李丽芳
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
- 供职机构：山西农业大学信息科学与工程学院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量影响的研究被引量：2
- 2009年
- 本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响。试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维茵肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡。Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组。在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析。结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显,提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用。本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据。
- 李丽芳贾球锋张映聂向庭
- 关键词：禽胰多肽肉鸡实时荧光定量PCR
- 禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中cAMP浓度的影响
- 2009年
- 为探讨禽胰多肽(APP)作用的信号传导机制,以Ca3(PO4)2沉淀法制备的APP粗提液及经Sephadex G-50脱盐后层析的APP制品为材料,用不同方式和不同浓度添加APP两种制品进行动物试验,选取90只1周龄艾维茵肉鸡随机分为5组,每组18只。Ⅰ组为对照组,Ⅱ组和Ⅲ组设为饲饮组,Ⅳ组和Ⅴ组为注射组,在第7周末,屠宰取其肝脏和小肠组织,采用放射免疫法(RIA)对其细胞中的环腺苷酸(cAMP)浓度进行测定。结果发现,人为添加或注射APP后,在肝脏组织中各试验组与对照组比较,cAMP浓度变化主要呈下降趋势,但差异不显著(P>0.05);小肠组织中注射组和饲饮APP粗提液组与对照组相比cAMP浓度均下降,并且APP粗提液组极显著降低(P<0.01);而饲饮层析APP制品组与对照组相比呈升高趋势。提示cAMP在APP发挥其功能的信息传递过程中起到了一定作用,APP还可能存在其他的信息转导途径。
- 李丽芳贾球锋张映聂向庭
- 关键词：禽胰多肽环腺苷酸放射免疫测定肉鸡
- 实验示教微信公众平台的创建及提高实验课教学质量的探索——以“山西动物生理实验平台”为例被引量：2
- 2021年
- 动物生理学是畜牧、兽医和水产等一级学科的专业基础课,其基本理论、知识和技能广泛渗透于后续各门课程中,同时动物生理学实验也是学生能力培养和素质提升的重要载体和主要阵地。利用微信建立动物生理学实验示教平台,将实验操作形象地展示给学生并辅以丰富的拓展资源,学生在手机端进行课前预习、课中对照、课后巩固,不仅提高了实验教学效果,而且还有利于充分发挥课程的育人功能,有效缓解了招生规模扩大带来的实验室紧张和指导教师短缺方面的压力。
- 韩克光王守卫王文魁杜荣李丽芳霍乃蕊
- 关键词：动物生理学实验教学
- 神经生长因子在雄鸡睾丸组织中的定量表达被引量：2
- 2012年
- 为探讨神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)在雄鸡睾丸组织中的表达情况。分别取20 w、24 w、28 w、35 w龄雄鸡睾丸组织,一部分经冻存处理后采用Trizol试剂提取Total RNA。根据GenBank中已公布的原鸡NGF基因序列,利用Primer 5.0设计合成特异性引物,通过两步法RT-PCR扩增出NGF基因片段,然后利用实时荧光定量PCR以β-actin为内参基因进行相对定量分析。另一部分经冻存处理后用RIPA组织裂解液提取总蛋白进行Western blot分析。结果显示两步法RT-PCR扩增出的NGF基因片段经电泳检测为219 bp,符合预期片段大小,与GenBank中登录的鸡NGF基因比对,同源性达99%;NGF基因在不同周龄雄鸡睾丸组织中的mRNA表达水平表现为:性成熟发育期(20 w-28 w)雄鸡睾丸组织NGF mRNA的表达量随鸡龄的增加呈上升趋势,且28 w达到高峰,成年期(35 w)有所下降。Western blot检测到NGF的蛋白表达量随各发育阶段呈增加趋势,在20 w龄前,蛋白表达量处于较低水平,在进入睾丸迅速发育期(20 w-28 w)后,表达量大幅度增加,在35 w基本达到峰值。提示NGF mRNA的表达随着睾丸组织的发生、发育呈现一定的变化规律,且NGF在睾丸组织的发育及精子的发生等阶段起到重要的调节作用,从而为后续研究NGF在禽类生殖系统中的作用提供一定的理论依据。
- 李丽芳张映郝玉娟李桂兰
- 关键词：神经生长因子睾丸雄鸡发育过程实时荧光定量PCR
- 缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子对肉鸡肺动脉平滑肌细胞增殖的影响被引量：1
- 2020年
