杨晓苹
- 作品数：10 被引量：1H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学一般工业技术轻工技术与工程更多>>
- 载有药物的维生素B<sub>12</sub>衍生物自组装纳米微粒及制备方法与应用
- 本发明公开一种载有药物的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物自组装纳米微粒及制备方法与应用。本发明将药物、苯丙氨酸二肽分别溶解于六氟异丙醇，得到溶液A和溶液B；将如式I所示的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物溶...
- 李弘剑冉艳红刘天祥陈美云李万维杨晓苹
- 阿拉伯半乳糖苷酶编码基因00578在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用
- 本发明公开了阿拉伯半乳糖苷酶编码基因00578在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用，本发明通过将SEQ ID NO:1所示阿拉伯半乳糖苷酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET22b(+)中，转化至大肠杆菌，得重组表...
- 冉艳红邓进丰蔡雨薇王婷杨晓苹李弘剑
- 文献传递
- 可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物及制备方法与应用
- 本发明公开了一种可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物及制备方法与应用。该可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物如式I所示。本发明通过磷酸鎓盐类耦合剂或碳二亚胺类耦合剂活化...
- 李弘剑陈美云张忠民冉艳红刘天祥李万维杨晓苹
- 多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用
- 本发明公开了多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用，本发明通过将SEQ ID NO:3所示优化后的多糖裂解酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET28a中，转化至大肠杆菌，得重组表达菌；再将...
- 冉艳红邓进丰杨晓苹王超张欣李弘剑
- 文献传递
- 载有药物的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物自组装纳米微粒及制备方法与应用
- 本发明公开一种载有药物的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物自组装纳米微粒及制备方法与应用。本发明将药物、苯丙氨酸二肽分别溶解于六氟异丙醇，得到溶液A和溶液B；将如式I所示的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物溶...
- 李弘剑冉艳红刘天祥陈美云李万维杨晓苹
- 文献传递
- 多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用
- 本发明公开了多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用，本发明通过将SEQ ID NO:3所示优化后的多糖裂解酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET28a中，转化至大肠杆菌，得重组表达菌；再将...
- 冉艳红邓进丰杨晓苹王超张欣李弘剑
- 一种微生物降解柚子皮生产果胶低聚糖的方法及应用
- 本发明公开了一种微生物降解柚子皮生产果胶低聚糖的方法及应用。通过将微杆菌A5添加至含柚皮的培养基中进行发酵得发酵液，再对发酵液分级压榨过滤和过滤除菌，乙醇沉淀提取果胶粗品、除蛋白，离子交换层析、透析脱盐、冷冻干燥等步骤纯...
- 冉艳红苏俊杰周敏敏杨晓苹李弘剑
- Tet-On3G系统调控人巨细胞病毒蛋白pUL23稳定表达的人胚肺成纤维细胞(HELF)系的建立被引量：1
- 2017年
- 人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)为疱疹病毒家族一员,易导致免疫力低下或缺陷的人群严重疾病,目前对HCMV编码的皮层蛋白pUL23功能的相关报道很少。本研究应用Tet-On3G诱导表达系统,在人胚肺成纤维细胞(Human embryonic lung fibroblast,HELF)建立诱导表达HCMV病毒蛋白pUL23细胞模型。将病毒基因UL23和阳性对照基因EGFP分别定向插入应答慢病毒载体pLVX-TRE3G中,获得pLVX-TRE3GUL23-3×Flag、pLVX-TRE3G-EGFP重组慢病毒载体。运用二代慢病毒包装系统与Lenti-X293T包装细胞系,制备收获慢病毒后感染人胚肺成纤维细胞HELF。遗传霉素(Geneticin,G418)和嘌呤霉素(Puromycin,Puro)抗性筛选后多西环素(Doxycycline,Dox)诱导外源基因表达。感染后的细胞在96孔板有限稀释法成单克隆,分别采用RT-PCR与Western blot技术检测病毒UL23基因在mRNA水平与蛋白水平的表达量,筛选出当诱导时高效表达且未诱导时低表达的单克隆细胞;并评估Dox诱导剂量与诱导时间对外源蛋白pUL23表达的影响。限制性内切酶与测序显示重组质粒pLVX-TRE3G-UL23-3×Flag、pLVX-TRE3G-EGFP序列和方向正确。病毒蛋白pUL23在感染细胞中能够被诱导表达;当Dox浓度高于400ng/mL时pUL23蛋白表达量不再随Dox剂量增高而增高。在Dox诱导2h后,RT-PCR结果表明在921bp处有特定条带(UL23-3×Flag基因)与此同时,Western blot实验也检测到pUL23蛋白。这些结果表明,成功构建重组慢病毒载体,包装成慢病毒感染后,病毒基因UL23能够在人胚肺成纤维细胞中诱导表达。Dox的最佳工作浓度为400ng/mL,最佳诱导时间为12h至24h之间。这将为进一步研究病毒蛋白pU23的功能奠定基础。
- 杨少敏傅政民孙绮遥冯琳远杨晓苹冉艳红李弘剑
- 关键词：慢病毒
- 干扰素诱导蛋白Nmi与人巨细胞病毒皮层蛋白UL23相互作用区域的研究
- 2018年
- 目的:探究干扰素诱导蛋白N-Myc相互作用因子(Nmi)与人巨细胞病毒(HCMV)皮层蛋白UL23相互作用的关键区域。方法:根据前期实验结果,分别将10个不同截短突变型的Nmi构建到原核表达载体p GEX-4T-1上,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,表达并纯化出带有GST标签的融合蛋白,利用GST-pulldown的方法探究Nmi与UL23相互作用的区域。根据GST-Pulldown实验结果,用同源重组的方法在真核表达载体pc DNA4-Myc上分别构建3个缺失突变型Nmi。将实验组和对照组的Nmi分别与含有Flag标签的UL23质粒共转染至He La细胞中,通过免疫共沉淀法进一步研究Nmi与UL23的相互作用区域。结果:(1)10个截短突变型Nmi与GST基因融合的原核表达载体构建成功;(2)3个缺失突变型Nmi与Myc基因融合的真核表达载体构建成功;(3)GST-pulldown实验证明Nmi与UL23相互作用位点位于Nmi上的第192~202位氨基酸区域;(4)免疫共沉淀法确认Nmi的第192~202位氨基酸区域是与UL23相互作用的区域,与GST-pulldown实验结果一致。结论:Nmi与UL23相互作用的区域位于Nmi上第192~202位氨基酸区域。这为阐明UL23帮助HCMV在宿主体内潜伏的分子机理提供了基础。
- 叶倩宸陈业伟傅政民李晓钿冯琳远杨晓苹冉艳红李弘剑
- 关键词：人巨细胞病毒免疫共沉淀
- 可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物及制备方法与应用
- 本发明公开了一种可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物及制备方法与应用。该可自主装形成纳米微粒的维生素B<Sub>12</Sub>衍生物如式I所示。本发明通过磷酸鎓盐类耦合剂或碳二亚胺类耦合剂活化...
- 李弘剑陈美云张忠民冉艳红刘天祥李万维杨晓苹
