王宏坤
- 作品数：7 被引量：38H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人Ⅱ型胶原250-270多肽对特异性体液免疫的抑制作用被引量：4
- 2006年
- 目的:研究口服重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(CⅡ250-270)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠特异性体液免疫反应的抑制作用,为应用口服CⅡ250-270治疗类风湿关节炎提供理论依据。方法:ELISA测定加强免疫后小鼠血清中抗原特异性抗体的表达,ELISPOT检测小鼠脾脏淋巴细胞中抗原特异性抗体形成细胞。结果:口服重组人CⅡ250-270小鼠血清中抗CⅡ和抗CⅡ250-270的IgG抗体水平[A值分别为(0.82±0.02)、(0.84±0.04)]比CⅡ免疫对照组[抗CⅡ的IgG抗体水平,A值为(1.01±0.06)]显著降低,而且特异性抗CⅡ250-270的IgG抗体反应在口服多肽组被明显抑制(P<0.01);口服重组人CⅡ250-270小鼠的CⅡ和CⅡ250-270特异性抗体形成脾细胞的增殖频率分别为(158±9计数/孔)、(181±10计数/孔),比CⅡ免疫对照组[CⅡ特异性抗体形成脾细胞的增殖频率为(247±16计数/孔)]也显著减少(P<0.05)。结论:口服重组人CⅡ250-270多肽具有抑制CIA小鼠的特异性体液免疫的作用,可能是此疗法治疗CIA多发性关节炎的重要机制。
- 王宏坤朱平李晓燕郑朝晖贾俊峰丁进樊春梅
- 关键词：类风湿关节炎胶原诱导性关节炎口服耐受
- 重组人Ⅱ型胶原蛋白免疫原性多肽表达的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 构建编码人Ⅱ型胶原蛋白 2 5 0 2 70多肽片段(HuCⅡ 2 5 0 2 70 )的多聚基因 ,以获得高效表达、高度可溶和便于纯化的重组多肽基因。方法 选用大肠杆菌 (E .coli)偏爱密码子优化HuCⅡ 2 5 0 2 70的基因组成。通过化学合成和PCR法 ,获得HuCⅡ 2 5 0 2 70的基因 ,并利用BamHI和BglⅡ同裂酶进行酶切位点串联获得 6聚体。对影响重组HuCⅡ 2 5 0 2 70表达的各种因素进行系统研究 ,以获得优化表达的条件。对表达产物进行分离纯化。结果 酶切分析和DNA测序证实 ,6聚目的基因的构建正确。融合表达的量明显高于非融合表达 ,在优化条件下 ,可达 30 %。表达产物的可溶性明显提高 (在 90 %以上 ) ,其相对分子质量 (Mr)与预期的相符 ,纯化后的纯度达 90 %以上。结论 实现了HuCⅡ 2 5 0 2 70的高效表达 ,为研究类风湿性关节炎的发病机制和治疗提供了实验依据。为在原核细胞中高效表达的胶原蛋白的功能性小片段 。
- 王宏坤朱平王彦宏赵旭东陈常庆
- 关键词：类风湿性关节炎多肽
- 我军不同兵种在不同地区类风湿性关节炎患病的流行病学调查被引量：8
- 2004年
- 目的 :调查类风湿性关节炎 (RA)在不同地区不同兵种部队中的发病及流行的特点 .方法 :采用COPCORD询问表 ,对内陆平原地区、南疆干旱地区、北疆寒冷高原地区及沿海潮湿地区 ,包括陆、海、空三军共 2 175 0人进行四级调查 ,初步诊断病例行X线、RF ,抗CCP抗体、抗AKA抗体检测 .结果 :RA患病率为 0 .97‰ ,RA在高原寒冷地区及潮湿环境地区患病率高于平原地区及干旱地区 .海军中的患病率高于陆军及空军 .RF ,抗CCP抗体、抗AKA抗体的阳性率分别为76 .2 % ,38.1% ,4 2 .9% .结论 :RA在部队的患病率显著低于普通人群 ,在海军中患病率高于其他兵种 ,不同地区的患病率无明显差别 .
