姚一龙
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 西藏林芝地区牦牛卵泡颗粒细胞体外分离培养和形态观察被引量：3
- 2018年
- 旨在建立牦牛卵泡颗粒细胞模型以研究牦牛生殖生理机制。从林芝市牛屠宰场采集牦牛卵巢,并采用口吸管法在体视显微镜下分离卵巢表面直径为2-5 mm卵泡内的颗粒细胞,用于体外培养。结果表明：原代颗粒细胞培养12-48 h时处于潜伏期,此时细胞刚刚贴壁并且黏附不牢固,增殖分化速度较慢;培养72-96 h时,细胞进入指数增殖期,此时细胞多呈放射状,增殖分化速度最快;培养144 h时形成颗粒细胞单层;然而传代颗粒细胞生长速度较快,48 h后细胞进入指数增殖期,72 h后颗粒细胞生长至培养皿的90%左右,形成颗粒细胞单层。
- 王玉恒索朗斯珠强巴央宗徐业芬牛家强姚一龙王英杰
- 关键词：牦牛卵泡颗粒细胞
- 湖羊和巴什拜羊FSHR基因多态性分析被引量：2
- 2017年
- 本文旨在了解绵羊(湖羊和巴什拜羊)促卵泡激素受体(FSHR)基因3'-UTR特征,分析高、低繁殖力绵羊品种FSHR基因3'-UTR突变位点多态性差异,并探索其机制。研究获得788 bp的湖羊和巴什拜羊FSHR基因3'-UTR序列,两者一致性为98.17%,且均含有加尾信号、保守的ARE元件和多个miRNA结合位点;池DNA测序在FSHR基因终止密码子后325nt处发现一个碱基T插入/缺失,命名为*325del T;多态性分析发现绵羊FSHR基因*325del T位点有3种基因型(TT型、T-型和--型),在湖羊群体中T为优势等位基因(频率为0.604),而在巴什拜羊群体中-为优势等位基因(频率为0.635);荧光素酶活性分析发现*325del T突变对绵羊FSHR转录活性无显著影响。发现FSHR基因*325del T的多态性可能与绵羊繁殖性能有关。
- 王德迪安外尔.热合曼姚一龙潘增祥决肯.阿尼瓦什李齐发
- 关键词：湖羊巴什拜羊FSHRSNP多态性
- 转录因子PAX4调控湖羊FSHR基因转录活性
- 2018年
- 本研究旨在了解湖羊FSHR基因5′-UTR序列特征和转录因子调控,为揭示湖羊FSHR基因转录调控机制提供依据。采集3只成年湖羊母羊的心、肝、脾、肺、肾、胃、肌肉、大肠、小肠、子宫和卵巢11种组织,采用PCR扩增和克隆测序技术获得湖羊FSHR基因5′-UTR序列,生物信息学方法分析其序列特征,RT-PCR技术分析转录因子PAX4在湖羊11种组织中的表达情况;合成湖羊PAX4基因过表达载体pcDNA3.1-PAX4,并将其转染到猪卵巢颗粒细胞(GCs),用流式细胞仪测定了GCs的细胞凋亡率。双荧光素酶报告基因系统检测PAX4对湖羊FSHR基因转录活性的影响。结果表明,湖羊FSHR基因5′-UTR全长为161bp,含有典型的E-box、CAAT-box和GC-box等转录调控元件以及GATA-2、Sp1和PAX4等转录因子结合位点。转录因子PAX4在湖羊各组织中均有表达,其中在卵巢组织中等表达。湖羊PAX4过表达载体可在卵巢颗粒细胞高效表达(P<0.01)。过表达湖羊PAX4基因后,卵巢颗粒细胞凋亡率显著上升(P<0.05),卵巢颗粒细胞和COS-7细胞中FSHR基因5′-UTR双荧光素酶报告载体的荧光素酶活性显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下调。综上表明,转录因子PAX4抑制湖羊FSHR基因转录活性,从而促进卵巢颗粒细胞凋亡。
- 王德迪李隐侠姚一龙潘增祥决肯依明曹少先李齐发
- 关键词：湖羊FSHR转录活性
- 牛主要抗病候选基因的研究进展被引量：3
- 2018年
