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郑燕森

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：西北大学生命科学学院组织工程实验室更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇核表达
  • 1篇分子
  • 1篇胞外区

机构

  • 1篇西北大学

作者

  • 1篇蒿慧文
  • 1篇谢鑫
  • 1篇王寅炤
  • 1篇郑燕森

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
CD326分子胞外区表皮生长因子样结构域融合蛋白的表达与纯化被引量：1
2012年
目的:构建含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like1+2结构域的真核表达载体,在COS7细胞中表达相应蛋白并纯化。方法:用PCR扩增编码EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的cDNA,插入真核表达载体pSecTag2B,脂质体法转染COS-7细胞,利用重组蛋白C端的组氨酸标签(6×His-tag)进行金属螯合亲和层析纯化,最后用SDS-PAGE和Western blot法检测纯化的包含EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域融合蛋白的纯度。结果:序列测定的结果显示含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域序列的载体构建正确。经Ni2+-NTA树脂柱亲和层析纯化得到3种融合蛋白,相对分子质量(Mr)分别约为3 600,7 700和12 000。纯度均约为95%。Western blot检测结果显示3种融合蛋白都具有下游的c-myc表位。结论:成功构建了含有CD326分子胞外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达。为制备抗CD326分子不同结构域的单克隆抗体提供了免疫原。
蒿慧文王寅炤郑燕森谢鑫
关键词：真核表达
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