藏晓怡
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津医科大学天津市内分泌研究所卫生部及天津市激素与发育重点实验室更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 截短型人骨保护素在CHO-DHFR^-细胞中的表达及活性测定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建截短型人骨保护素(hTOPG)哺乳动物表达载体pcDNA3.1/DHFR-hTOPG,实现其在CHO-DHFR-细胞中的高效表达,获取生物活性较高的重组蛋白。方法:利用基因重组技术构建重组表达载体pcDNA3.1/DHFR-TOPG,按LipofectamineTM2000试剂盒说明书转染CHO-DHFR-细胞,以含50 mL/L透析血清的IMDM培养基培养,氨甲喋呤(MTX)加压筛选高表达细胞株,ELISA法和RT-PCR法测定重组蛋白和基因的表达,并采用破骨细胞样细胞(OLC)诱导分化抑制实验测定重组蛋白的体外活性。结果:重组蛋白的表达量最高可达6 mg/L.72 h,且能够明显抑制OLC生成(P<0.05)。结论:截短型人OPG在CHO-DHFR-细胞中成功高效表达,并具有良好的生物学活性,为进一步的实验研究和临床应用提供了基础。
- 阚伯红藏晓怡李兰英赵孔银
- 关键词：骨保护素
