吴亚冉
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:第三军医大学新桥医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- hTERT上调FOXM1乙酰化影响胃癌细胞侵袭能力被引量:1
- 2017年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,hTERT)促进胃癌细胞侵袭的分子机制。方法构建稳定过表达hTERT的细胞株SGC-7901-hTERT,采用Western blot检测叉头盒蛋白(forkhead box M1,FOXM1)的表达,q RT-PCR和Western blot检测FOXM1下游侵袭相关基因基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的m RNA和蛋白表达;构建FOXM1的sh RNA干扰质粒,在SGC-7901-hTERT细胞中转染该质粒,Transwell法检测细胞侵袭能力,q RT-PCR和Western blot检测MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达;构建FOXM1启动子活性报告质粒,在SGC-7901-hTERT细胞中用双荧光素酶报告实验检测FOXM1启动子活性,q RT-PCR检测FOXM1 m RNA表达;构建稳定过表达FOXM1的细胞株SGC-7901-HA-FOXM1,并在此细胞中转染hTERT过表达质粒,免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)检测FOXM1乙酰化水平变化,免疫荧光实验检测hTERT与FOXM1的细胞定位。结果与对照组比较,过表达hTERT促进FOXM1及其下游分子MMP-2、MMP-9的蛋白表达,同时也促进肿瘤细胞侵袭(P<0.01),但不影响FOXM1的启动子活性及m RNA表达;与过表达hTERT组比较,干扰FOXM1可抑制MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达,同时也抑制肿瘤细胞侵袭(P<0.01);hTERT与FOXM1存在细胞共定位,且过表达hTERT可上调FOXM1乙酰化水平。结论 hTERT通过上调FOXM1乙酰化促进胃癌细胞侵袭。
- 廖国斌彭瑞琨节梦梦常杏吴亚冉陈杨胡长江杨仕明柏健鹰
- 关键词:端粒酶逆转录酶肿瘤侵袭