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牛GPR54基因C-816T/T-754C品种间分布及其与早熟性的关联被引量：1: 2015年; GPR54基因是牛早熟性状的重要候选基因。以42头本地黄牛、44头西门塔尔牛及其116头杂交育种群等为试验群体,分析牛GPR54基因5’调控区C-816T/T-754C在不同牛群体中的分布、启动子效率及其与牛早熟性状的关联性。提取牛耳组织或血液基因组后,通过PCR产物测序鉴别SNP位点,双荧光素酶报告基因验证其SNP位点对启动子效率的影响。结果表明,在GPR54基因CDS上游5’调控区检测到T-754C和C-816T 2个SNP位点;西门塔尔牛和安徽地方黄牛分别只有1种基因型,即CCTT和TTCC,单倍型存在连锁不平衡。报告基因验证2种单倍型的启动子有明显差异,其中-816CT-754启动子的效率要比-816TC-754提高34.31%(P<0.01)。关联分析显示,816CC754TT基因型牛的初情期比816TT754CC基因型牛的初情期提前了1.28月。; 周梅王学故陈宏权王扬邓丹妹胡利影马帮军王桂云张翼鹏; 关键词：早熟性 SNP 启动子

不同类型猪小肠组织差异EST的鉴定及其SNPs分析: 2013年; 采用DDRT-PCR技术,对中国地方猪种和杜长大(大白×长白×杜洛克)猪的小肠组织进行差异EST分析。试验提取了地方猪和杜长大猪小肠组织的总mRNA,反转录成cDNA,利用3条锚定引物和6条随机引物组成18个引物对其进行PCR扩增,对特异性差异条带进行测序分析和鉴定其EST;针对EST序列特征,在不同产脂能力猪种中开展SNPs分析。结果表明,18个引物对共得到180多条EST序列,其中地方猪种个体间差异EST为6条,杜长大猪个体间差异EST为12条,地方猪与杜长大猪间差异EST为8条。选取具有代表性的3条种群间差异EST进行序列研究,结果显示,G24-300在种群之间的表达量存在明显的差异,是在杜长大猪群中高表达的EST;G01-360具有丰富的SNPs,并且其基因频率分布在不同类型猪群中存在明显的差异。; 朱银剑陈宏权潘中婷陈华焦明慧陈公伟谢亚男周梅; 关键词：地方猪种小肠组织 EST SNP

猪THRSP基因5’调控区多位点SNP联合效率的研究: 2014年; 旨在分析猪THRSP基因5’调控区多位点SNP联合调控THRSP基因表达的效率。实验从猪基因组获取包含多位点SNP的目的片段,利用荧光素酶报告基因pGL3-Basic构建表达载体,检测多位点SNP的联合启动效率,并通过实时荧光定量PCR进行THRSP基因表达验证分析。结果表明,在5个SNP位点中,TCAGA的启动效率最高,比CTGGA的启动效率高129%,而CCAGA、CTAGA和CTGAT的启动效率较CTGGA分别低99.0%、73.2%和42.6%。TCAGA的启动效率较CCAGA高75.6%,而CCAGA比CTAGA的启动效率高96.6%;报告基因所揭示的SNP启动效率与THRSP基因实时荧光定量PCR结果一致。; 谢亚男焦明慧陈宏权潘中婷陈公伟周梅王学故马帮军; 关键词：基因表达脂肪沉积

siRNA对猪肝细胞THRSP基因mRNA表达的干扰效率: 2014年; 应用改良的剪切消化法(1%Ⅳ型胶原酶)消化分离仔猪肝脏细胞,建立稳定的仔猪肝脏细胞的分离与原代培养体系;通过siRNA途径及RT-PCR技术检测肝细胞THRSP基因mRNA表达水平。结果表明,平均每g肝脏可获得6.2×106个细胞,接种即时存活率达94.84%,培养存活率达50%左右,细胞转染后细胞存活率达80%以上;设计合成的siRNA的干扰效率为75.3%; 潘中婷王学故陈宏权焦明慧谢亚男周梅陈公伟马帮军; 关键词：SIRNA MRNA

不同产脂能力猪脂肪合成相关基因表达谱分析被引量：4: 2014年; 旨在筛查不同产脂能力猪脂肪合成的相关差异表达基因,分析其与猪THRSP基因表达的关联性。实验采集5头瘦肉型和3头脂肪型猪的肝脏,提取总RNA,利用基因表达谱芯片技术检测猪肝脏全基因组表达谱,分析THRSP基因与脂肪代谢相关差异表达基因之间的关联性。结果表明,相对瘦肉型猪,脂肪型猪脂肪酸合酶(FASN)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)(P<0.01)和乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)(P<0.05)基因的表达显著上调,小GTP酶中Rab32和Rab4a显著上调,Rab27a则表现显著下调(P<0.05);相关性分析显示GLUT4、FASN和ACACA基因表达的变化与THRSP基因呈显著正相关,Rab27a基因为显著负相关,Rab32和Rab4a基因则相关性不明显。; 焦明慧周梅陈宏权陈公伟谢亚男潘中婷王学故马帮军; 关键词：基因表达谱基因芯片脂肪沉积

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周梅