刘明月
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 诱导肿瘤相关巨噬细胞极化增强抗HER2/neu抗体肿瘤治疗效应
- 己知肿瘤免疫监视(tumor immunosurveillance)机制对机体控制肿瘤的发生和发展具有重要作用,近年来越来越多研究显示:宿主免疫系统在肿瘤的放疗和化疗的治疗效应中也具有重要作用,放疗和化疗导致的肿瘤细胞死...
- 徐萌刘明月杜雪相李思睿黎小珠傅阳心王盛典
- 关键词：免疫监视肿瘤治疗肿瘤相关巨噬细胞抗肿瘤免疫
- 文献传递
- 诱导肿瘤相关巨噬细胞极化增强抗HER2/neu抗体肿瘤治疗效应
- 徐萌刘明月杜雪相李思睿黎小珠傅阳心王盛典
- 关键词：免疫监视肿瘤治疗肿瘤相关巨噬细胞抗肿瘤免疫
- mIL-21-hIgGFc融合蛋白在293E细胞中的表达纯化及其对CD8^+T细胞表型的影响
- 2014年
- 目的:在293E细胞中表达小鼠IL-21-hIgGFc融合蛋白,并检测该蛋白对CD8+T细胞表型的影响。方法:运用RT-PCR方法从BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞扩增出IL-21基因,插入到PTT3-hIgGFc载体上,获得重组质粒PTT3-mIL-21-hIgGFc;用磷酸钙瞬时转染293E细胞,48 h和72 h后分别收集培养上清。培养上清经MOLLIPORE LabscaleTMTFF system浓缩后,Protein G琼脂糖柱纯化获得mIL-21-hIgGFc融合蛋白,再用ELISA和SDS-PAGE电泳检测融合蛋白的含量和纯度。mIL-21-hIgGFc刺激P1A小鼠的CD8+T细胞,72 h后,运用流式细胞术检测其表型改变情况。结果:重组质粒PTT3-mIL-21-hIgGFc经酶切和测序确定载体构建成功,ELISA检测表明293E细胞上清中含有787 ng/ml,SDS-PAGE结果显示得到了较纯的融合蛋白,纯化后获得500μg融合蛋白mIL-21-hIgGFc。融合蛋白mIL-21-hIgGFc处理P1A小鼠CD8+T细胞后,CD44lowCD62Lhi CD8+T细胞明显增多。结论:我们成功构建了PTT3-mIL21-hIgGFc重组质粒,在293E细胞中表达并纯化出mIL21-hIgGFc融合蛋白。mIL21-hIgGFc能促进CD8+T细胞向CD44lowCD62LhiCD8+记忆干细胞表型分化,这对于肿瘤过继免疫治疗方案的改进具有重要的参考意义。
- 黄启彬刘明月符少月邢巧刘潇淇王盛典易发平
- 关键词：表达纯化CD8^+T细胞