- 吴振彪王宏坤郑朝晖卢宁贾俊峰贾筠冷南张惠琴朱平
- 关键词：类风湿性关节炎军事人员患病率地理学
- 重组人Ⅱ型胶原250-270多肽的表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:表达与纯化重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(rhCⅡ250-270),鉴定并确认rhCⅡ250-270多肽与预期的相符。方法:在E.coli BL 21中表达rhCⅡ250-270多肽,使用亲和层析法分离纯化。用限制性酶切、聚合酶链式反应(PCR)、基因序列测定、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹等方法在基因和蛋白水平上对rhCⅡ250-270多肽进行鉴定。结果:纯化的rhCⅡ250-270多肽,大小约43 kD,纯度为89.3%。E coRⅠ和SalⅠ双酶切法和PCR法鉴定测得DNA大小约为500bp和650bp,核苷酸序列测定证实基因DNA序列与设计的完全相符。SDS-PAGE显示rhCⅡ250-270多肽目的蛋白条带的大小约为43 kD,W estern B lotting证实GST融合蛋白上存在CⅡ片段。结论:表达和纯化rhCⅡ250-270多肽与预期的相符,并发现此多肽具有较强的免疫原性。
- 王宏坤朱平李晓燕郑朝晖贾俊峰吴振彪
- 关键词：色谱法
- 人类Ⅱ型胶原蛋知性肽段多聚基因的构建和表达被引量：1
- 2000年
- 王宏坤赵旭东
- 关键词：类风湿性关节炎多肽
- 某部队官兵血清阴性脊柱关节病发病规律调查被引量：8
- 2004年
- 目的 调查血清阴性脊柱关节病(SpA)在不同地区不同兵种部队中的发病及流行特点。方法 采用COPCORD询问表,对内陆平原地区、南疆干旱地区、北疆寒冷高原地区及沿海潮湿地区,包括陆、海、空三军共21750人进行四级调查,初步诊断病例行X线及HLA-B27检测。结果 SpA患病率4.87‰,其中强直性脊柱炎(AS)患病率2.11‰,反应性关节炎(ReA)患病率0.276‰,未分化脊柱关节病(uSpA)患病率2.39‰,AS、uSpA在海军中患病率高于其他兵种。AS在高原寒冷地区及沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区,uSpA在沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区。结论 AS、uSpA在部队的患病率接近普通人群,在海军中患病率高于其他兵种,在高原寒冷及潮湿环境地区部队的患病率增高。
- 吴振彪朱平王宏坤郑朝晖贾筠丁进冷南张惠琴刘玲
- 关键词：部队官兵血清阴性脊柱关节病发病规律
- 部分部队官兵类风湿关节炎及血清阴性脊柱关节病的流行病学调查被引量：13
- 2008年
- 目的:调查类风湿性关节炎(RA)及血清阴性脊柱关节病(SpA)在不同地区不同兵种部队中患病及流行特点.方法:采用COPCORD询问表,对内陆平原地区、南疆干旱地区、北疆及青海寒冷高原地区及沿海潮湿地区,包括陆、海、空三军共21750人进行四级调查.初步诊断病例行X线、RF、抗CCP抗体、抗AKA抗体及HLA-B27检测.结果:RA患病率为0.966‰,SpA患病率4.87‰,其中强直性脊柱炎(AS)患病率为2.11‰,反应性关节炎(ReA)患病率为0.276‰,未分化脊柱关节病(USpA)患病率2.39‰,).RA,AS,USpA在海军中患病率高于其他兵种.RA在不同地域间患病率无统计学差别,AS在高原寒冷地区及沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区,USpA在沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区.结论:RA在部队的患病率显著低于普通人群,在海军中的患病率高于其他兵种.AS,USpA在部队的患病率接近普通人群.血清阴性脊柱关节病(SpA)在高原寒冷及潮湿环境地区部队的患病率增高.
- 吴振彪朱平王宏坤郑朝晖卢宁贾筠丁进冷南刘玲张惠琴
- 关键词：患病率军事人员
