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任娟
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供职机构:
湖北工业大学
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相关领域:
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合作作者
胡珺
湖北工业大学
杜新凯
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王常高
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棉铃虫甾醇载体蛋白2原核表达及纯化
2017年
甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫体内甾醇吸收及运输过程中有着重要的生理功能。试验构建重组表达质粒pET-22b/HaSCP2,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,并对IPTG浓度、诱导时间及温度进行优化,经Ni柱分离纯化后分析其与胆固醇结合活性。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白相对分子质量约为16 ku,且在25℃,IPTG终浓度0.2 mmol·L^(-1)下诱导10 h为最佳诱导表达条件。经荧光探针8-苯胺-1-萘磺酸(1,8-ANS)竞争分析,胆固醇与HaSCP-2结合半数有效浓度(EC50)为29.03μmol·L^(-1)。该研究为深入研究棉铃虫SCP-2的功能以及后续HaSCP-2抑制剂的筛选研究奠定了基础。
杜新凯
任娟
胡珺
王常高
林建国
蔡俊
杜馨
关键词:
棉铃虫
原核表达
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