吴清华
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：第一军医大学更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基因芯片中60mer寡核苷酸SARS冠状病毒探针的制备被引量：9
- 2003年
- 目的 用合成仪合成60mer寡核苷酸SARS冠状病毒的探针来制作寡核苷酸基因芯片。方法 根据寡核苷酸探针的制作要求,选取SARS冠状病毒的特异序列30条、长度为60mer的片段进行合成,并对合成后的纯化方法与条件进行探索。将经12％变性PAG胶纯化后的探针直接点样制备成12×12阵列的寡核苷酸的基因芯片,初步与处理后的临床样品进行杂交。结果 经PAGE纯化的寡核苷酸探针的纯度高,能满足寡核苷酸芯片制备的要求。临床SABS患者标本进行处理后与寡核苷酸芯片杂交、扫描检测,效果较好。结论 该室合成的60mer的寡核苷酸SARS冠状病毒探针能用于基因芯片的制备与检测,这为该疾病的实验室诊断提供了一种快速、平行的检测方法。
- 广东省防治非典型肺炎科技攻关病原分离专题组吴清华马文丽石嵘郭秋野张宝宋艳斌郑文岭
- 关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒寡核苷酸探针基因芯片
- SARS冠状病毒检测60mer寡核苷酸基因芯片的设计及应用
- 2003年
- 目的 设计并应用60 mer寡核苷酸基因芯片实现对SARS冠状病毒的检测。方法 根据寡核苷酸基因芯片的设计原则设计出3O条60mer的寡核苷酸片段,覆盖SARS冠状病毒(以TOR2株为参考序列,GENEBANK索取号:AY274119)全基因组,点样制备成12×12的寡核苷酸基因芯片,将临床诊断SARS患者痰液标本抽提病毒RNA,采用限制性显示技术进行标记,将标记好的样品与芯片杂交,洗脱,扫描。初步探索寡核苷酸芯片诊断SARS冠状病毒的敏感性及特异性,并对芯片做进一步的优化。结果 来自SARS患者样品与芯片上的多个SARS探针杂交,出现了明显的荧光信号;阴性和空白对照探针上没有杂交信号,而对照样品仅与一个SARS探针有杂交。结论 采用60 mer寡核苷酸基因芯片可以从基因水平实现对SARS冠状病毒多段序列的平行检测,对于提高检出率有一定意义,此外,尚可用于监测在发病过程的各个阶段中病毒基因的活动状况。
- 广东省防治非典型肺炎科技攻关病原分离组石嵘马文丽吴清华张宝宋艳斌郭秋野肖维威王艳郑文岭
- 关键词：SARS冠状病毒寡核苷酸基因芯片荧光标记分子杂交
