王晓辉
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 野生型及突变型HIV-1 LTR驱动的荧光素酶稳定表达细胞株的建立被引量：2
- 2013年
- HIV潜伏感染是造成抗病毒疗法无法根除病人体内病毒的主要原因.建立有效的药物筛选模型,是成功筛选高效、低毒性HIV潜伏激活剂的关键.本研究中,我们构建了野生型及κB和TAR顺式元件突变型HIV-1LTR驱动的荧光素酶表达载体,并通过质粒转染人胚肾293细胞,通过G418筛选,获得了稳定表达的细胞克隆.从每个克隆中抽提基因组DNA,进行PCR扩增和序列分析,结果显示:报告载体稳定整合在细胞基因组中.进一步通过TNF-α去处理这些细胞模型,结果显示:10ng/mL TNF-α可以有效地激活野生型LTR和ΔTARLTR细胞,对ΔκB LTR细胞中荧光素酶表达水平没有影响.激活效果还在同一细胞的不同细胞克隆中得到了重复验证.
- 刘林杨少宗林师冠王晓辉孔垂瑾曲喜英朱焕章
- 关键词：HIV-1LTR稳定细胞系
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS275对HIV潜伏细胞株激活效应的初步研究
- 2014年
- 组蛋白的去乙酰化是造成HIV潜伏感染的主要影响因素之一.目前,开发潜在的组蛋白去乙酰化酶抑制剂用以清除HIV病毒潜伏库,是人们重要的研究方向.MS275是苯胺酸类的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,已经被批准应用于临床抗肿瘤实验,但其是否具有抗HIV潜伏治疗作用仍未见报道.本研究以HIV-1潜伏细胞株A7为模型,通过流式细胞技术检测MS275药物的不同浓度、作用时间对HIV-1潜伏诱导激活效率的影响;通过CCK-8方法检测药物对HEK293及Jurkat细胞的毒性作用.结果显示,MS275化合物对HIV-1潜伏细胞具有激活作用,并表现出剂量和时间效应关系;与SAHA相比,MS275对细胞毒性更低.本研究提示MS275有望成为抗HIV-1潜伏治疗的候选药物.
- 王晓辉杨少宗朱豫琪曲喜英王鹏飞曾汉献朱晓莉朱焕章
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂
