杨泽慧
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- 5种条件下桉树焦枯病菌MAPK基因的表达被引量：2
- 2019年
- 采用qPCR检测Calonectria pseudoreteaudii YA51的MAPK基因在盐胁迫、氧胁迫、细胞壁干扰物质胁迫、桉树组织诱导以及不同发育时期5种条件下的表达情况.结果表明CpKss1参与致病过程,CpKss1、CpSlt2和CpIme2与菌丝生长发育有关,CpKss1、CpHog1和CpIme2参与病菌高渗胁迫反应,CpSlt2参与调控氧胁迫反应和细胞壁完整性,且4个MAPK基因所介导的级联通路间可能存在既相互独立又相互协作的关系.
- 杨泽慧陆芝李丽红江仲鹏冯锦秀冯丽贞
- 关键词：MAPK
- 桉树焦枯病菌内参基因的筛选被引量：4
- 2018年
- 为筛选出桉树焦枯病菌在盐胁迫及侵染桉树叶片两种条件下表达稳定的内参基因,采用实时荧光定量聚合酶链式扩增反应(RT-q PCR)技术分析了桉树焦枯病菌中7个常用内参基因(GAPDH、α-tubulin-1、α-tubulin-2、18S rRNA、ubiquitin、β-actin、β-tubulin)的mRNA差异表达情况,并采用ge Norm软件分析了它们在两种条件下的表达稳定性。结果表明,ubiquitin和α-tubulin-2为桉树焦枯病菌在NaCl胁迫下表达最稳定的基因,且不需要引入第3个基因;18S rRNA和α-tubulin-1为侵染桉树叶片下表达最稳定的基因,但需引入第3个基因GAPDH。因此,ubiquitin和α-tubulin-2为桉树焦枯病菌在NaCl胁迫下较适合的内参基因,而18S rRNA、α-tubulin-1和GAPDH为侵染桉树叶片较适合的内参基因。
- 陈慧洁冯丽贞冯丽贞李慧敏李慧敏杨泽慧
- 关键词：盐胁迫侵染内参基因
- 促进桉树焦枯病菌大量产孢的方法被引量：1
- 2018年
- 为了促进桉树焦枯病菌(Calonectria pseudoreteaudii YA51)在人工培养基上快速、大量的产生分生孢子,本试验在查彼特培养基(Czapek-Dox Medium)的基础上添加桉树叶煎汁、维生素B_1、维生素B_6或南美蟛蜞菊(Wedelia trilobata(L.)Hitchc.)煎汁,测定不同处理对Ca.pseudoreteaudii YA51产孢的影响。结果表明:在查彼特培养基中加入桉树叶煎汁和4g/L的维生素B_1,或者在查彼特培养基中加入南美蟛蜞菊煎汁均可促进Ca.pseudoreteaudii YA51大量产孢,产孢量依次为3.23×10~6、1.43×10~6个/mL。查彼特培养基明确的化学成分比不同时间配出的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato Dextrose Agar Medium,PDA)更利于Ca.pseudoreteaudii YA51生长,此方法时间短,操作简单,产孢量高,可满足分子生物学试验要求。
- 郭朦朦丁奕杨泽慧张清华冯丽贞宋漳
- 关键词：蟛蜞菊
- 桉树焦枯病菌CpSit1基因的鉴定与表达被引量：2
- 2017年
- 利用Blast及TCDB数据库对桉树焦枯病菌(Calonectria pseudoreteaudii)的Cpsit1基因进行鉴定;再利用SMART数据库和Prot Param、TMHMM、PHD、Pro Comp 9.0在线分析工具对Cpsit1基因编码蛋白的理化性质、跨膜螺旋、蛋白质二级结构和亚细胞定位进行预测分析;最后采用qRT-PCR方法对CpSit1基因在焦枯病菌侵染桉树过程中的表达情况进行分析.结果表明:CpSit1基因长度为1 780 bp,其编码的蛋白序列共有592个氨基酸残基组成,并将其鉴定为铁载体-铁:H+同向转运蛋白.其保守结构域为MFS_1;共含有14个跨膜螺旋;在二级结构中α螺旋占45.10%,延伸链占26.01%,无规则卷曲占28.89%.通过qRT-PCR相对定量的方法分析焦枯病菌侵染桉树24、48和72 h后CpSit1基因的表达情况,结果显示,CpSit1基因在这3个时段均发生上调表达,但24 h的表达量明显大于48和72 h.说明桉树焦枯病菌CpSit1基因在病原菌侵染寄主的过程中通过调控铁载体-铁化合物的转运来完成铁元素的摄入,协助其在寄主中的定植.
