王建云 作品数:5 被引量:11 H指数:2 供职机构: 华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
紫云英非特异性转脂蛋白AsIB259的体外酶活性及在共生固氮中的功能 被引量:5 2014年 将紫云英AsIB259基因编码的一个预测的非特异性转脂蛋白AsIB259(nsLTP,non-specific lipid transfer protein)在大肠杆菌表达菌株Rosetta 2(DE3)中进行了诱导表达,体外测定AsIB259蛋白的脂质结合动力学特征,检测它对不同碳链长度脂肪酸及其衍生物的结合能力,进一步考查AsIB259超表达对紫云英毛根结瘤情况的影响。结果表明:AsIB259具有转脂蛋白的典型特征,与16~22碳链长度脂肪酸的结合活性较强,对茉莉酸也表现出一定的结合活性;AsIB259超表达导致根瘤数量增加1.5倍且固氮酶活性降低,说明该基因在根瘤形成和固氮过程中发挥重要作用。 李一星 王建云 石晓峰 陈大松 李友国关键词:体外表达 共生固氮 紫云英根瘤中特异表达CCPs基因的同源分析及表达定位 被引量:4 2016年 将紫云英根瘤中特异表达的编码CCPs(cysteine cluster protein)同源多肽的蛋白AsF259在大肠杆菌表达菌株(DH10B)中进行体外诱导表达,分别检测其在洋葱表皮细胞与紫云英根瘤中的细胞定位,并利用免疫荧光技术,检测紫云英中AsF259基因的时空表达特征。结果表明:AsF259蛋白分布于洋葱表皮的细胞壁、细胞膜、细胞质;基因表达和融合蛋白定位实验显示,AsF259在根瘤中呈特异性表达,在类菌体分化前期大量表达,且AsF259蛋白与类菌体共定位,表明AsF259基因属于NCR家族,在类菌体分化、维持和共生固氮过程发挥重要作用。 张晓媛 王建云 魏丰 李振鹏 谢福莉 李友国关键词:共生固氮 类菌体 紫云英类受体蛋白激酶Nip43靶蛋白的筛选与初步鉴定 被引量:1 2016年 以紫云英类受体蛋白激酶Nip43的S-TKs结构域构建诱饵载体,通过酵母双杂交技术,筛选获得17个候选的阳性克隆。经过测序分析和Blast比对,最终确定了1个互作蛋白EPN。EPN蛋白是网格蛋白聚合反应中的配体蛋白,可调控网格蛋白的聚合反应。通过实验验证显示,靶蛋白EPN与Nip43蛋白互作最强的区域为ENTH/ANTH结构域。Real-time q PCR检测表明,epn基因参与了根瘤菌早期结瘤过程。 叶竞阳 王建云 熊小波 陈大松 谢福莉 李友国关键词:紫云英 共生固氮 酵母双杂交 紫色酸性磷酸酶基因在共生固氮过程中的功能研究 Aspap1是一个紫云英共生特异表达的紫色酸性磷酸酶(PAP).为了研究Aspap1在共生固氮中的功能,对Aspap1基因的时空表达特征、体外酶活性,细胞定位,超表达和沉默后的植株表型进行了研究.通过荧光定量PCR检测A... 王建云 佀再勇 李一星 谢福莉 陈大松 李友国紫云英体细胞胚再生体系的建立 被引量:2 2014年 研究了外植体种类、植物激素以及水解酪蛋白(casein hydrolysate,CH)浓度等因素对紫云英体细胞胚诱导及植株再生的影响,建立了紫云英体细胞胚的再生体系。结果表明:子叶柄在MS+4 mg/L 2,4-D+1 000 mg/L CH的培养基上,体细胞胚诱导率最高,达到58.3%;体细胞胚分化和植株再生培养基为1/2MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L 6-BA+1 g/L CH,再生率达到60.0%。研究结果为紫云英品种的选育及改良提供了新思路。 李一星 石晓峰 王建云 李友国关键词:紫云英 体细胞胚 植株再生