并抑制靶基因的表达。
- 李福生王宗立许漫乔绘红刘佩毛张华任国锋赵三妹佘铭鹏
- 关键词：MCP-1反义RNA逆转录病毒
- 血浆高密度脂蛋白对内皮祖细胞生长特性的影响
- 目的冠心病的多种危险因素可影响内皮祖细胞的增殖和分化,本文主要研究血浆高密度脂蛋白（HDL）对脐血内皮祖细胞（EPCs） 生物学特性的影响。方法应用密度梯度离心法从人脐带血中分离单个核细胞,接种于M200培养基。经VEG...
- 张秋华尹洪超张俊华刘佩毛张华佘铭鹏
- 关键词：高密度脂蛋白内皮祖细胞
- 文献传递
- 凉山彝族血脂状况及其载脂蛋白AI基因启动子嘌呤置换突变限制片段长度多态性研究被引量：10
- 1999年
- 为探讨凉山彝族农民血脂水平与心血管病发生率低的原因，通过流行病学调查采集６９１份（人）血样，确定彝族农民、彝族移民、当地城市汉族居民三组人群的各项血脂水平，并探讨载脂蛋白基因多态性在人群血脂水平变异中的作用。方法血脂测定、从凝血块中分离ＤＮＡ、ＤＮＡ聚合酶链式反应一限制片段长度多态性分析。结果（１）彝族农民各项血脂（ＴＣ、ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＢ）水平显著低于彝族移民和汉族居民（Ｐ＜０．０１）。（２）彝族移民与当地汉族居民间，除ＨＤＬ－Ｃ外的各项血脂水平相当，彝族移民的ＨＤＬ－Ｃ水平明显低于汉族居民（Ｐ＜０．０５）。（３）ａｐｏＡＩ基因启动子Ｇ／Ａ置换多态性分析显示，彝族农民、彝族移民和汉族居民三组人群的Ａ等位基因相对频率分别为０．２３、０．２４、０．２３，差异无显著性，与新加坡华人的相对频率０．２７５相近，均显著高于高加索人。（４）各组人群内，ＧＧ基因型者与ＧＡ和ＡＡ基因型者的各项血脂水平差异均无显著性。结论结果提示，（１）在现阶段，彝族农民各项血脂处于低水平，可能主要归因于饮食等环境因素，生活水平提高脂肪摄入增加会导致群体血脂水平升高；（２）中国人的Ａ等位基因频率显著高于高加索人，各民族间?
- 赵庆伟申萍张华周梦玲佘铭鹏
- 关键词：血脂载脂蛋白彝族
- 饮酒和载脂蛋白AI基因启动子-75bp处G/A置换对凉山彝汉两民族血浆载脂蛋白AI水平的影响(英文)
- 1999年
- 目的：研究载脂蛋白AI启动子-75bP处G／A嘌呤置换以及饮酒对凉山彝族汉两民族血浆载脂蛋白AI水平的影响。方法：现场调查中随机抽样742名凉山州彝汉健康居民，包括三个人群样本：彝族农民、彝族移民、和汉族居民。采集清晨空腹血样10ml／人。全项血脂和脂蛋白水平测定。从冷藏血凝块中抽提基因组DNA，经PCR扩增，进行片段长度多态性分析。结果：根据饮酒量将人群分为四组：不饮酒者、1－25克／天饮酒者、26－75克／天饮酒者、75克／天以上饮酒者。结果显示，随着饮酒量的增加，血浆HDLC和apoAI水平逐渐升高，在彝族农民样本和汉民样本中有非常显著的统计学意义。三人群样本间的A等位基因频率相似。A等位基因携带者与GG基因型携带者之间的各项血脂水平没有显示出差异。但在不饮酒者中，A等位基因携带者的apoAI水平明显高于GG基因型携带者；而饮酒者中，A等位基因携带者的apoAI和HDLC水平明显低于GG基因型携带者，上述差异在城镇人群中显示出统计学意义（P＜0．05）。不饮酒者中，G／A置换可以解释18％的个体间apoAI水平变异（F＝8．94，P＜0．01）。结论：结果表明，适量的饮酒和apoAI基因-75处G／A置换多态性均可使冠心病危险降低，但A等位基因的这种有益作用可能被饮酒抵消。
- 赵庆伟佘铭鹏申萍张华周梦玲
- 关键词：饮酒载脂蛋白AI启动子多态性彝族汉族