- 刘宏毅叶小真陈慧洁李慧敏丁奕杨泽慧冯丽贞
- 关键词：桉树焦枯病生物信息学分析
- 闽楠溃疡病病原鉴定及其生物学特性研究被引量：4
- 2018年
- 闽楠(Phoebebournei),我国Ⅱ级保护濒危植物,是亚热带常绿阔叶林重要组成树种,而闽楠溃疡病的发生严重危害其开发利用。为明确闽楠溃疡病的致病菌,以便后续科学的指导病害防治,本文从福建省闽楠病枝中分离纯化菌株,通过致病性测定、形态学观测以及rDNA-ITS、GAPDH、β-tubulin、Histone3序列分析鉴定病原菌,并分析其生物学特性。结果显示:从闽楠病枝中分离出4种菌株,分别编号为SS-01、SS-02、SS-03和SS-04,其中菌株SS-03致病菌为粉红粘帚霉(Clonostachys rosea Schroers, et al.=Gliocladium roseum Bainier);该菌菌丝在PDA+PBL培养基(pH 6.0)上25℃黑暗条件下生长最好;最适菌丝生长碳源为麦芽糖,可溶性淀粉有利于产孢;最适氮源为牛肉浸膏;产孢量在PDA培养基(pH 7.0)上25℃全黑暗条件最高。空气相对湿度≥90%(pH 8.0)时孢子萌发率最高。高温高湿以及高郁闭度易于闽楠溃疡病发生,故在营林造林以及苗圃抚育时应注意通风透气,控制温湿度,防止病害发生。该研究结果为科学有效地指导闽楠溃疡病防治提供技术支持。
- 郭朦朦陈全助冯丽贞杨泽慧陆芝冯锦秀黄捷
- 关键词：闽楠溃疡病病原鉴定形态学特征
- 茉莉酸甲酯诱导桉树对焦枯病的抗性研究被引量：4
- 2018年
- 为了探究茉莉酸甲酯诱导桉树对焦枯病的抗性,用前期研究的11个桉树主栽种系中的感病种系"巨桉3号"和中抗种系"巨尾桉广9"的组培苗为试验材料,通过0.05,0.1,0.5,1 mmol/L茉莉酸甲酯(MeJA)喷施桉树组培苗3 d的处理,以及用0.1 mmol/L MeJA分别诱导桉树组培苗1、3、5、7、10和15 d后,分别得出接种焦枯病菌组培苗抗病性防御酶应答和抗性的持效性结果:(1)不同抗病性的桉苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)的活性均比对照提高,且在浓度为0.1 mmol/L时,这2种酶活性都达到最大值。(2)在诱导后的接种叶片的PPO和SOD活性都呈先上升后下降的趋势,且在第5天时酶活性最高。同时,两种处理均显示,诱导后感病种系"巨桉3号"酶活性增幅高于中抗种系"巨尾桉广9"。因此得出结论:感病种系"巨桉3号"诱导效果强于中抗种系"巨尾桉广9"。
- 郭朦朦陈慧洁冯丽贞杨泽慧陆芝唐芬
- 关键词：桉树焦枯病茉莉酸甲酯诱导抗性
- 桉树焦枯病菌MAPK的鉴定与生物信息学分析被引量：2
- 2019年
- 利用多种生物信息学网站与软件,从全基因组水平鉴定桉树焦枯病菌的促分裂原活化蛋白激酶(MAPK),并对其理化性质、亚细胞定位、结构域、二级结构、三级结构等进行分析,并构建系统发育树。结果表明,在桉树焦枯病菌中发现4个MAPK,分别命名为CpKss1、CpSlt2、CpHog1和CpIme2,均属于亲水蛋白,亚细胞定位均在细胞核。拥有高度保守的结构域STKc及位于活化环上的双重磷酸化位点T-X-Y,三级结构显示拥有蛋白特异性底物结合口袋特征。通过系统进化分析,这4个MAPK相应基因分别与酵母Fus3/Kss1、Slt2、Hog1和Ime2类基因同源,均和禾谷镰刀菌中相应的MAPK亲缘关系最近。该研究结果为进一步了解桉树焦枯病菌中MAPK的生物学功能和构建MAPK级联途径奠定基础。同时对桉树焦枯病菌致病、桉树抗病相关重要基因功能及分子机制等研究具有重要意义,最终为桉树焦枯病防治工作提供技术支持。
- 陈慧洁陆芝丁奕丁奕宋漳杨泽慧
- 关键词：桉树焦枯病MAPK促分裂原活化蛋白激酶生物信息学分析
- 桉树枯萎病菌Fusarium solani分子检测技术研究被引量：2
- 2019年
- 桉树枯萎病是桉树人工林中的重要枝干病害,一旦发生则对桉树人工林造成严重危害,Fusarium solani是其主要病原之一。本试验通过RAPD标记技术,找到一条致病菌特异片段,对该片段进行克隆、测序,根据测序结果设计出特异性引物F9/R9,进一步优化扩增条件,并检测其灵敏度。结果表明,特异性引物F9/R9能从桉树枯萎病菌F.solani扩增出一条大小为200 bp左右的特异条带,而其它8种参试菌株和对照均无条带产生。该引物最低可以检测到4×10-7 ng·μL^-1的病原菌基因组DNA,也能检测到单个孢子的存在。同时可从发病桉树枝干和带菌土壤中特异性检测到枯萎病菌F.solani。因此,利用特异性引物F9/R9对桉树枯萎病菌F.solani快速检测技术操作简单,特异性强,可用于该病害早期诊断及检疫,对指导林农及时进行药剂防治,进而限制病害扩展具有重要意义。
- 叶小真杨泽慧张清华宋漳陈全助
- 关键词：FUSARIUMSOLANISCAR
