曹佳
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院西部之光基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高三尖杉酯碱阻断mTOR信号通路抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡被引量：3
- 2018年
- 目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对HT29人结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡调控的分子机制。方法用(0、0.0078125、0.015625、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8)μg/m L HHT分别处理HT29细胞24、48、72 h。CCK-8法检测HT29细胞的增殖,集落形成实验检测细胞的集落形成能力;Hoechst33258染色观察染色质凝集情况,流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量PCR检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丙酮酸脱氢酶激酶(PDK1)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白调节相关蛋白(raptor)、雷帕霉素不敏感的伴侣蛋白(rictor)的mRNA水平;Western blot法检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3前体(pro-caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、pro-caspase-9、裂解型caspase-9(c-caspase-9)、多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、裂解型PARP(c-PARP)、mTOR、raptor、rictor、PI3K、PDK1、AKT、p-AKT的蛋白水平。结果与对照组相比,HHT能抑制HT29细胞增殖,诱导细胞核破裂,染色质凝聚,凋亡小体形成;同时,HHT处理能够提高HT29细胞中BAX/Bcl2比值、caspase-3、caspase-9、raptor的mRNA水平,降低PI3K、AKT、rictor的mRNA水平;并上调HT29细胞中c-caspase-3、c-caspase-9、c-PARP、BAX、raptor蛋白水平,下调pro-caspase-3、pro-caspase-9、PARP、PI3K、PDK1、AKT、mTOR、rictor蛋白水平。结论 HHT能够通过阻断mTOR信号通路,进而抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡。
- 王丹妮陶文杰张旭张旭穆新曹佳曹佳王立斌
- 叉头框蛋白A2对肝癌细胞增殖和成瘤的抑制作用被引量：8
- 2019年
- 目的通过研究叉头框蛋白A2(FOXA2)对肝细胞癌细胞体外增殖能力和裸鼠成瘤的影响,探讨FOXA2对肝细胞癌发生发展的影响。方法免疫组化、实时定量PCR检测35对肝细胞癌组织及其配对癌旁组织中FOXA2的表达差异;以293T细胞为对照,利用实时定量PCR检测肝细胞癌细胞系(HepG2、SMMC-7721、SK-Hep1)中FOXA2的表达水平;慢病毒转染HepG2细胞,将实验分为3组:未加病毒组(Mock组)、感染阴性对照慢病毒组(NC组)以及感染FOXA2过表达慢病毒组(FOXA2组);平板克隆实验检测FOXA2对HepG2细胞体外增殖能力的影响;裸鼠成瘤实验检测FOXA2过表达慢病毒感染细胞后对瘤体质量的影响。结果免疫组化、实时定量PCR实验结果表明,癌组织中FOXA2的表达显著低于癌旁组织(均P <0.01);FOXA2在肝癌细胞系(HepG2、SMMC-7721、SK-Hep1)中的表达均显著低于293T细胞(均P <0.0001);FOXA2过表达慢病毒载体转染HepG2细胞后,平板克隆形成实验显示,FOXA2组细胞克隆数较Mock组和NC组明显减少(均P <0.05);裸鼠成瘤实验显示,FOXA2组瘤体质量小于相应空白对照组和阴性对照组(均P <0.01)。结论 FOXA2在肝细胞癌组织和细胞中低表达,具有抑制HepG2细胞体外增殖和裸鼠体内瘤体生长的作用。
- 王立斌王曦曹佳曹佳冯惠敏李晓菡刘世海
- 关键词：肝细胞癌增殖致瘤性
- PGC-1β基因干扰载体的构建及其对乳腺肿瘤细胞增殖的影响
- 2017年
- 目的构建过氧化物酶体增殖物激活受体辅助活化因子1β(peroxisome proliferative actives receptorγcoactivator-1β,PGC-1β)基因干扰载体,并将其转入人乳腺肿瘤细胞MCF-7中,验证其干扰效应及对肿瘤细胞增殖的影响。方法应用PCR技术扩增得到人PGC-1β的全长序列,克隆入p GEM-T easy载体中,筛选阳性克隆,经酶切鉴定、测序鉴定证实克隆成功。构建人PGC-1β基因干扰载体,命名为p Genesil/sh PGC-1β。将干扰载体利用Lip3000转至乳腺肿瘤细胞系MCF-7中,通过Real-time PCR、Western blot技术检测外源基因PGC-1β的表达。同时利用MTT、平板克隆形成实验检测转染干扰载体对MCF-7细胞增殖能力的影响。结果经双酶切鉴定证实构建的PGC-1β干扰载体的酶切片段与预期大小一致;Real-time PCR与Western blot结果显示与MCF-7细胞组及转染空载体组相比,转染干扰载体组MCF-7细胞中PGC-1βm RNA与PGC-1β蛋白的表达水平均下降(P<0.05)。平板克隆形成和MTT实验结果表明,转染干扰载体组与空载体组及MCF-7细胞组相比,细胞的增殖能力减弱(P<0.01)。结论成功构建PGC-1β基因干扰载体(p Genesil/sh PGC-1β),转染MCF-7细胞可抑制其增殖能力,为后续深入研究PGC-1β对肿瘤细胞的作用机制奠定了基础。
- 曹佳王曦严秀蕊金毅然王立斌
- 关键词：增殖
- 多效生长因子在乳腺癌中的表达及诊断价值被引量：4
- 2019年
- 目的探讨多效生长因子(pleiotrophin,PTN)在乳腺癌中的表达及诊断价值。方法采集乳腺癌患者及健康体检者组织及血液样本,检测血液样本中PTNmRNA和蛋白的表达差异。电化学发光法测定血浆中糖类蛋白153(carbohydrate antigen153,CA153)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类蛋白125(carbohydrate antigen125,CA125)表达水平,绘制ROC曲线分析PTN与CA153、CEA、CA125等联合检测对乳腺癌的诊断价值。结果乳腺癌患者组血清PTN表达水平高于乳腺良性病变组和健康对照组(P<0.05),乳腺良性病变组和健康对照组差异无统计学意义(t=-1.56,P>0.05);PTNmRNA及蛋白的表达水平乳腺癌组织显著高于癌旁正常组织(P<0.05),且PTN的表达水平与患者远处转移、TNM分期、分化程度密切相关。PTN诊断乳腺癌的AUC为0.893(P<0.05)高于血清CA153、CEA、CA125,联合检测时,ROC曲线下面积为最大。结论检测血清PTN水平有助于评估乳腺癌的转移风险和预后情况,PTN联合CA153、CEA以及CA125检测时可明显提高对乳腺癌的诊断价值。
- 吴立刚冯慧敏纳莉王丹妮曹佳曹佳金晓菲
- 关键词：多效生长因子乳腺癌肿瘤标志物
