郭佳玉
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院资源生物学与生物技术研究所更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 紫杉醇合成关键酶BAPT基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2010年
- 目的:克隆曼地亚红豆杉紫杉醇生物合成途径中的关键酶3-氨基-3-苯基丙酰转移酶(3-amino-3-phenylpropanoyltrans-ferase,BAPT)基因,并在大肠杆菌中表达。方法:首先提取曼地亚红豆杉细胞的总RNA,反转录获得其sscDNA,并以其为模板扩增BAPT酶的基因,然后将其与原核表达载体pET32a(+)连接,构建重组质粒pET32a(+)-BAPT,并将重组质粒转入E.coliBL21宿主中诱导表达。结果:扩增获得1338bp的BAPT基因序列,成功构建了原核表达质粒pET32a(+)-BAPT,并在E.coliBL21中实现高效表达。结论:BAPT基因表达产物的分子量约为51kDa,与预期大小一致。该研究为进一步分析曼地亚红豆杉BAPT酶的酶学特性奠定了基础。
- 张志建郭佳玉张鹏张鹏徐盼盼刘博付春华付春华
- 关键词：曼地亚红豆杉紫杉醇原核表达
- ggpps 5'-侧翼序列的克隆及其启动子功能验证被引量：2
- 2010年
- 目的:研究牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPs)基因启动子的活性;方法:从曼地亚红豆杉细胞中克隆ggpps基因5'-侧翼序列,并将该侧翼序列代替pBI121质粒上的CaMV35S启动子,以Gus基因作为报告基因构建植物表达载体,并进一步导入农杆菌LBA4404中获得阳性转化子,然后用叶盘转化法验证该侧翼序列的启动子活性;结果:本研究从曼地亚红豆杉细胞中成功克隆了ggpps基因的5'-侧翼序列,并且验证了该侧翼序列具有启动子活性;结论:ggpps基因的5'-侧翼序列的测序结果表明本实验成功克隆了该侧翼序列,启动子功能验证结果表明ggpps5'-侧翼序列具有启动子活性,这些结果为进一步的通过缺失法进行ggpps基因启动子功能研究奠定了基础。
- 郭佳玉李佟清李书涛张鹏张鹏付春华
- 关键词：紫杉醇启动子活性
