过健俐
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染血管内皮生长因子基因对大鼠任意皮瓣成活的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因对体内转染皮瓣成活的影响。方法 将30只SD大鼠随机均分为pcDNA_3-VEGF_(165)组、pcDNA_3组(两组均为术前48h、术中两次转染)和生理盐水(对照)组,术后7d计算各组大鼠皮瓣的成活面积。对皮肤标本行病理观察,免疫组化染色检测VEGF表达情况。结果 三组大鼠术后皮瓣平均成活率分别为48.46+3.35％、30.20±2.16％、31.35±1.99％,pcDNA_3-VEGF_(165)组显著高于其余两组(P<0.05);免疫组化染色示pcDNA_3-VEGF_(165)组染色深度亦显著深于其余两组(P<0.05)。结论 转染pcDNA_3-VEGF_(165)能够改善任意皮瓣的成活率,并显著表达VEGF_(165)。
- 熊兵易传勋陈华德过健俐张一鸣冯晓玲周文东
- 关键词：血管内皮生长因子基因治疗皮瓣
- 一种血管内皮生长因子变异体的结构与功能的初步探讨
- 2006年
- 目的针对发现的一种血管内皮生长因子变异基因(h′VEGF),利用计算机软件模拟预测其空间结构,并对其功能进行初步探讨。方法将pCD-hVEGF165及pCD-h′VEGF165重组真核表达载体导入CHO细胞,收集培养上清,进行ELISA分析、血管通透性实验(Miles实验)、内皮细胞增殖实验(MTT法)。结果h′VEGF165能使豚鼠的血管通透性增高,并促进ECV-304细胞增殖,但ELISA实验结果显示h′VEGF165与抗hVEGF165单抗未发生抗原抗体反应。结论h′VEGF165与hVEGF165在空间结构上可能存在差异,但现有的实验结果未见两者在功能上的明显差异。
- 王玉田俊过健俐屈伸
- 关键词：变异体血管内皮生长因子
- 血管内皮生长因子基因改善大鼠腹壁下动脉皮瓣成活的实验研究
- 目的通过血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因对腹壁下动脉皮瓣的转染,探讨应用 VEGF 基因对皮瓣成活的影响。方法以 SD 大鼠为实验模型制作腹壁下动脉皮...
- 熊兵易传勋过健俐张一鸣冯晓玲周文东
- 文献传递
- 鼠RanBp17条件性基因打靶载体的构建及同源重组阳性克隆的筛选
- RanBp17基因是由 J W G Janssen 研究小组在克隆两例儿童 ALL 人血样 DNA 染色体重组断裂点 t(5:14)(q34,q11)处基因的过程中发现并克隆的新基因。该基因定位于5q34,含有 28个外...
- 过健俐MartinaDoroteeJWG Janssen
- 文献传递
- 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究被引量：3
- 2005年
- 目的研究获得性肺炎(HAP)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析18例感染产ESBLs肺炎克雷伯菌患者的临床资料,采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验,纸片扩散法作药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为78.3%;仅对亚胺培南、美罗培南敏感;几乎所有患者均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等;SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为72.2%、61.1%和16.7%;44.4%的菌株同时携带多个基因。结论HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重,治疗应首选碳青霉烯类抗生素;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素;最常见的ESBLs基因型是SHV,其次为CTX-M。
- 贾海霞宗义强过健俐田俊
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌药物耐受
- 重叠延伸PCR法构建人肿瘤坏死因子前体水解酶系列突变重组体及稳定转染HeLa细胞株的建立被引量：2
- 2008年
- 目的构建人肿瘤坏死因子前体水解酶(TACE)系列真核表达载体,转染HeLa细胞,建立稳定转染的HeLa细胞系。方法以THP1细胞cDNA为模板,PCR扩增人TACE基因的全长cDNA编码区序列,将其插入pMD18T载体中,构建出pMD18T-FL-TACE载体。在此基础上,应用重叠延伸PCR扩增出缺失解整合素区的TACE重组cDNA和缺失酶区的TACE重组cDNA,利用DNA重组技术将其分别定向插入真核表达载体pIRES2.0-EGFP中,同时TACE全长也构建入pIRES20.-EGFP。这3种真核表达载体经酶切和测序鉴定后,用脂质体法转染HeLa细胞,经过G418筛选,获得稳定转染的HeLa细胞株,采用RT-PCR、Westernblot及荧光法检测表达。结果成功构建了pIRES2.0-EG-FP/FL-TACE、pIRES20.-EGFP/disΔ-TACE、pIRES20.-EGFP/metΔ-TACE真核表达载体,并建立了稳定转染的HeLa细胞株,成功地表达了目的基因。结论真核表达载体的构建和稳定转染HeLa细胞株的建立为进一步研究TACE功能奠定了必要的实验基础。
- 闫媛章杰杨渝珍过健俐李禹琼
- 关键词：真核表达载体重叠延伸PCR转染
- 家兔极低密度脂蛋白受体的组织分布研究被引量：3
- 2001年
- 极低密度脂蛋白受体 ( VL DL R)在介导甘油三酯代谢的过程中起重要作用。目前已经知道 ,VL DL R分为两种类型 :其一带有 O-连结的糖链区 ( 型 ) ,另一种则不带有该区域 ( 型 )。采用 RT- PCR技术获得家兔 VL DL 受体的 c DNA,PCR扩增后经电泳鉴定显示 :在选取的全部六种组织中均有 型受体分布 ,并且在脂肪、肝脏、脾脏三种组织中还同时伴有 型受体的分布。该结果支持受体与组织能量代谢密切相关这一观点 ,并提示 型受体可能具有除参与脂代谢之外的其它不为人知的重要功能。
- 过健俐郭伟姜立张莉屈伸
- 关键词：极低密度脂蛋白受体逆转录PCR聚合酶链反应动脉粥样硬化
- 血管内皮生长因子基因改善大鼠腹壁下动脉皮瓣成活的实验研究被引量：15
- 2003年
- 目的 通过血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因对腹壁下动脉皮瓣的转染 ,探讨应用VEGF基因对皮瓣成活的影响。方法 以SD大鼠为实验模型制作腹壁下动脉皮瓣 ,并分别注入脂质体包裹的PCD VEGF1 6 5(目的基因组 ) ,PCD(空白质粒组 )和生理盐水 (生理盐水组 )。术后 ,①通过腹腔注射荧光素钠估计皮瓣的血流量 ;②计算断蒂后各组大鼠皮瓣的成活面积 ;③取大鼠皮肤标本行常规染色检测平均血管数目及内径 ;④皮肤标本行VEGF免疫组化染色检测VEGF表达情况。结果 目的基因组、空白质粒组和生理盐水组的平均荧光染色面积分别为6 0 6 4%、30 15 %、2 9 89%(P <0 0 5 ) ,大鼠断蒂后的平均成活面积分别为 92 3%、30 5 %、31 8%(P<0 0 5 ) ,平均血管数目分别为 10 1 72、91 35、89 85 (P <0 0 5 ) ,平均血管内径分别为 2 6、31 0 9、32 5 1μm(P <0 0 5 ) ,免疫组化染色示目的基因组染色深度明显高于空白质粒组和生理盐水组 (P <0 0 5 )。结论 PCD VEGF1 6 5转染能够改善皮瓣的成活 ,且通过转染表达了丰富的VEGF1 6 5。
- 熊兵易传勋过健俐张一鸣冯晓玲周文东
- 关键词：血管内皮生长因子皮瓣腹壁动脉VEGF165白质
