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胡福勇
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
深圳市疾病预防控制中心
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
纪卫东
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胡恭华
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毒理学杂志
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1篇
2008
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三氯乙酸染毒对肝L-02细胞的增殖作用及对DNA甲基化水平的影响
被引量:4
2008年
目的 检测三氯乙烯(TCE)主要代谢产物三氯乙酸(TCA)对人肝L-02细胞染毒24h后的增殖作用,以及对DNA总体甲基化水平的影响,探索TCE对肝L02细胞的表型遗传毒性。方法选择0.1~0.9mmol/L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒24h后分别进行下列试验:以CCK-8试剂盒观测细胞的生长曲线;以抗5-mC抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化总体水平(TCA0.9mmol/L染毒24h);以流式细胞仪(FCM)检测其对细胞周期的影响及凋亡情况;提取细胞DNA进行琼脂糖电泳分析其对DNA的损伤作用。以上试验必要时设置5-氮杂胞苷(5-aza—dC5μmol/L)处理的L-02细胞为基因组DNA低甲基化的对照以及肝癌细胞作为细胞周期分析的对照。结果TCE在0.1~0.9mmol/L浓度下染毒24h后可以促进肝L-02细胞生长,并在0.9mmol/L浓度作用下24h可致肝L-02细胞DNA总体甲基化水平降低,荧光强度和正常细胞比较明显减弱;细胞周期分析发现TCA处理24h后再用正常培养基继续培养24h后可使细胞S+G2期中细胞比例增加(与肝癌细胞接近);DNA梯状电泳分析未发现DNA损伤性改变。结论TCA染毒24h可促进细胞生长,可诱导基因组DNA低甲基化,并造成细胞周期的改变,提示TCA对肝细胞的早期细胞毒性作用与表型遗传机制有关。
杨建平
袁建辉
胡恭华
纪卫东
张文娟
许玉玲
徐薇
杨淋清
张锦州
吴丽明
胡福勇
朱志良
吴礼康
庄志雄
关键词:
三氯乙烯
三氯乙酸
DNA甲基化
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