田志杰
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：成都医学院生物医学系更多>>
- 发文基金：四川省教育厅科学研究项目国家自然科学基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：生物学文化科学医药卫生更多>>
- 自组装多肽水凝胶支架中MSCs的三维培养及成骨分化
- 2012年
- 使用一种新型人工设计自组装多肽(RADA16)水凝胶作为三维培养支架评价MSCs成骨分化情况。将人骨髓MSCs培养增殖后接种到水凝胶中,在成骨分化培养液中进一步培养1～3周。荧光染色法观察细胞形态和存活情况;组织学染色检测MSCs ALP活性;半定量RT-PCR分析成骨特异性基因的表达。绝大多数MSCs在水凝胶支架内能够存活,呈纺锤样形态。诱导培养后蛋白和基因表达水平均检测到ALP活性,在14天时达到峰值。骨晚期分化特异性基因BSP也有表达,且表达量随培养时间延长而增多。自组装多肽水凝胶为MSCs的黏附生长及向成骨细胞分化提供良好的三维微环境,有望成为极具吸引力的骨组织工程支架材料。
- 周庆翰王玉明田志杰林娟
- 关键词：间充质干细胞成骨分化
- pcDNA3.1/CXCR7真核细胞表达载体的构建及其在内皮细胞中的表达鉴定
- 2013年
- 目的:CXCR7是基质衍生因子1(stroma derived factor-1,SDF-1)的新受体,且该受体在血管新生部位的内皮细胞中表达上调,故本研究拟构建CXCR7的真核表达载体pcDNA3.1/CXCR7,并检测其在人脐静脉内皮细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从人肝癌细胞HepG2的cDNA中扩增出约1100 bp的CXCR7基因片段。采用KpnI、XbaI将目的基因和载体pcDNA3.1进行双酶切,将酶切产物加入T4 DNA连接酶16℃连接过夜。将连接产物转化到感受态大肠杆菌中。挑取阳性克隆、提质粒,用双酶切、质粒DNA PCR扩增及DNA序列分析鉴定正确后,采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将其转染人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),通过western-blot检测目的基因在内皮细胞中的表达。结果:阳性克隆经双酶切法鉴定含有CXCR7基因片段,质粒DNAPCR扩增出与CXCR7同等大小的基因片段,基因测序结果与GenBank中序列相同。转染HUVEC后,细胞中CXCR7的表达水平显著上升。结论:成功构建了CXCR7的真核表达载体,可在内皮细胞中正常表达并。为进一步研究其作用机制奠定了基础。
- 戴小珍王兰李红何浪张坤田志杰
- 关键词：趋化因子受体7真核表达载体内皮细胞
- 《生物化学》试题库的编录与应用效果分析被引量：3
- 2015年
- 目的建立具有自动组卷功能、题量丰富的《生物化学》题库系统,实现教考分离。方法依据教学大纲编录《生物化学试题库(V5.0)》系统,采用其自动组卷功能对生物技术专业和医学影像专业学生进行课终考核,应用"正方现代教学管理信息系统"和"试卷分析V1.0系统"以及SPSS软件对试卷难度、区分度、信度和效度进行综合分析和评价。结果与对照组人工组卷考核方式相比,实验组考试成绩呈正态分布,难度适中,区分度更好,成绩可信、有效。结论《生物化学试题库(V5.0)》系统题量丰富,可以用于教考分离,实现考试的公正性和合理性。
- 杨平张坤王玉明田志杰李敏惠
- 关键词：生物化学试题库试卷分析
