胡小梅
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：四川农业大学资源环境学院环境科学与工程系更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于正交设计的畜禽废水处理中活性污泥DNA的16S rDNA-PCR扩增体系
- 2008年
- 用SBR反应器处理畜禽废水,提取其中好氧活性污泥总DNA,比较3种物理破壁方法对DNA质量的影响,同时选择4个因素(DNA模板,Mg2+,dNTP,引物)对16SrDNA-PCR反应体系进行正交优化,并确定最适退火温度。结果表明,反复冻融法的DNA纯度大于玻珠振荡法和摇床振荡法,可不经纯化直接扩增;DNA浓度对PCR结果影响最大,Mg2+和dNTP浓度的影响次之且程度相同,引物浓度影响最小;最佳PCR扩增体系(25μL)的组成为:模板DNA0.32μg,dNTP200μmol·L-1,Mg2+1.5mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,TaqDNA聚合酶0.2U,且最适退火温度为56.5℃。
- 谢晴曹伟伍阳邓仕槐胡小梅段莎丽叶红
- 关键词：SBR冻融PCR扩增正交设计
