魏盼盼
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：浙江工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 一种转葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其生物催化合成α-熊果苷
- 2016年
- 通过一步法克隆试剂盒将来自野油菜黄单胞菌的转葡萄糖苷酶基因与表达载体pET28a同源重组,构建质粒pET28a-agl,并转化到不同感受态细胞中,筛选出高效表达转葡萄糖苷酶的基因工程菌E.coli BL21 Gold(DE3)plysS pET28a-agl,以催化合成α-熊果苷。利用IMAC亲和层析,获得转葡萄糖苷酶用于其酶学性质的研究。催化合成α-熊果苷的较佳反应条件为:转葡萄糖苷酶的质量浓度0.272 5 g/L,对苯二酚质量浓度11 g/L,麦芽糖浓度1.1 mol/L,磷酸盐缓冲液浓度100 mmol/L(pH=6.5),30℃下摇床反应3 h。研究发现,反应产物α-熊果苷对转葡萄糖苷酶反应有轻微的抑制作用;1 mmol/L K^+对转葡萄糖苷酶的相对酶活有提高作用,1 mmol/L Cu^(2+)几乎能完全抑制该酶活性。
- 王益栋魏盼盼邵梦格张朝晖陈小龙
- 关键词：化妆品添加剂生物催化
- 手性拆分2-溴丙酸甲酯的菌株筛选及优化
- 2017年
- 2-溴丙酸甲酯是一种重要的农药中间体,其光学纯构型可用于多种手性农药的合成。该研究从自然界筛选出可以选择性水解拆分2-溴丙酸甲酯的菌株,并对此菌株进行菌种鉴定和发酵培养基优化,最终通过全细胞催化获得R-2-溴丙酸甲酯。经鉴定,该S-型水解酶菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),对映体过量值达85%以上。经单因素和正交试验分析,确定该菌株最佳培养基成分为麦芽糖20 g·L^(-1),蛋白胨30 g·L^(-1),MgSO_4·7H_2O 0.5 g·L^(-1),NaCl 1 g·L^(-1),玉米油10 mL·L^(-1)。最终脂肪酶活性为优化前的1.64倍,该方法可为多种手性农药单一对映异构体的合成提供初始光学纯原料,从而降低生产成本,并利于农药减量使用。
- 魏盼盼陆跃乐陈小龙
- 关键词：手性农药不对称水解生物催化
- 手性拆分异丙甲草胺中间体的产脂肪酶菌株的筛选及优化被引量：1
- 2016年
- [目的]从土壤中筛选出能选择性水解2-[(2-甲基-6-乙基)苯基氨基]丙甲酯(NEMPAME)的菌株,并对该菌株进行鉴定及优化。[方法]以NEMPAME为碳源,结合传统的罗丹明B平板筛选方法,通过摇瓶复筛,筛选1株具有最高立体选择性水解NEMPAME的菌株。在摇瓶培养下,采用单因素和正交试验,对其培养条件进行优化。[结果]从土壤中筛选出1株催化拆分NEMPAME的菌株,经形态观察和16Sr RNA鉴定,初步认为是铜绿假单胞菌(Pseudomonas)。经培养条件优化后酶活提高了308.98%。[结论]该菌株拆分NEMPAME研究中发现,活性蛋白属于胞内酶,手性选择性为R-型。优化后:葡萄糖10 g/L,酵母20 g/L,Mg SO40.5 g/L,Zn Cl20.5 g/L,橄榄油10 g/L,初始p H值7.5,培养温度37℃,发酵时间48 h。
- 邵义华陆跃乐魏盼盼陈小龙
- 关键词：异丙甲草胺脂肪酶生物催化
