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李利峰
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
江南大学生物工程学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
刘咏梅
江南大学生物工程学院工业生物技...
李娜
江南大学生物工程学院工业生物技...
孙志浩
江南大学生物工程学院工业生物技...
倪晔
江南大学生物工程学院工业生物技...
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李利峰
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食品与生物技...
年份
1篇
2011
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精氨酸脱亚胺酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化
被引量:3
2011年
通过PCR扩增得到菌株编码ADI的arcA基因,并构建表达载体pET24a-ADI。将该载体导入大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达ADI基因的重组菌。对ADI诱导表达条件进行优化,结果发现宿主菌在A600达到1.0时加入0.2 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),在30℃诱导4 h酶活最高,为2.04 U/mL发酵液。经超声波破碎、HiPrep DEAE FF阴离子交换层析、SuperdexTM200凝胶过滤层析,可获得SDS-PAGE电泳纯重组精氨酸脱亚胺酶(rADI)。rADI相对分子质量大小为92 600,由两个相同亚基组成,纯化后的rADI比酶活达20.9 U/mg。
刘咏梅
倪晔
李娜
李利峰
孙志浩
关键词:
精氨酸脱亚胺酶
克隆
纯化
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