赵黎黎 作品数:7 被引量:20 H指数:4 供职机构: 东北农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 黑龙江省科技攻关计划 黑龙江省杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
旋毛虫单克隆抗体的制备 赵黎黎关键词:旋毛虫 单克隆抗体 胶体金 猪AMPD1基因的克隆与变异位点分析 被引量:5 2008年 腺苷一磷酸脱氨酶基因(AMPD1)在嘌呤代谢过程中起着重要的作用。AMPD1基因主要在骨骼肌中高水平表达,与肌肉中肌苷酸代谢有关。还发现AMPD1与猪的胴体性状有关。对AMPD1基因CDS进行了克隆、测序,获得2195bp的CDS序列,并利用PCR-SSCP方法对其进行分子扫描,寻找多态位点,分析不同基因型在不同猪种间的分布规律。χ2独立性检验表明,民猪、大白猪、杜洛克间不同基因型的分布存在着极显著的差异(P<0.01)。 刘慧 许尧 赵黎黎 杨秀芹 刘娣关键词:AMPD1基因 胴体性状 PCR-SSCP 旋毛虫53kuES重组蛋白单克隆抗体的制备及其免疫金标试纸条的研制 被引量:5 2012年 为建立一种简易、快速检测动物血清中的旋毛虫排泄分泌(Excretory-secretory,ES)抗原的胶体金免疫层析试纸法,本研究选用旋毛虫53 ku ES重组蛋白免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体(MAb)。利用辛酸-饱和硫酸铵法和亲和层析柱联合法纯化MAb及兔抗旋毛虫53 ku ES多克隆抗体,利用枸橼酸三钠还原法制备的胶体金颗粒标记MAb,制备免疫金标试纸条。结果表明,获得的2株IgG1型杂交瘤细胞系4D10和5A2能够稳定分泌抗体,且效价高;胶体金标记MAb 4D10所制备的试纸条具有重复性好、灵敏性和特异性高的优点;该试纸条4℃条件下可密封保存6个月以上。 赵黎黎 路义鑫 李晓云 扈炳新 宋铭忻关键词:旋毛虫 单克隆抗体 胶体金 小鼠TLE4基因启动子的克隆及核心区的鉴定 TLE4(transducin-like enhancer of split 4 (E(sp1) homolog,Drosophila)基因是断裂4(E(sp1)同源物,果蝇)转导蛋白样增强子,是Groucho共抑制子家... 赵黎黎关键词:基因克隆 胚胎干细胞 文献传递 鸡柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株3-1E基因的重组表达及其表达产物的免疫保护性 被引量:5 2010年 应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株子孢子表面抗原3-1E基因,再克隆至质粒载体pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-3-1E,采用EcoRⅠ+HindⅢ双酶切法及PCR扩增鉴定正确后,将3-1E基因cDNA目的片段亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a-3-1E,用EcoRⅠ+HindⅢ双酶切法及DNA测序证明cDNA序列完全正确。表达蛋白的SDS-PAGE分析表明,表达产物与预期大小(36.47 ku)一致,为可溶性表达。对诱导时间以及IPTG浓度的优化结果表明,当诱导6 h且IPTG浓度在0.8 mmol/L时表达量最大。Western-blot分析表明,表达的蛋白可被感染柔嫩艾美耳球虫鸡的阳性血清特异性识别。将重组3-1E蛋白纯化后分为肌注蛋白组和肌注蛋白加弗氏完全佐剂组免疫AA鸡,通过计算抗球虫指数检测其保护力。结果显示,肌注重组蛋白组与肌注重组蛋白加弗氏完全佐剂组均能刺激鸡体产生一定的免疫反应,对柔嫩艾美耳球虫感染产生有力的保护,其中后者优于前者,表明该重组3-1E蛋白具有研制成亚单位疫苗的潜力。 扈炳新 李微 韩彩霞 赵黎黎 李晓云 宋铭忻关键词:柔嫩艾美耳球虫 3-1E基因 克隆 免疫保护性 小鼠TLE4基因启动子克隆及分析 被引量:5 2010年 本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过双荧光素酶报告活性分析检测TLE4基因启动子区不同长度片段在小鼠畸胎瘤细胞(F9)及小鼠胚胎干细胞(ES)中瞬时转染后的活性。2种细胞的检测结果显示,在TLE4基因启动子区(-2 521 bp^-2 137 bp)存在负性调控元件,而在启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)活性最强。对TLE4基因启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)进一步缺失分析发现在该基因启动区(-2 027 bp^-1 927 bp)活性较强,分析预测该序列含有一个功能性的(HSF)的结合位点。结果推测HSF对TLE4基因的表达调控及功能行使具有重要作用。 赵黎黎 牟玉莲 崔文涛 杨述林 唐中林 李勇 赵为民 刘娣 李奎关键词:启动子 HSF 鸡柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株3-1E基因的重组表达及其表达产物的免疫保护性 应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株子孢子表面抗原3-1E基因,再克隆至质粒载体p MD18-T中,获得重组质粒p MD18-T-3-1E,采用Eco RⅠ+HindⅢ双酶切法及PCR扩增鉴定正确后,将3-1E... 路义鑫 韩彩霞 李晓云 扈炳新 李微 赵黎黎 宋铭忻关键词:柔嫩艾美耳球虫 3-1E基因 克隆 免疫保护性 文献传递