- 本研究旨在探讨缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对肉鸡肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。取14~16日龄鸡胚,改良酶消化法分离培养肺动脉平滑肌细胞。采用氯化钴作为化学缺氧模拟剂处理肉鸡肺动脉平滑肌细胞,以低氧诱导因子1α(HIF-1α)为缺氧指标,摸索合适的氯化钴使用浓度,构建细胞缺氧模型;在此基础上使用阻断剂ISO-1阻断MIF,比较阻断前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达水平和细胞增殖水平的变化。利用Western boltting检测各蛋白表达水平,利用MTT法及细胞计数方法来检测细胞增殖水平。结果显示:经800μmol/L CoCl2处理24 h后肺动脉平滑肌细胞,HIF-1α表达较正常对照组极显著升高;与正常组相比,缺氧组肺动脉平滑肌细胞MIF及CyclinD1表达均显著升高;与缺氧组相比,阻断剂ISO-1处理后肺动脉平滑肌细胞MIF及CyclinD1表达均极显著升高。综上,缺氧条件下肺动脉平滑肌细胞MIF表达量增加,通过上调CyclinD1的表达来促进平滑肌细胞的增殖。
- 李嘉威任昊李丽芳张瑞强王涛王文魁
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞巨噬细胞移动抑制因子缺氧肉鸡
- 噬菌体展示文库的筛选技术被引量：5
- 2005年
- 噬菌体展示技术(PhageDisplayTechniques,PDT)是一种用于筛选和改造功能性多肽的生物技术。该技术作为筛选与多种靶分子(如抗体、酶类、细胞表面受体等)具有特异性亲和力或活性的肽的一个有效方法,自问世以来,已取得了很大的发展,并被广泛地应用于基因治疗、基因疫苗研究、抗原表位研究、药物设计、研究细胞信号传导等领域[1]。但该技术在两方面仍需进一步完善:(1)寻求更为有效的表达载体;(2)进一步完善筛选方法。
- 李丽芳张映
- 关键词：肽库抗体库生物技术
- NGF及其受体在雄鸡睾丸组织中的定位及表达被引量：1
- 2018年
- 分别取14,20,24,35周龄同批次放养土鸡的睾丸组织,一部分经液氮处理后提取总蛋白,通过Western blot技术检测其表达量;另取一部分通过免疫组织化学技术对目的蛋白进行定位分析,研究神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)及其受体NGFR(P75)在雄鸡睾丸组织中的定位及表达情况。结果表明,NGF及P75蛋白在各发育阶段的雄鸡睾丸组织内均有表达;随着日龄增加,表达部位有所变化,且NGF及P75的蛋白表达量随各发育阶段呈增加趋势。研究结果对于阐明NGF及其受体在禽类生殖发育中调节作用的分子机理有重要意义。
- 李丽芳贾球锋乔琳张晋李嘉威张瑞强
- 关键词：神经生长因子神经生长因子受体蛋白免疫印迹法
- 噬菌体展示技术被引量：7
- 2006年
- 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。到目前为止,人们已开发出了单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等数种噬菌体展示系统。本文主要概述了噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体展示系统研究以及技术特点等,并跟踪了目前该领域的最新研究进展和发展前景。
- 贾球锋李丽芳张映
- 关键词：噬菌体展示
- 利用噬菌体展示技术构建Mhp168株Hsp70随机肽库
- 2020年
- [目的]构建Mhp168株Hsp70 C端基因的噬菌体展示随机肽库。[方法]扩增猪肺炎支原体168株热休克蛋白Hsp70 C端1803 bp的DNA序列。回收Hsp70 DNaseⅠ消化产物中80~150 bp的DNA片段与pC89载体连接。辅助噬菌体超感染转化重组噬粒的E.coli XL1-Blue细胞。检测肽库的多样性,测定库容。[结果]在噬菌体表面展示出Hsp70 C端基因的随机片段融合蛋白。随机肽库库容约为9.9×10^3,滴度约为1.5×10^13 PFU/ml。[结论]所构建的随机肽库可以满足Hsp70构象型抗原表位筛选。
- 贾球锋毛晓娜李丽芳张映
- 关键词：猪肺炎支原体噬菌体肽库
- 猪肺炎支原体P97基因随机肽库的构建被引量：1
- 2008年
- 目的:构建能用于抗原表位筛选的猪肺炎支原体(Mhp)P97基因C-端序列噬菌体随机肽库。方法:以MhpZ株(强毒)基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得MhpP97基因的C-端部分序列,扩增产物用DNaseⅠ消化并回收50bp^100bp的随机片段,将回收的随机片段插入pC89pⅧ型噬菌粒载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,使P97基因随机片段以融合蛋白的形式展示于噬菌体表面,从而成功构建了P97基因特异性噬菌体随机肽库。用PCR及DNA测序法鉴定所建文库的随机性和多样性,测定肽库的滴度并计算库容量。结果:所建肽库的容量约为1.8×104,滴度约为1.3×1012TU/mL,PCR检测及DNA测序结果显示插入片段具有随机性和多样性。结论:所建随机肽库具有较好的随机性和多样性,能够满足后续的抗原表位筛选,为进一步的深入研究奠定了基础。
- 贾球锋李丽芳张映聂向庭
- 关键词：猪肺炎支原体随机肽库