- 牛抗病基因与其自身的抗病性和免疫能力有一定的相关性,因此研究相关抗病基因对提高牛自身免疫能力和选育优良后代有重要意义,文章着重介绍了国内外关于天然抗性相关巨噬细胞蛋白1(natual resistant macrophage protein 1,Nramp1)、主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)、甘露糖结合凝集素(maflnan binding lectin,MBL)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)及干扰素基因(interferon,IFN)与牛某些疾病相关性的研究进展,及其是否可用于后代育种的分子标记,如MHC与奶牛的乳房炎密切相关;牛TLR4基因的外显子1760C>T突变中的CC基因型可作为奶牛乳房炎抗性筛选中的分子标记等。笔者认为研究这些抗病基因可更深层次了解牛的抗病机制,同时借助先进的技术手段如分子标记、基因工程等,可更好的选育出抗病后代,抗病基因在育种中的应用将是未来研究抗病性和免疫能力的主要方向。
- 孙宏宇索朗斯珠徐业芬牛家强姚一龙张入丹王冬经
- 湖羊Sp1基因CDS区克隆及其对颗粒细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2017年
- 旨在探讨湖羊Sp1基因序列特征及其对颗粒细胞增殖及凋亡的影响。采用克隆、测序获得湖羊Sp1基因CDS区并用生物信息学方法分析其序列特征;NJ方法构建基于Sp1氨基酸序列的系统进化树;RT-PCR方法检测Sp1基因湖羊组织表达谱;克隆方法构建湖羊Sp1过表达载体;试剂盒检测Caspase-3活性和CCK-8值;利用流式细胞术检测人卵巢颗粒细胞(KGN)凋亡率。结果表明,湖羊Sp1CDS区长2 340bp,编码779个氨基酸残基,与人的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别为94.28%和95.75%;湖羊与牛的亲缘关系最近;Sp1基因在湖羊卵巢、卵泡等组织中广泛表达。本研究成功构建了湖羊Sp1过表达载体并转染人卵巢颗粒细胞(KGN);试验组Caspase-3活性显著高于对照组(P<0.05),CCK-8值检测结果相反。表明过表达Sp1基因抑制KGN-细胞增殖(P<0.05)、促进KGN-细胞凋亡(P<0.05)。Sp1基因在哺乳动物中高度保守,湖羊Sp1基因可抑制人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖、诱导其凋亡。
- 姚一龙姚一龙李隐侠张俊孟春花张俊钱勇孟春花
- 关键词：细胞增殖
- 牦牛FKBP6基因启动子区克隆、鉴定与分析被引量：1
- 2017年
- 本研究旨在了解牦牛FKBP6基因5′调控区和启动子区特征,为探讨牦牛和犏牛睾丸组织中FKBP6基因差异表达机制提供依据。利用克隆测序获得牦牛FKBP6基因5′调控区序列,采用生物信息学方法分析其序列特征;采用双荧光素酶报告基因系统鉴定牦牛FKBP6基因核心启动子区,利用生物信息学软件预测与精子发生有关的转录因子结合位点。通过克隆测序和序列拼接获得了1 354bp的牦牛FKBP6基因5′调控区序列,与普通牛的一致性为99.71%;牦牛FKBP6基因5′调控区序列含有潜在的启动子区、典型的CAAT-Box和CpG岛,但未见TATA-Box;荧光素酶活性分析发现,牦牛FKBP6基因的核心启动子区位于5′调控区的-263^-167nt区域,含有CAAT-Box、E-Box、CTCF和CREB等与精子发生相关的转录因子结合位点。牦牛FKBP6基因核心启动子的鉴定和精子发生相关转录因子结合位点的发现为进一步研究牦牛睾丸组织中FKBP6基因的表达调控奠定了基础。
- 姚一龙李伯江李齐发
- 关键词：牦牛核心启动子
