邵娜
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:广州市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肠出血型大肠埃希菌O104:H4单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析检测方法的建立
- 目的: 2011年5月,肠出血型大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O104:H4的感染在德国暴发,并迅速蔓延至欧洲、美国等16个国家。全球共报告了4137例病例...
- 邵娜
- 关键词:胶体金试纸条单克隆抗体
- 文献传递
- 肠出血型大肠埃希菌O104∶H4转运蛋白AatA单克隆抗体制备及鉴定
- 2017年
- 目的表达肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的融合蛋白GST-Aat A,获得单克隆抗体。方法人工合成肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的转运蛋白基因aat A,连接至p MDl8-T载体,转化E.coli DH5α,双酶切回收,构建原核表达质粒PGEX-6P-1-GST-Aat A,测序鉴定后,转化E.Coli BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot分析目的蛋白的表达并纯化该重组蛋白。将纯化后的融合蛋白GST-Aat A免疫Balb/c小鼠,制备相应单克隆抗体;并对该单克隆抗体的纯度、亚型、效价、特异性进行鉴定和分析。结果构建的原核表达载体PGEX-6P-1-GST-Aat A能表达融合蛋白GST-Aat A;亲和层析纯化后融合蛋白GST-Aat A纯度达到95%,免疫小鼠后得到相应特异性单克隆抗体。结论成功制备出一株抗转运蛋白Aat A的单克隆抗体,该抗体为Ig G1亚型,特异性好,效价高,纯度可达97%。
- 邵娜李以圣王湘雨华颖万成松
- 关键词:抗体特异性
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株和回补株的构建被引量:1
- 2015年
- 目的利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的esp F基因及其核苷酸片段;建立以p BAD 33质粒为载体的esp F基因回补实验平台。方法设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD 46介导的重组系统帮助下,打靶片段和菌体esp F基因发生同源重组,PCR和测序验证;PCR扩增esp F及其核苷酸片段的整个ORF区序列,将其克隆入p BAD33质粒,分别将重组质粒转入相应的缺失株,以构建出相应的回补突变株。采用RT-PCR的方法验证在相应的回补突变株中esp F及其核苷酸片段是否转录。结果构建了esp F基因及其核苷酸片段缺失的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株和相应的回补株,且esp F基因及其核苷酸片段在回补株中均发生转录。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 esp F基因缺失株,并建立以p BAD33质粒为载体的EHEC O157:H7基因回补方法,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中esp F基因的调控机制奠定了基础。
- 华颖孙琦王湘雨杜艳丽邵娜张其威赵卫万成松
- 关键词:同源重组突变株
- 埃博拉病毒快速检测技术研究进展
- 1976年埃博拉出血热首次暴发,因其高达90%的病死率引起了人们的广泛关注。2014年西非埃博拉病毒感染再次暴发,仅在几内亚、利比里亚与塞拉利昂3个疫情蔓延最为严重的国家就造成1.4万人死亡。埃博拉病毒属丝状病毒科病毒,...
- 李以圣邵娜万成松
- 关键词:埃博拉病毒
- 文献传递